1、蒸发光散射技术讨论1、 蒸发光检测器属于质量检测器，理论上可以检测到挥发性低于流动相的任何物质，但对有紫外吸收的样品组份检测灵敏度比较底，重现性比较差（出厂要求重现性 RSD6%即可） ，现常用于检测没有紫外吸收的物质。主要原理是，流动相及组份在蒸发室，先被雾化，流动相蒸发，组份形成气溶胶，然后进入检测室，用激光照射照射气溶胶而产生光散射，测定光散射的光强而获得信号。组份质量（m）与散射光强（I ）的关系为：lgI=blgm+lgkk 和 b 是与蒸发室温度及流动相性质等试验条件有关的常数。剩下的就是一些注意事项和简单保养的问题，比如流动相中不能有盐，使用前先升温给气，再进流动相，使用完后先停
2、流动相，后降温，最后停气，光机。最后说明一下，使用完毕后可将流动相改为水及甲醇，调节温度及气流量冲洗蒸发室，这样可以增加使用寿命，降低噪音。2、 zzz79 朋友所说“我们有一台 Alltech ELSD 2000，也许是因为蒸发光散射技术本身的问题，重现性特别差。在方法学学研究时，更是没法做。 ”我想您指的重现性较差，可能是说峰面积的重现性比较差吧。如果在每天测定中均采用随行对照品进行校对，含量的重现性还可以说得过去。我个人认为气体的流速对峰面积的影响非常大，所以如果您使用纯净的气源，精准的气体流速控制，至少在一天内的重现性不成问题。根据 ELSD 的工作原理，必须使用对数方程外标两点法进行
3、计算。但是，在实际应用过程中，如果对照品浓度和被测样品浓度较为接近，直接采用峰面积计算也不会有显著性的影响（尽管其不是合理的方法） 。3、 比较赞成楼主的说法，ELSD 很多人都说它重现性很差，其实我根据我自己的经验，重现性差一般应该是指其峰面积重现性较差（和 UV 比较） ，但 其色谱条件的重现性还是比较稳定的。至于标准曲线的做法，我曾经做过一系列的比较实验，也查询了一些资料，目前尚没有定论到底以峰面积和浓度直接做线性还是用自然对数还是以常用对数，三种方法都有。至于我们在实验中应该如何做线性，个人认为：不必拘泥，首先用峰面积和浓度直接做线性，如果相关系数不好，再尝试用对数关系（自然对数或常用
4、对数） 。一般都可以解决问题，不象那位同学说的方法学根本没法做，应该还是可以做的。至于楼主所说的，对照品和供试品溶液接近时可直接用峰面积计算，我不是很认同，当很接近时，可以考虑做一个比较窄的范围做线性，你如果直接用两点法做计算的话，必须得有一些数据支持，否则文章是很难发表的，也没有说服力，很容易被人质问，至于做随行对照的问题，按正规要求，不只ELSD，其他检测器的液相也应该这样做，只是因为仪器相对的稳定性所以大家都不做，对于 ELSD 当然做随行对照最好，至于是否一定要做，我觉得如果是仪器一直都是你一个人在用，而且条件没有变，预热也够充分，那么不做也行，但是这只是考察了自己的一个实验而已，不敢
5、建议大家都不做，在您自己做实验时建议你还是做随行对照的好，也好心里面有底，免得造成不好的影响，呵呵。建议做随行对照。谈到 ELSE 仪器的使用上，也有一些体会，但一时难以细细道来，主要就是雾化温度和气体流速的设置上，如果这两个参数设置合理，一般情况下都不会有什么问题，大部分的问题都是出在温度和流速设置不合理上。基线噪音的出现也多是因为两个参数设置不合理而导致雾化器漂移管污染那就只好清洗了，也有个别人因为操作失误而导致问题的但不多见，一般仪器厂商提高的参数设置只能用来参考，实际实验时很少完全和他提供的条件一致的，多比他提供的参数稍微高些，开始设置温度建议高些，如果基线没问题再慢慢调整到最佳温度流
6、速。再有，就是因为 ELSD 为质量型检测器，所以样品的预处理就相对更重要些，尽可能地分离纯化将会使你的方法学更容易建立，太多的成分在里面容易干扰正常检测。本人只用过 ALTECH 2000，其他牌子的 ELSD 只是在展会上见过，遗憾。见到一个内置工作站的ELSD 介绍，觉得不错，但没用过，不知道可有朋友用过，感觉如何？如果不错，倒可以考虑购买，呵呵4、 法国的蒸发光散射检测器本人用过，Sedex-55 型，Sedex-75 型，都用过，也有五年多的历史了。主要用于中药成分的含量测定，也作过麦芽糖。感觉其重现性 RSD 达到 3%以下没问题。同时该品牌ELSD 采用超地温雾化技术，蒸发室温度
7、一般低于 50 摄氏度，我一般用 40 左右，我曾经做过人参皂苷 Rg1 与 Rb1 的标准曲线几乎重合，则也充分证明其为质量型检测器，曾经做过中药注射剂的指纹图谱，在同一机器，同一牌号色谱主的情况下重现性较紫外好得多。但更换色谱柱峰形变化较大。ALTECH 2000 本人也接触过，知道其不是同一天其样品峰面积差异相当大。5、 对于蒸发光散射检测器的分离装置，我了解也不是很多，Alltech2000 采用双模式方式即在挥发性溶剂情况下，采用非分流模式；而水相或大流量情况下采用分流模式，其漂移管较短采用的是高温蒸发模式，蒸发温度 90 摄氏度以上，同时漂移管较短，是不锈钢材质。Sedex-75
8、型采用的是低温蒸发模式，由于其雾化室较大采用自然分流效果较前者好，同时其蒸发管（漂移管）长度较前者长许多，厂家工程师介绍有 2m 多长，且为螺旋形可以减缓漂移速度，同时其蒸发温度较低一般为 40 摄氏度左右，有利于被测物质形成较大结晶。从而增加测定的准确性。但Sedex 的管路均为玻璃材质，易破损，但我用的有 5 年了，中间还搬过两次家也没出什麽问题。6、 蒸发光散射检测器（ELSD ）是一种通用型的检测器，其优势在于能检测无紫外吸收或紫外吸收很弱的物质，如：碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性剂等。另外，在没有标准品和化合物结构参数的情况下也能检测未知化合物 。理论上，可
9、检测挥发性低于流动相的任何样品；流动相低温雾化和蒸发，对热不稳定和挥发性化合物亦有较高灵敏度；广泛的梯度和溶剂兼容性，无溶剂峰干扰；因此,ELSD 应用比较广泛。 您说的“有些紫外检测器能检测到峰，而在蒸发光散射检测器中无法检测”情况不难理解:1、有些物质的挥发性比流动相大，进入飘移管后先于流动相而蒸发，到不了检测池，也就检测不到。2、有些物质的含量可能很微量，而紫外吸收很强，因此在紫外检测器中可以看到色谱峰。而在 ELSD 中，由于很微量的微粒或者液滴散射光的的能力有限，所以检测不到或色谱峰很弱。7、 我第一次使用蒸发光检测器，遇到一个问题跟大家请教下。色谱条件：流动相甲醇：酸水=80：20
10、，飘移管温度 60 度，气体压力 25psi仪器：waters2420样品浓度 3mg/ml，进样量 10ul，存在问题：连续进样 4 次，但是峰面积一次比一次小，后来竟然有杂峰出现，而且该杂峰具有一定的规律性，具体请见附件。请问是哪里出了问题呢？8、 看了下图，没用过 waters2420 的，我用的是 Alltech 的，原理应该相通吧。感觉上有几点地方可以注意下：1.不知道你的漂移管温度和喷雾器温度为什么那么低。还有压力换算成流速是多少。按气体流速2.5， 80甲醇来说，温度最少也得 80 度吧，喷雾器温度也低了点，容易造成污染并堵塞喷雾器的。从你的图上看，很象这个原因。可以适当提高温度
11、试试。2.样品浓度感觉高了点，虽说蒸发光灵敏度低，但和 waters DAD（2996 ）比也差不了多少，基线不会那么杂的。3.样品浓度低时为了提高灵敏度会采用降低温度和气体流速的办法，但你浓度很高，温度适当提高不至于有那么大影响，相反就容易堵塞喷头了。4.以前曾遇到过一种特殊情况造成杂峰，仪器清洗，检查好久，发现是特殊原因：气体不纯。你换瓶气试试看。特别是气快没时特别容易产生杂峰。9、 1、飘移管温度确实有些低，设置成 75 度，杂峰少了很多。气体流速也增大到 30 个压力，大约 2.2吧2、原来的流动相是仪器混合的，改成人工混合后，杂峰就完全消失了。峰行也漂亮了。据说是泵不稳定看来要多积累
12、阿10、 我现在遇到一个问题让我很头痛,就是用蒸发光散射检测器测不准含量.我的样品含量总是测得比实际投料高.做回收率结果表明浓度为 0.5mg/ml 的回收率为 220%,浓度为 1.0mg/ml 的回收率为 150%,浓度为1.5mg/ml 的回收率为 130%.对照品进 5ul 和 10ul,进 10ul 和 20ul 计算的同一个样品含量都相差很远 . 我的样品的浓度都在线性(外标 2 点)范围内,并且基线很稳定.我怀疑是因为进样量太低了,我的样品浓度为 0.5mg/ml,进样 20ul, 各位大虾,麻烦帮忙想一下,到底是哪里出了错.11、 进样量 ELSD 的检测器的检测限一般为 25
13、ng，由于 ELSD 在不同剂量段的响应曲线存在差异，尤其在较低剂量段响应曲线非线性，而且其最低检测能力较低（即最低检测限较大） ，所以要想取得准确的定量结果，以及提高微量组分的检测能力，进样量也是 HPLC-ELSD 实验条件的优化因素之一。通常，在建立 HPLC-ELSD 含量测定方法时，可以在色谱柱承受限度范围内采用较高进样量，以有利于获得较好线性和减小定量分析误差。在建立 HPLC-ELSD 有关物质含量测定方法时，一方面要通过色谱柱、流动相、流动相流速、载气流速、漂移管温度等多个条件的优化，以提高信噪比，另一方面也要考虑加大进样量，进一步提高有关物质或小组分的检测能力。实验表明，进样
14、量增大 4 倍， ELSD 响应值漂移可减小 40。样品浓度 ELSD 用于较高浓度的常量分析，流动相引起的响应漂移误差较小，在较高浓度范围，ELSD 的剂量响应关系为直线，在低浓度范围，ELSD 的剂量响应关系呈二项式曲线。根据经验，样品浓度的跨度应不大于二个数量级。首先要感谢楼上,但是我的绝对进样量已经达到 10ug,比检测限高多了 .“进样量增大 4 倍， ELSD 响应值漂移可减小 40。“到底要提高到多大的量,ELSD 的剂量响应关系才为直线呢? 12、 ELSD 不要用外标两点法计算线性及含量，都应该用外标两点对数法lnAablnC13、 各位前辈,本人用蒸发光散色检测器时出现一个
15、问题, 请大家帮忙分析. 分析同一浓度的样品,同一流动相不同的比例,漂流管流速不变样品峰面积相差一倍,不知什么原因,可能是 ELSD 参数问题, 另外求助漂流管温度的设置遵循的公式是什么.14、 你的流动相比例变动，应该是水的比例增大蛮多吧，问题可能是水比例增大后，你原来的漂移温度无法把溶剂完全蒸干，溶剂和样品在一齐就增大了体积，当然散射的光强度就会增大，峰面积也会增大，试试提高温度或增大气流量。15、 增益值就是信号放大的倍数增益越大，峰面积就越大，当然这是相对的dalansong 战友说的溶剂比例问题在 ELSD 中也比较常见，但我觉得是蒸发不完全，你可以试着提高漂移管温度漂移管温度的设定
16、一般是经验值吧，不同品牌的检测器温度要求不一样，比如纯水，奥泰的需要溶剂完全气化，100 摄氏度以上；而 Waters 的是部分气化，估计 80 摄氏度以上就可以了16、 漂移管温度是由流动相的比例按公式计算出来的，不知道你的流动相是什么17、 如果现在这个问题还没搞清楚，我告诉你原因（可能的）吧！1.流动相比例发生变化了，是不是保留时间和峰宽也发生变化了？如果是，请继续往下看；如果不是，我就不知道什么原因了2.如果峰宽变窄意味着单位时间内漂移管内的物质浓度变高了。如果常用 ESLD 的话，头脑中马上反应出来：响应值 A 的对数和浓度 C 的对数呈线性，且截距不为零，所以，这里浓度稍微有些差别
17、，响应值差别可就大了，各个响应值的和（峰面积）就有显著变化。PS：这种情况如果用 UV，峰面积也有差别，但不会很大，因为峰面积是对响应值和时间的积分，UV响应值和浓度成正比。对于 ELSD，同样的柱子和流动相组成，保留时间越长，往往峰越宽，所以峰面积就很快变的很小比如你改变流速试试不知道我有没有讲清楚，没讲清的话和我电话联系，我们讨论讨论18、 对于同一流动相、同一比例时（ELSD 的参数一致时）1、ELSD 的峰面积与组份的质量成指数关系。2、ELSD 的瞬间峰高同样与瞬间质量成指数关系。3、对于同一种物质的同质量时，如果峰宽越大，峰面积就会约小。4、在色谱流出物中，保留时间/ 保留体积越大
18、，那组份的展宽就越大。对于同一流动相、不同比例时（ELSD 及不挥发性组份一致时）峰高与流动相各种组份的粘度、表面张力等性质相关。19、 蒸发光散射检测器（ELSD）蒸发光散射检测器是一种通用型的检测器，可检测挥发性低于流动相的任何样品，而不需要样品含有发色基团。蒸发光散射检测器灵敏度比示差折光检测器高，对温度变化不敏感，基线稳定，适合与梯度洗脱液相色谱联用。蒸发光散射检测器已被广泛应用于碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸、药物以及聚合物等的检测。主要优势：1) 可检测挥发性低于流动相的任何样品；2) 流动相低温雾化和蒸发，对热不稳定和挥发性化合物亦有较高灵敏度；3) 广泛的梯度和溶剂兼容性，无
19、溶剂峰干扰；4) 辅助载气提高了检测灵敏度，保持检测池内的清洁，避免污染；5) 高精度雾化和蒸发温度控制，保证高精度检测；6) 可与任何 HPLC 系统连接。ELSD 与几种常用的检测器之间的对比1、ELSD2、UV3、RID4、 MS应用范围：1、通用2、有光吸收的化合物3、通用4、通用响应：1、质量相关2、化学相关3、折光度相关4、质量相关灵敏度：1、高2、高3、低4、高未知物检测：1、能2、不能3、能4、能流动相影响/梯度：1、不影响2、本底影响3、影响4、不影响基线稳定性：1、好2、较好3、差4、好ELSD 工作原理：雾化：液体流动相在载气压力的作用下在雾化室内转变成细小的液滴，从而使
20、溶剂更易于蒸发。液滴的大小和均匀性是保证检测器的灵敏度和重复性的重要因素。蒸发光散射检测器，通过对气压和温度的精确控制，确保在雾化室内形成一个较窄的液滴尺寸分布，使液滴蒸发所需要的温度大大降低。蒸发：载气把液滴从雾化室运送到漂移管进行蒸发。在漂移管中，溶剂被除去，留下微粒或纯溶质的小滴。UM 3000 蒸发光散射检测器采用低温蒸发模式，维持了颗粒的均匀性，对半挥发性物质和热敏性化合物同样具有较好的灵敏度。检测：光源采用激光，溶质颗粒从漂移管出来后进入光检测池，并穿过激光光束。被溶质颗粒散射的光通过光电倍增管进行收集。溶质颗粒在进入光检测池时被辅助载气所包封，避免溶质在检测池内的分散和沉淀在壁上
21、，极大增强了检测灵敏度并极大地降低了检测池表面的污染。关键技术指标 操作条件 15C 35C，相对湿度90% 蒸发区温度范围 室温 130C 温度调节增量 1C 温度控制精度 1C 气体要求 氮气或空气 溶剂流速 10 l 3 mL/min 气体输入压力 2 5 bar 气体压力测量精度 0.01bar 气体消耗量 1 4 L/min 电源要求 220VAC, 50Hz 光源 650nm 激光二极管 检测元件 光电倍增管 检测极限 1 ng （葡萄糖，直接进样） 典型定量范围 0.2 10g （葡萄糖，HPLC ） 噪音水平 0.1 mV (1ml/min ) 信号输出 0-10 mVDC,
22、或 0-1 VDC 计算机接口 RS232 检测角度 120 显示 LCD20、 蒸发光检测器检测的原理是影响检测器的信噪比：1、雾化气流的纯度和压力 2、流动相，在不使被测物质蒸发的前提下，温度越高，流动相蒸发越完全，色谱图基线越好、信噪比越高。因此选择流动相时最好是沸点低 的。3、所有进入到散射池的物质都可被检测，而且响应值只与物质的质量有关。所以要保证流动相干净无杂质！21、 流动相，在不使被测物质蒸发的前提下，温度越高，流动相蒸发越完全，色谱图基线越好、信噪比越高。但是温度过高的话，会使流动相爆沸，也会影响基线。22、 ELSD 主要是是针对 UV 无吸收或吸收很小而且与溶剂挥发性差异
23、较大的样品的测试蒸发光散射检测器（ELSD）的原理及特点 蒸发光散射检测器（Evaporative Light-scattering Detector）是通用型检测器，可以检测没有紫外吸收的有机物质，如人参皂苷、黄芪甲苷等。1993 才由 Alltech 公司商业化生产。一、ELSD 原理 恒定流速的色谱仪（高效液相、逆流色谱、高效毛细管电泳等）洗脱液进入检测器后，首先被高压气流雾化，雾化形成的小液滴进入蒸发室(漂移管，drift tube)，流动相及低沸点的组分被蒸发，剩下高沸点组分的小液滴进入散射池，光束穿过散射池时被散射，散射光被光电管接收形成电信号，电信号通过放大电路、模数转换电路、计
24、算机成为色谱工作站的数字信号 色谱图。二、特点 1.洗脱液需要雾化，所以雾化气流的纯度和压力会影响检测器的信噪比。 2.流动相要蒸发掉，a/所以不能使用不易挥发的物质来调节流动相的 pH 值。 b/可以通过蒸发温度的调节来使比被测物质沸点低的组分蒸发。c/在不使被测物质蒸发的前提下，温度越高，流动相蒸发越完全，色谱图基线越好、信噪比越高。d/如果被测物质沸点接近或低于流动相的蒸发温度，则无法检测；不过，100%的水做流动相，蒸发室温度也才设为 150 摄氏度，沸点比水低的有机物质完全可以用气相色谱仪进行分离检测了。e/由于流动相和溶剂蒸发了，使用 ELSD 检测器收集的色谱图一般没有溶剂峰；而
25、且梯度洗脱没有折光视差效应，一般不会出现基线漂移。 3.检测光散射变化，所有进入到散射池的物质都可被检测，而且响应值只与物质的量（？质量）有关。 4.浓度跟峰面积不成线性，分别取自然对数后成线性 。23、 ELSD 主要是是针对 UV 无吸收或吸收很小而且与溶剂挥发性差异较大的样品的测试蒸发光散射检测器（ELSD）的原理及特点 蒸发光散射检测器（Evaporative Light-scattering Detector）是通用型检测器，可以检测没有紫外吸收的有机物质，如人参皂苷、黄芪甲苷等。1993 才由 Alltech 公司商业化生产。一、ELSD 原理 恒定流速的色谱仪（高效液相、逆流色谱
26、、高效毛细管电泳等）洗脱液进入检测器后，首先被高压气流雾化，雾化形成的小液滴进入蒸发室(漂移管，drift tube)，流动相及低沸点的组分被蒸发，剩下高沸点组分的小液滴进入散射池，光束穿过散射池时被散射，散射光被光电管接收形成电信号，电信号通过放大电路、模数转换电路、计算机成为色谱工作站的数字信号 色谱图。二、特点 1.洗脱液需要雾化，所以雾化气流的纯度和压力会影响检测器的信噪比。 2.流动相要蒸发掉，a/所以不能使用不易挥发的物质来调节流动相的 pH 值。 b/可以通过蒸发温度的调节来使比被测物质沸点低的组分蒸发。c/在不使被测物质蒸发的前提下，温度越高，流动相蒸发越完全，色谱图基线越好、
27、信噪比越高。d/如果被测物质沸点接近或低于流动相的蒸发温度，则无法检测；不过，100%的水做流动相，蒸发室温度也才设为 150 摄氏度，沸点比水低的有机物质完全可以用气相色谱仪进行分离检测了。e/由于流动相和溶剂蒸发了，使用 ELSD 检测器收集的色谱图一般没有溶剂峰；而且梯度洗脱没有折光视差效应，一般不会出现基线漂移。 3.检测光散射变化，所有进入到散射池的物质都可被检测，而且响应值只与物质的量（？质量）有关。 4.浓度跟峰面积不成线性，分别取自然对数后成线性 。ELSD 主要是是针对 UV 无吸收或吸收很小而且与溶剂挥发性差异较大的样品的测试。可能的原因有1、漂移管温度可能太低了。2、可能
28、是流动相，或柱子的问题(固定相脱落、柱子上吸附的杂质病产生的信号) 。3、使用时间过长，电路上有灰尘，造成了信号的接触不良。 4、ELSD 主要是是针对 UV 无吸收或吸收很小而且与溶剂挥发性差异较大的样品的测试，既然 UV 检测更好，那何必非得用 ELSD 呢？ 5、可能的原因是其中挥发性较强的组分随流动相一起蒸发而去，因此在 ELSD 上没有信号；但这样的组分有可能因为有紫外吸收而在 UV 上有信号。如果是这样的问题，并不能通过调整雾化气体流速和漂移管温度而得到根本性的改善。 6、的检测器对有吸收的化合物的物质检测的灵敏度高而对于近紫外吸收和无紫外吸收的化合物，在上的响应就比高（当然挥发性
29、较强的组分不一定） ，反之，在上的响应一般比高，所以检出的峰比多啊24、 很有可能是检测器被污染了，如果自己不会清洗，联系仪器公司来帮助清洗。为避免检测器被污染，平时就要注意仪器的维护：1.使用含水量较大的流动相时，漂移管温度在不影响基线的情况下尽量升高 ，建议高于 105 度。否则流动相来不急挥发残留在漂移管中，会出现杂峰。还要注意排气管要高于仪器，废液半满时要及时倒掉。2.进样结束时不要急于降温，至少维持温度 15 分钟再降温，同时通氮气，将检测器中的残留物冲洗干净。最好能用甲醇冲洗。3.以前我们用的是压缩空气，没有氮气干净，容易污染检测器。基线噪音也大。建议使用纯净的氮气。25、 蒸发光
30、散色检测器，model200 这个型号没用过，但实用注意事项应该差不多，要注意：A、开机，先开氮气 5min 左右再进流动相；关机，先关流动相 5min 左右再关氮气。B 、注意把废气导到室外。C、如果载气供应中断，马上停泵。D、流动相中含有盐、酸或碱，管及之前用水和甲醇冲洗系统。2、exhaust tube 一般直接通室外大气。3、一罐氮气 (压力 2.0bar)大约用 3035hr4、基线起伏很大，a、没有接地线，b、漂移管有异物26、 我用蒸发光检测法做多糖中单糖的含量测定请问1、样品含量测定的 RSD 要控制在多少以内。2、重现性、精密度、稳定性、加样回收都要怎么做，RSD 分别要控制
31、在多少以内。现在的问题是，柱子每天做出来的峰面积差很多，一天一个样，同一天内还可以。流动相是乙睛和水，每天我用甲醇冲洗后保存，发现第二天的柱压都要增大，但是对测定可能影响不大。请教原因和解决方法。27、 一般控制在 2%以内.对于 ELSD,由于采用对数法进行计算,控制在 2%以内是很容易的.“柱子每天做出来的峰面积差很多，一天一个样，同一天内还可以“可能原因:1、流动相手工配置，差别较大；2、 建议检查一下 ELSD。另外，甲醇冲洗，可能使多糖聚凝在柱子上，引起柱压增大。如果流动相中乙腈比例较大（如大于30%） ，可以不用甲醇冲洗。以前做过黄芪含量测定，通常几个月不冲柱子，重现性很好。不知道
32、多糖是否适用。28、 1 糖柱最好能够使用保护住，也需要经常冲洗，这种柱子一堵就全部 over 了2 某品牌的 ELSD 重现性的确不好，特别是室温不稳定的情况下，相差 10%都有可能，据推测应该是飘逸管温度控制不好3 流动相的问题，如果是在线混合请检查混合器29、 大家好，我要测一个成分的含量，该成分是糖醇，195 纳米才有紫外吸收，现正在用蒸发光散射测，发现同一份标准品溶液，测出来的重复性不太好，做标准曲线有点难，请问有什么方法可以解决？我用的仪器是 waters 2420 ELS Detector气体压力：30漂移管：45.0 C30、 在保证样品稳定、进样量相同的情况下考虑一下流动相在
33、此温度下是否能充分挥发，保证栽气流速稳定。但并不是漂移管温度越高越好，因为温度太高会使流动相沸腾，反而会增加背景噪音，同时还有可能导致溶质的部分挥发，降低信噪比。故最优温度应为在流动相（包括其中所含的盐）基本挥发的基础上，产生可接受噪音的最低温度。在其它条件不变的情况下，载气流速越小，形成的物质粒子半径越大，对激光的散射能力越强，相应的响应信号越大。但并不是载气流速越小越好，因为当载气流速太小时，流动相不能完全挥发，背景噪音会增加，信噪比也会降低。最优载气流速应是在可接受噪音的基础上，产生最大检测响应值时的最低流速。31、 目前我在用蒸发光检测器时发现，某些氨基柱，电信号太高，无法进行试验32
34、、 仪器：Alltech 2000Es 型 目前我在做糖，用的是氨基柱，最初用的是 Inertsil 的氨基柱，没有问题，后来买来 AKZO NOBEL Kromasil 氨基柱，首先用异丙醇 0.2ml/min 冲洗 2 个小时，后用甲醇小流速过夜，次日用流动相乙腈-水（80：20）试验，结果出现了没有进样状态下电信号在 1200mv 以上居高不下的情况，折腾一天后，晚上用乙腈-水（80 ：20）冲洗过夜，第三天再试，仍然出现同样的现象。而换用以前的旧色谱柱却非常正常。不知是何原因，请大家畅所欲言。33、 1、确定空白溶剂的背景信号，是否有较大的噪音。2、降低样品浓度。信号是否变小。3、适量
35、升高蒸发温度。蒸发光检测器首先是雾化液体流动相转变成细小的液滴，从而溶剂更易于蒸发；较大的液滴，在蒸发步骤中需要更高的温度。剩余溶质颗粒越大，散射光的强度就更大。为了维持颗粒大小的均匀性，一般采用低的温度，一般温度越高，颗粒较小，响应值对应变小。通过以上几个步骤，判断信号高的原因。注意：流动相中不要有非挥发性盐，酸等在漂移管气体流速，蒸汽温度等没有达到实验设计的要求前，不要连接液相，别打开流动相要控制好仪器放置的实验室内温度的波动，最好恒温不要有比较剧烈的震动这些对基线比较重要，特别是最后一点容易忽视，但很重要！ELSD 没有稳定之前一定不能和泵出口连接（或者说不能进流动相）！尽管我一再交待使
36、用人员这个简单的问题，但是他们还是经常犯这种错误，再次强调！对于室内温度的问题，我觉得没有太大问题，毕竟它里面的问题是高于室温的；但是对于这些精密分析仪器来说，不能有震动！这个问题一般情况下不会引起注意的，我也是把仪器换了好多地方之后发现，有时一点轻微的震动是多么的可怕！ 34、 ELSD 的原理极简单。HPLC 柱分离后的洗脱液使用喷雾器在干空气中喷雾加温时，从洗脱液的雾中溶剂蒸发，析出溶解的溶质分子。这个粒子进行光散射检测。 （只洗脱液时，全量蒸发成为无检测状态） 。ELSD 由于以流动相挥发为大前提，限定为挥发性物质。即，不能使用磷酸缓冲液等。初期的 ELSD使用洗脱液雾的全量蒸发系统。
37、由于洗提液雾不是均匀的粒径，大粒径的液滴较难蒸发，还有，由于尘埃、不溶物，要注意，流动相中的杂质和柱填充剂洗脱物等是产生噪声的原因。ELSD 的优点不挥发的物质可检测由于溶剂蒸发，即使进行梯度法也不会影响基线。受外部温度的影响少ELSD 的缺点只能使用挥发性洗脱液（碳酸铵盐：所谓 LC-MS 洗脱液）挥发性物质检测灵敏度非常低与 UV 相比，检测灵敏度小，动态量程小可以检测到多余的物质（柱流失物）35、 1.检测器污染2.管路脏了建议：先排查检测器，不知你是什么牌子的蒸发光，不能提出具体建议；不是检测器问题的话，就要用大量水冲洗你放酸水的管路，流速可以稍大（不接柱子）36、 1.噪音大可以用“
38、基线象是大波浪“来形容,但是那个波浪是尖的就像不断在出峰! 考虑是不是有不能挥发（或不能完全挥发）物质存在，首先排除意外引入的难挥发物质如流动相、管路、色谱柱等引入的（挨个排除试试） 。如果不是，那我觉得有可能是在你设定的蒸发器温度、载气流速下，5mmol/L 的乙酸铵不能挥发完全，因此，你可以去掉乙酸铵试试，如果噪音有改善，那你得考虑提高下蒸发器温度和载气流速（温度是关键）2.用完后应该怎么处理才会把它冲洗干净呢？分析结束后，断开检测器与色谱柱的联结（就是别让流动相继续往检测器里跑了） ，保持分析时蒸发器温度和载气流速 15 分钟以上，然后再关机器就可以。3.还有如果用这个检测器是比紫外检测
39、器的噪音小吗？单纯讲基线噪音，ELSD 的噪音是比较大（一般要比紫外要高几个数量级，视 ELSD 的型号） 。但噪音大小是相对的，我指的是信噪比（对于检测来说这个才更有意义） 。如果被检测物质在检测波长的紫外吸收系数很小（外推极限，没吸收 UV 检测器就没有峰） ，而相对的，在 ELSD 给出的信号高，噪音就显得小了；而相反，如果被检测物质的紫外吸收还可以（比如共扼、苯环等存在） ，一般来说，UV 的噪音更小些。37、 我觉得很有可能是有外界因素干扰：1，试试将检测器接地线；2，将各插头拔下后重新接入；3，重启电脑和工作站；4，将其他电器尽可能的远离液相。蒸发光散射检测器 SEDEX 75 G
40、AIN（信号放大系数）设定是多少？输出电压选择的是 01V 还是 010mv？如果 GAIN 设定为 8以上，输出电压选择的是 01V，则楼主所贴的图的噪音是正常的。如果不是，除了“小药丸”讲的那些，还可考虑以下几个问题：1.气源：气体流量是否准确？气体是否纯净（水分、尘埃）？2.雾化器是否正常工作？3.加热器是否正常工作？4.漂移管是否污染了？5.废气（液）出口是否顺畅？1。你说的型号不熟悉，但蒸发光散色检测器都差不多，掌握一个原则：开机时，先开气流先升温，再进流动性；关机时，先彻流动性，后停气流后降温。至于间隔的时间，以 15 分钟为宜。2。尽量把废气导出室外。3。最好选择空气压缩机或者氮气压缩机，用氮气罐，很快就用完了。4。流动相中尽量不要使用酸、碱、盐，必须使用，也应选择具有挥发性的，比如醋酸铵等。 38、
