1、1附件 1实验动物饲养管理的 SOP1、目的 为规范 SPF 级动物房内大小鼠、仔猴的饲养规范,保证试验质量,特制定本制度。 2、范围适用于本公司 SPF 级动物房内的工作人员。3、内容3.1 准备工作 3.1.1 操作人员按 SPF 区人员进出标准操作规程要求进入动物饲养区。 3.1.2推门时应感觉到正压存在,如有异常及时通知相关人员。 3.1.3 观察看温、湿度计,并记录读数。温度湿度变化范围超过规定范围时,要及时向实验人员和实验室负责人汇报,以便尽快采取措施。 3.1.4 观察水瓶有无漏水,有无动物逃逸,动物健康情况,若有异常情况,应及时向实验人员和实验室负责人汇报并记录情况。 3.1.
2、5 检查每盒动物的饮水及摄食状况,若饮水及摄食不正常的动物笼,先检查是否饮水瓶阻塞,再观察动物是否有疾病征兆。若有,立即上报。 3.1.6 发现动物死亡,要调查死亡原因,判断事故死亡还是异常死亡,并报告,不能确定原因的要将整盒动物送出屏障待查。 3.2 SPF 大、小鼠的饲养管理 SOP3.2.1 鼠喜阴暗、安静的环境,对环境温度、湿度很敏感,经不起温度的骤变和过高的温度。最大温差小于等于 4,温度在 2026,相对湿度24070,一般鼠饲养盒内温度比环境高 12,湿度高 510。噪音 60 分贝以下,氨浓度 14/(mg/m)以下通风换气大于等于 15 次/小时。光照循环条件是是 12 小时
3、明/12 小时暗,如果光照条件与上述不符,且没有实验方案支持,必须通知实验动物管理部的管理人员。 3.2.2 鼠饲养在聚碳酸酯的实底的笼盒里,笼子底部放高压灭菌的玉米芯做垫料。除非实验方案有特殊的要求,和/或有动物管理委员会的批准,方可以进行改动。鼠是群居性动物,可能时尽量成群饲养,但每笼不得超过 5 只。 3.2.3 饲料和饮水:鼠通过实验室等级颗粒料或等同的其它饲料自由采食,或者由实验动物管理部管理层或专题负责人提出建议。加饲料时,观察动物采食量,若尚有剩余饲料,则与新鲜饲料混合后喂。根据笼内鼠的多少参考如下饲料量饲喂,不宜太多。工作日每天检查一次料盒,周末一次。在更换笼具时,根据需要添加
4、饲料。鼠采食量一般为 5g(100g 体重 24 小时) ,请根据动物的实际体重计算并投喂。鼠通过水瓶自由饮水。工作日每天检查 1 次水瓶,周末一次,每周至少更换一次水瓶。鼠饮水量一般为 811ml(100g 体重 24 小时) 如果要求进行饲料/饮水的消耗量计算,则要根据实验方案进行记录。某些实验需要对饲料/饮水进行限制,或者给予特殊的饲料/饮水。 3.2.4 鼠笼具的更换 鼠笼具(包括垫料)每周更换两次,通常为周二和周四。更换时,将鼠笼从笼架上取下放在工作车或工作台上,鼠取出放在干净的笼具中,加上盖子,放好标签,将笼架用 75%酒精擦洗干净后放回笼架。换笼具时同时观察动物健康情况。换下的笼
5、具和盖子放在推车上推到饲养室靠污物走廊的门口后开门将鼠盒放在污物走廊地上,然后关闭该门。工作车不准推入污物走廊。换出脏垫料做无害化处理。 3.2.5 清洁卫生:饲养室内保持整洁,门窗,墙壁,地面,鼠盒,笼架每天擦试。 33.2.6 记录保存:动物管理记录表(附表 4)中,记录着饲养室日常管理和卫生清洁的情况,这些文件在记录阶段保存在饲养室内。3.3 SPF 仔猴饲养的 SOP3.3.1 目的:建立 SPF 实验仔猴的饲养管理程序。3.3.2 饲养规程 a. 预饲养(检疫) a.1 在预饲养阶段的动物必须与其它动物相对隔离。 a.2 实验仔猴的预饲养期至少为 5 天。 a.3 在接收动物后预饲养
6、期间,必须建立实验仔猴个体档案。档案内容包括:动物来源、接收日期、既往史、初期检查状况、免疫情况及其它实施步骤。个体档案随动物一起保存管理。 a.4 饲养员、兽医及有关动物实验人员必须对实验仔猴进行检疫检查。 实验仔猴健康状况的一般检查:精神是否活泼,对外界反应是否正常;粪便是否成形,尿液或其他排出物中是否带血或颜色改变;动物机体局部有无肿胀、肿块、损伤、眼睛分泌物过多等现象。具体如下:A 粪便:颜色:红色、赤褐色、黑褐色性质:坚硬 、软、粘稠、拉痢量:无、少量、中量、大量4B 精神状态:狂燥的、欢快的、安静的、沉郁的C 动作:敏锐的、迟钝的D 食物剩余情况:0、1/4、1/3、1/2、2/3
7、、全量E 其他:体表有无脱落、换毛、外伤、咳嗽、月经等。b. 日常饲养 b.1 必须每天记录饲养室的温、湿度,并观察动物的饮食、行为有无异常。进入饲养室后,随后关门,防止饲喂时动物逃逸。随后,工作人员应先检查水、电、换气、空调等设施的运转情况,氨味是否超标,查看温湿度是否正常。饲养室的温度和相对湿度的要求:光照每天 12 小时、温度 2224、湿度50%75%,氨15mg/m3,噪声60 分贝、换气 1 日 2 次,每次 30 分钟。b.2 每天更换一次 IVC 笼盒,清洁饮水瓶、食具;同时兽医、饲养员要注意观察动物的行为。 b.3 必须保持实验仔猴的饮食新鲜。根据实验仔猴的体重投料,每日上、
8、下午各饲喂 1 次,每次饲喂 150-200g,实验特殊要求的例外。每天加饲料 2 次,上午 8:309:00,下午 4:305:00。b.4 供实验仔猴食用的水果、瓜果等初饲料外的其他辅料,应按计划适量供应。 每天加 2 次新鲜干净的富含维生素 C 的水果或蔬菜,以补充实验仔猴体内不能合成的维生素 C,以防止坏血病。如果要给予特殊的饲料时,则应做好给食记录。但是,实验中的猴未经专题负责人的批准,不得给水果(苹果,香蕉等)或蔬菜,更不能更换饲料。5b.5 给水。每天更换 2 次水,以保证水源充足。如果实验方案对饮水有特殊要求或者混合其他物质给水时,则遵照实验方案的要求执行。如果发现饮水嘴松了或
9、坏了,应立即更换。实验方案中有禁水要求时,则遵照实验方案中的要求执行。b.6 饲喂动物结束后,用消毒液或酒精消毒 IVC 笼盒、笼架、超净工作台、地面等。当天花板、墙壁、门不干净时,则用一次性抹布擦干净。结束每一饲养室的工作后,必须随手关门。 b.7 遇动物发生异常现象,须及时报告兽医隔离诊断,并进行护理治疗。b.8 记录:在进行本规程所规定的饲养、管理、检查、更换及清扫工作时,在相应的记录表(仔猴个体档案 实验仔猴饲养管理记录表 )上记录相关内容。3.4 小型猪的饲养管理 SOP本动物实验室一般不长期饲养小型猪,只在实验期间做短暂停留,在停留期间需要按照动物实验室饲养管理操作规程操作并做好记
10、录(附表 4) 。3.4.1 小型猪的饲养小型猪饲喂可用混合饲料或固体饲料,饲喂量按体重 23,每日向猪笼内食盒喂食 12 次,仔猪自由采食。实验用小型猪,应在每天采食量大于 1kg 时,开始限食。微型猪 2 月龄后开始限食,每天 0.5kg,但保证充足的饮水。根据实验要求,饲料中不得加入抗生素和激素类添加剂。断奶前仔猪一般采用自由采食方式,喂以小型猪初始日粮,逐步换成自由采食小型猪生长日粮,然后过渡到高纤维的小型猪维持日粮。在 60 日龄开始限制饲喂,每日喂两次,总量 1kg 并一直维持下去。3.4.1 小型猪的管理63.4.1.1 在接收动物后,饲养员、兽医及有关动物实验人员必须对实验小型
11、猪进行检疫检查。建立实验小型猪个体档案(附表 2) 。档案内容包括:动物来源、接收日期、既往史、初期检查状况、免疫情况及其它实施步骤。个体档案随动物一起保存管理。3.4.1.2 清洁:猪笼内要打扫洗刷干净,铺垫物或锯末每天更换一次。7附表 1仔 猴 编 号出 生 日 期 性 别体 重 健 康 状 况记 录 人遗 传 背 景来 源 :每 日 健 康 /进 食 /饮 水 等 情 况 :发 病 史 :治 疗 史 :进 入 实 验 室 时 间仔 猴 个 体 档 案8附表 2编 号出 生 日 期 性 别体 重 健 康 状 况记 录 人遗 传 背 景每 日 健 康 /进 食 /饮 水 等 情 况 :进 入
12、 实 验 室 时 间来 源 :发 病 史 :治 疗 史 :小 型 猪 个 体 档 案9附表 3年 月动 物 基 本 情 况 操 作 人 备 注添 加 饲 料(笼 ) 添 加饮 水(瓶 )添 加 辅 食( kg) 更 换 笼 具(笼 ) 清 洗饲 养 笼 具(笼 )工 作 台 擦 拭消 毒 地 面 清 扫 消毒“正 常 ”则 在 框 内 记录 数 量“异 常 ”记 “”,并 在 “备 注 ”处 详 细压 差 换 气 次 数实 验 仔 猴 饲 养 管 理 记 录 表日 期 /时间仔 猴 饲 养 室 喂 养 情 况室 温 湿 度10附表 4年 月小 鼠 (笼 ) 大 鼠 ( 笼 ) 仔 猴 小 型 猪室 温 ( ) /湿 度实 验 动 物 管 理 记 录 表日 期 /时 间动 物 基 本 情 况 喂 养 情 况操 作 人备 注( 记 录 异常 情 况 、动 物 实 验情 况 等 )小 鼠 饲 养室 大 动 物 饲养 室 工 作台 擦拭 消毒地 面清 扫消 毒更 换垫 料(笼 )清 洗饲 养 笼具(笼 )大 鼠 饲 养室“正 常 ”则 在 框 内 记 录 数 量“异 常 ”记 “”,并 在 “备 注 ”处 详 细 记 录 添 加饲 料(笼 ) 添 加饮 水(瓶 )