1、1实验三 黄柏中小檗碱的提取、分离与鉴定(一) 实验目的要求学习和掌握小檗碱的结构特点和特殊的理化性质，及小檗碱的一般提取精制方法。(二) 实验的基本原理1. 小檗碱的提取原理根据水溶性季铵碱在乙醇和碱水中溶解度大性质，利用乙醇回流法和碱水提取法进行提取。2. 小檗碱的分离原理(1)利用小檗碱的盐酸盐在水中溶解度小（1：500），采用盐析法使小檗碱沉淀析出，达到纯化的目的。(2)利用盐析法分离小檗碱(三) 实验内容1. 用乙醇回流提盐析法、醇索氏提盐析法和碱渗漉提盐析法提取黄柏中盐酸小檗碱。2. 溶剂重结晶精制盐酸小檗碱。3. 薄层显色反应鉴定盐酸小檗碱(四) 实验药材仪器与试剂1. 实验药材
2、 黄柏 30g。2. 仪器：250ml 烧瓶、500ml 烧杯，冷凝管、渗漉筒 250ml，粉碎机、减压过滤装置、纱布、漏斗，层析缸等。3. 试剂：氧化钙，氨水，NaCI，盐酸、H 2SO4，三氯甲烷，甲醇，乙醇，改良碘化铋钾等。(五) 实验步骤及现象Day 1 （2011-5-21）1. 小檗碱的提取 (醇索氏提盐析法 )称取黄柏 (图 3-1)15.00g，粉碎成粗粉，用滤纸包成筒状，置于索氏提取器 (图 3-2)中 (长度要适宜，使滤纸筒正好位于提取器上下两孔之间 )。用棉花包住提取器侧管，防止蒸汽接触使侧管的温度过高。一开始再烧瓶中加入 105ml 的 95%乙醇，量不够，回流 4-5
3、 次颜色仍较深 ,后又补加少许。水浴提取，刚开始提取液是黄色的（图 3-3），回流七次后颜色变淡，大概用三个小时。回流过程中由于溶沸腾，有些蒸汽直接从下口进入提取器，所以如果观察到颜色变淡反应程度不一定高（图 3-4）。取出烧瓶中的提取液加水约 40mL，滤出沉淀，沉淀物深黄色，很黏。向滤液中加入 6.05g NaCl 固体 ,溶解后静置过夜 ,得到黄色的固液混合物 ,固体很少抽滤干燥 ,得到粗提物 (3-5)。Day 2 （2011-5-22）2精制产物过少，没有精制。23.鉴定（1）检识反应 取盐酸小檗碱少许，加蒸馏水 3ml，缓缓加热。 第一次取样过多，大量固体没有溶解。后重新取样，溶解
4、显黄色 (3-7),和另一组已加碱液的溶液对照明显（ 3-6），加氢氧化钠试液 2 滴，显橙色，但不明显 (3-8)，溶液放冷， 加丙酮 4 滴，即发生混浊 (3-9)。（2）薄层色谱鉴定吸附剂：硅胶 GF254 薄层板（5.0cm X 10.0cm）。样 品：自制盐酸小檗碱（用甲醇溶解）展开剂：三氯甲烷-甲醇-氨水（1440.5）两个样品同时展开,左侧为提取样品,右侧为精制后的春样品。显 色： a.展开前，点样后，先在可见光下观察（ 3-10），有亮点的痕迹，拖尾现象较明显，粗体样品的 Rf 值较大（ 3-11），然后在紫外光下观察，可以看到样品的移动痕迹。b.喷改良碘化铋钾液显色，在荧光下
5、观察，样品吸光明显（ 3-13）。(六 ) 结果计算及分析小檗碱得率：滤纸 +产物重 0.4603g 滤纸重 0.4516g原料重 15.00g得率 =（ 0.4603-0.4516） /15.00=0.58%（过少）原因： 1、提取时间不够；2、溶剂量少；3、溶剂（ 95%乙醇）极性小；4、装滤纸筒、过滤等过程损失。比移值：实验组 Rf=4.1/7.6=0.539对照组 Rf=3.4/7.6=0.447原因：溶剂极性小，含非极性杂质较多，样品和硅胶板亲和力小，保留时间短，随展开剂移动较快。（七）心得体会合作不仅是小组成员之间的，也是每个小组之间的。31-1 1-2 1-31-4 1-5 1-61-7 1-8 1-91-10 1-11 1-1241-13 1-14 1-151-16 1-17 1-181-192-1 2-2 2-352-43-1 3-2 3-363-4 3-5 3-63-7 3-8 3-93-10 3-11 3-1273-13
