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几种常见疾病的造模方法.doc

上传人:精品资料 文档编号:10510899 上传时间:2019-11-24 格式:DOC 页数:5 大小:25KB
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1、几种常见疾病的造模方法1.血管性痴呆大鼠模型动物选取选用健康级 SD 雄性大鼠,体重 280- 320 g,动物于安静环境下分笼饲养,室温控制在(22 士 1)的范围内,相对湿度 60%,光线自动控制,明(07: 00- 19: 00)暗(19: 00-07)交替,给予充足清洁饮水、摄食。处理大鼠 10%水合氯醛腹腔注射(1 g/ kg)麻醉后,将其仰卧固定。分离右颈总动脉(CCA) ,颈内动脉(ICA)及颈外动脉(ECA )并挂线备用,结扎 ECA 与 CCA,用动脉夹夹闭 ICA 远心端后,迅速于 ECA 与 ICA 分义处作一切切口,从切口处插入一端加热成光滑球形尼龙线(直径为 0. 2

2、5 mm,距球端 2cm 处作标记)。线插入 ICA后,于入日处稍稍结扎尼龙线与入口处 ICA 段,然后松开夹闭 ICA 的动脉夹,继续插入尼龙线至稍有阻力后略回撤,至线插入深度为(18. 5 士 0. 5)mm 左右,实现大脑中动脉阻塞导致脑缺血。再次结扎入口处,尼龙线外留约 1缝合皮肤。2h 后轻轻提拉所留线头至有阻力,实现大脑中动脉再灌,则造模完成。纳入动物入选的标准(按照 Zea Longa 5 级评分法取评分为 2,3,4 分的动物,动物于缺血2h 后出现对侧前肢倦曲或行走转圈或行走向对侧倒体征则纳入,动物无此体征或于缺血 2h 后仍不清醒者弃去。2.大鼠酒精性肝病模型取材体重 12

3、5- 155g 雄性 SD 大鼠,环境温度 18一 20 0C,湿度 70%左右,自由采食全价营养颗粒饲料,垫料为紫外线消毒后的卫生纸。将酒精体积分数为 0. 52 的红星二锅头自酒( 北京酿酒总厂生产) ,按体积比分别稀释成 400Io .450Io .500Io ( v/ v)备用。处理按每周所测得的体重给子每日早晚白酒灌胃各 1 次。第 1 周将稀释成 40%的白酒按剂量4g/(kg.d)、每次 0. 5m1/ 100g 灌胃,第 2 周按剂量 8g/(kg.d)、每次 1. 0ml/ 100g,灌胃,第 5 周开始将稀释成 45%的自酒按 9g/(kg.d),每次 1. 0m1/ 10

4、0g 灌胃,第9 周将稀释成50%的白酒按 10g/(kg.d) 、每次 1. 0m1/ 100g 灌胃,第 11 周起改用自由饮酒至第 12 周,以浓度 50%白酒作为主要饮料,日供给量 40ml,同时限制饮水。纳入弃去死亡的大鼠,即为模型大鼠。3.肝郁脾虚证大鼠模型取材健康雄性 SD 大鼠,体重(230 士 10) g,SPF 级,所有动物提前购入,适应性饲养3d, 5 只/笼。光照节律 12L: 12D(6 :0018 :00),室温( 22 士 2) ,保持动物室安静。相对湿度保持 3%一 40%,喂常规颗粒饲料及饮用水。处理大鼠适应性饲养 3d 后进行初步筛选,将过于活跃和过于安静的

5、大鼠排除, 以慢性束缚方法制作慢性应激大鼠模型,束缚架自制(T 型束缚台:底座宽 10 cm,长 20 cm,厚 2 8 cm)上端束缚台长 22 cm,最宽处 66 cm,两侧分别有适合四肢放置的四槽及一条可调节的粘贴软带),将大鼠束缚于束缚架上,两条粘贴软带分别固定大鼠的胸部和腹部,放入饲养箱中,每日 3h,早 8 点到 11 点,连续 21d,.纳入弃去死亡大鼠,即为模型大鼠。4.糖尿病大鼠模型取材健康 SD 大鼠 60 只,SPF 级,雄性,体重 190 230g.大鼠预先饲养 3d.处理造模前动物禁食 16 h,按 50 mg/ kg 的剂量一次性快速腹腔注射 0. 5%的链脲佐菌素

6、。注射完后给食给水,2h 后灌胃给予 25%的葡萄糖水,防止大鼠低血糖的发生。于造模后第 3 天、第 10 天分别测定尿糖和空腹 6h 的血糖。尿糖阳性且空腹 6h 血糖16.7 mmol/ L 者为糖尿病大鼠。纳入如上所述。5.类风湿关节炎肾虚证大鼠模型取材选用 6 周龄无特殊病原体级 SD 大鼠,雌雄各半。正常饲料适应性喂养 1 周。处理去势法:按常规方法做去势手术,即摘除双侧卵巢与睾丸,术后 28 d,取适量牛ll 型胶原溶液(浓度为 2 g/ L)逐滴加入至等容积的不完全弗氏佐剂中,牛 1 型胶原终浓度为 1 g/ L;冰浴中用匀浆器充分乳化以滴入水中不打扩散为度;取乳化后的混合物,按

7、 0. 2 mL/只,即 200ug 牛 ll 型胶原 /只,于尾根部皮下注射;7d 后按 0. 1 mL/只,即100 ug 牛 11 型胶原/只,于尾根部皮下加强免疫一次。纳入弃去死亡大鼠,即为模型大鼠。6.虚寒证大鼠模型取材SPF 级雄性 SD 大鼠雌雄各半,体质量(240 士 10)g。处理以注射用氢化可的松琥珀酸钠( 20 mg/ kg)肌肉注射,每天 1 次,连续 14 d。纳入弃去死亡大鼠,即为模型大鼠。7.骨质疏松大鼠模型取材健康 SPF 级雄性 SD 大鼠,12 月龄,体质量(330 士 10) g。室温 1923室内饲养,每日 12h 光照,定量给食,自由饮水。处理经苯巴比

8、妥钠( 110 mg/ kg) ip 麻醉后,经腰背部切口切除双侧卵巢,手术后分笼饲养。纳入手术 4 周后,弃去死亡大鼠,即为模型大鼠。8.血瘀型颈椎病大鼠模型取材健康 SPF 级雄性 SD 大鼠,3 月龄,体质量(330 士 10) g。处理首先采用动静力失衡造大鼠颈椎间盘退变模型。将大鼠颈后部剪毛和清洁后,按氯氨酮0. 1/kg 体质量行腹腔注射麻醉,取颈背部正中纵向切口,长约 2 一 2. 5 cm,切开皮肤后,横向切断颈夹肌和头、颈、寰最长肌,切除颈骼肋肌与头半棘肌,然后依次切除棘上和棘间韧带,建立动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型。观察 2.5 个月后,采用肾上腺皮质激素加肾上腺素应用

9、法造出血瘀症型,氢化可的松 10mg/kg 体质量肌肉注射,用药 13 d,然后肾上腺素 0.36 mg/kg 体质量皮下注射,用药 1 d。纳入弃去死亡大鼠,即为模型大鼠。9.激素性股骨头坏死大鼠模型取材4 月龄健康 Wistar 大白鼠雌雄各半。以正常饲料适应性喂养 2 周。处理精确称重后,肌肉注射地塞米松磷酸钠(10 mg/kg ),每周 1 次,共注射 14 周.纳入弃去死亡大鼠,即为模型大鼠。10.膝关节骨性关节炎兔模型取材健康 6 月龄新西兰大白兔 52 只,雌雄各半,空腹体重 22.5kg.处理先剪去兔左后肢踩关节以上 1cm 一腹股沟下 1. 5 cm 区域兔毛,树脂绷带经 65一 85热水浸泡软化后,以兔膝关节为中心缠绕,松紧以不脱落为度,使兔膝关节仲直位固定,模型制备过程中随时观察绷带固定情况,若出现松动或脱落者要及时重新固定,制动满 6 周。纳入若制备的模型兔出现足底溃烂、感染、上呼吸道感染、骨折等动物,均予以排除。

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