1、实验汇报实验名称：血红蛋白电泳项目名称：两种碱性血红蛋白样品处理方法的电泳结果实验时间：2018 年 9 月 17 日实 验 室：龙泉驿区妇幼保健院检验科实验人员：杨松报告单位：成都温伦科技有限公司1、实验目的：1、掌握生理盐水处理血红蛋白样品的方法2、掌握四氯化碳处理血红蛋白样品的方法3、掌握电泳仪实验的操作4、分析两种碱性血红蛋白样品处理方法电泳结果的不同2、实验原理：血红蛋白电泳就是利用在电场的作用下, 由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小, 形状等性质的差异, 使带电分子产生不同的迁移速度, 从而对样品进行分离, 鉴定或提纯的技术，在临床检验中 , 主要用于分离各类蛋白分子
2、。3、实验方法：琼脂糖电泳法4、实验器械：样品：10 个 EDTA 抗凝管抽取的病人全血样品试剂：0.9%生理盐水 500ml，四氯化碳 500ml，界面液 250ml，美国 Helena Spife3000 血红蛋白电泳检测试剂盒器材：移液枪，一次性移液枪头若干，EDTA 抗凝管 10 个，玻璃试管 10 个设备：美国 Helena Spife3000 全自动电泳仪五、实验步骤：1、取得医院检验科 EDTA 抗凝管抽取的病人全血样品 10 个，编号为1，2,310。2、将 1-10 号十个个样品分别用移液枪取 200ul 到玻璃试管中，编号为 1-1,2-1,3-1,.10-1。3、将 1-
3、10 号 10 个样品进行生理盐水前处理，处理方法如下：-用 0.9%生理盐水混匀，3500 rpm 离心 10 分钟.-吸走弃去清液。-以上步骤连续进行三次。-完全吸走弃去上清液。-20ul 制作后的样本 +80ul 溶血素，混匀。-取溶血后的样本 17ul 加入样品孔。4、将 1-1 到 10-1 号 10 个样品进行四氯化碳前处理，处理方法如下：-用 0.9%生理盐水溶液 5000L 与样品混合。-3000rpm 离心 5 分钟。-弃去上清液，只留下红细胞。-加入 200ul 蒸馏水溶解红细胞。-加入 300ul 的四氯化碳，混合均匀，3000rpm 离心 5 分钟。-取上面萃取后的血红
4、蛋白液 17ul 加入样品孔。5、记录下这 20 个样品的样品孔编号，将样品孔放入样品板，摆放进电泳槽中，放上加样刀锋，添加界面液，放上琼脂板，掀开琼脂板保护膜，吸取多余界面液，放上碳棒，关上电泳槽的盖子，启动设备开始电泳。6、大约 30 分钟后，电泳完成，取出碳棒放好，铲掉琼脂板上的盐桥，取出琼脂板，放入染色槽中进行染色脱色干燥。7、大约 30 分钟后，染色脱色干燥完成，取出琼脂板，放入扫描仪中进行扫描，用 PT 软件进行分析数据，记录数据。六、实验数据：七、实验结果：采用前处理方法二（四氯化碳）处理的血红蛋白，相对于前处理方法一（生理盐水）处理的血红蛋白，电泳结果 HbA2 偏高，HbA1
5、 偏低，电泳条带更加聚集。8、参考文献：电泳技术以及其临床应用 ISBN 7-5381-4777-2实验室质量管理 CNAS-CL27琼脂糖电泳的发展和研究 ISBN：978703058338前处理方法一（生理盐水） 前处理方法二（四氯化碳）样品编号 HbA HbA2 HbA HbA21 97.47% 2.53% 97.28% 2.72%2 97.03% 2.97% 96.82% 3.18%3 96.71% 3.29% 95.96% 4.04%4 97.19% 2.81% 95.84% 4.16%5 96.07% 3.93% 95.56% 4.44%6 96.97% 3.03% 95.98% 4.02%7 97.23% 2.77% 96.86% 3.14%8 96.88% 3.12% 96.52% 3.48%9 97.21% 2.79% 96.86% 3.14%10 97.45% 2.55% 96.95% 3.05%
