1、 1 / 5植物组织培养知识点总结第一、二章1 植物组织培养概念、分类、应用、创始人、奠基人2 实验室各分室名称、主要设备、主要功能3 无菌操作技术流程4 表面消毒剂种类及作用效果5 培养基成分及各成分的作用6 植物组织培养三大难题7 那些成分要抽滤灭菌第三、四章8 植物细胞全能性原理9 名词解释：愈伤组织、脱分化、体细胞胚、人工种子10 体细胞胚的特点11 愈伤组织形成发育的三个时期，两种类型，良好愈伤组织的特点12 植物离体微繁，一般过程，各阶段注意事项13 褐变，影响褐变的因素，克服褐变的措施；玻璃化，无糖培养技术第五、六、七章14 植物脱毒方法、原理15 脱毒率包括两种方面含义16 人
2、工诱导单倍体的三种途径17 花药培养得到的再生植株倍性如何，为什么18 花药培养的应用，花药培养力，一般培养过程。19 离体幼胚培养，胚发育有几种类型？各有何特点？20 离体授粉 离体受精21 简述胚乳培养的意义第八、九章22 原生质体概念，两种分离方法，纯化方法。23 酶法分离植物原生质体的酶液组成及作用24 简述植物原生质体培养基的特点25 原生质体融合，融合的主要方法26 体细胞杂交过程27 融合产物的种类及特点28 植物细胞无性系变异，特点29 提高植物细胞无性系变异频率的方法30 细胞突变体的类型及对应的筛选方法2 / 5植物组织培养知识点总结第一、二章1 植物组织培养概念、分类、应
3、用、创始人、奠基人概念：是一种将植物的器官、组织或细胞在适当的培养基上进行无菌培养，并重新再生细胞或植株的技术。分类：（1）按外植体来源和特性分：植株培养 胚胎培养 器官培养 组织或愈伤组织培养 细胞或原生质体培养；（2）按培养方法分：固体培养 液体培养 固体液体两相培养应用：（1）克服远缘杂交中杂种不育性，种子无活力或配发育不全的植物获得后代，一年多代育种（2）培育三倍体（3）单倍体育种（4）提高突变频率，筛选变异类型（5）经过细胞融合得到体细胞杂种（6）种质资源保存2 实验室各分室名称、主要设备、主要功能化学实验室（准备室）无菌操作室（接种室）培养室高压灭菌室细胞学实验室3 无菌操作技术流
4、程4 表面消毒剂种类及作用效果漂白粉 饱和溶液 10-30m 效果很好氯化汞 0.1-0.2% 3-12m 效果最好酒精 70-75% 10-30s 效果好5 培养基成分及各成分的作用水 提供水分，营造环境无机盐 大量微量提供细胞生长所需元素有机化合物 碳源：提供能源、维持渗透压；维生素 参与代谢；氨基酸，促进芽根 胚状体生长和分化植物生长调节物质 调节细胞生长天然复合物 其他成分 活性炭吸附；抗生素防止内生菌污染6 植物组织培养三大难题污染 褐变 玻璃化 7 那些成分要抽滤灭菌热不稳定成分如：IAA ABA ZT GA3 第三、四章8 植物细胞全能性原理3 / 5植物的每一个细胞都具有该植物
5、的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。9 名词解释：愈伤组织、脱分化、体细胞胚、人工种子愈伤组织：原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成，可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。脱分化：改变细胞原来的结构和功能，而回到无结构的分生组织状态即愈伤组织状态。体细胞胚：在离体或活体条件下，由除合子外是孢子体细胞形成的胚，其经历的发育阶段与合子胚相似。人工种子：所谓人工种子就是将组织培养产生的体细胞胚和性细胞胚包裹在能提供养分的胶囊里，再胶囊外包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外模，形成一种类似于种子的结构。10 体细胞胚的特点11 愈伤组织形成发育的三个时期，
6、两种类型，良好愈伤组织的特点启动期，分裂期，形成期；胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织良好愈伤组织的特点：1 高度的胚性或再分化能力；2 容易散碎；3 旺盛的自我增值能力；4 进过长期的继代培养不丧失胚性或再分化能力。12 植物离体微繁，一般过程，各阶段注意事项1 无菌培养物的建立；选择木本植物和较大的草本植物的茎段；草本植物的叶片、叶柄、花瓣。2 诱导外植体生长与分化；选择适宜的外植体顶芽、侧芽或带有芽的茎切断；顶端优势较强的植物3 促进中间繁殖体的增值；不同激素水平对中间繁殖体增值有影响。4 壮苗与生根；调节培养基矿质营养组成、激素种类浓度、渗透压和光照。5 试管苗出瓶与苗期管理。保持试管苗水分
7、供需平衡；选择合适种植基质；防止菌类滋生；掌握温度和光照条件。13 褐变，影响褐变的因素，克服褐变的措施；玻璃化，无糖培养技术褐变：由于组织中的多酚氧化酶被激活，使细胞的代谢发生变化，酚类物质被氧化后产生增褐色的醌类物质，它们会逐渐扩散到培养基中，抑制其他酶的活性，毒害培养的外植体材料。营养因素：基因型；材料的生理状态和取材时间；培养基成分；外植体大小和培养时间。克服褐变的措施：1 选择分生能力强的外植体和培养时间：低温、液体、低盐、低 PH、初代暗培养。2 抗氧化作用 ； 3 连续转移、低温处理。玻璃化：过度含水化，特有的一种整理失调和生理病变。茎尖和茎切断培养物不定芽难恢复；难生根。无糖培
8、养技术：又称光自养微繁。在一个相对大的培养空间，采用人工环境控制手段，用 CO2替代糖作为碳源，提供植物生长适宜的光、温、水、气、营养条件，促进植物的光合作用，从何促进植物增 值、生长和发育的技术。第五、六、七章14 植物脱毒方法、原理1 热处理 原理：在高于正常温度下，病毒被部分或完全钝化，但是很少甚至不伤害寄住植物。2 茎尖培养 原理：病毒在植物体内分布是不均匀的，顶端分生组织一般无毒或病毒浓度很低。4 / 5没有维管系统不利于病毒移动；旺盛分裂的分生细胞代谢活性高，病毒无法复制；具高活性的病毒钝化系统；存在高水平的内源生长素抑制病毒增值。15 脱毒率包括两种方面含义16 人工诱导单倍体的
9、三种途径1 植物性器官或性细胞培养；2 染色体消失法；3 孤雌生殖。17 花药培养得到的再生植株倍性如何，为什么花药培养是通过诱导花药中的小孢子的雄核发育，产生单倍体，通过染色体加倍产生加倍单倍体的技术。18 花药培养的应用，花药培养力，一般培养过程。应用于：植物单倍体育种；构建 HD 群体；遗传工程的受体与基础材料；创建染色体工程的基本材料；转移异源染色体或基因。花药培养力：愈伤组织诱导率和绿苗分化率。培养一般过程：取材表面消毒接种和培养花粉植植株的诱导壮苗和移栽单倍体植株二倍化19 离体幼胚培养，胚发育有几种类型？各有何特点？幼胚培养：子叶期以前具有胚结构的幼小胚胎类型 1 正常发育成成熟
10、胚；适用于远缘杂交2 不继续胚性生长，而是在培养基上迅速萌发，形成畸形幼苗；应用于一年多代育种3 脱分化形成愈伤组织。常用来建立细胞无性系20 离体授粉 离体受精指未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来进行无菌培养，并以一定的方式授以无菌花粉，使之在试管内实现受精的技术，又称离体受精。21 简述胚乳培养的意义创造三倍体植物；为极幼龄胚生长提供营养；研究某些天然产物如淀粉、蛋白质和脂类等生物合成第八、九章22 原生质体概念，两种分离方法，纯化方法。脱去细胞壁的细胞叫原生质体分离方法：机械法；酶法纯化方法：过滤离心法；漂浮法；23 酶法分离植物原生质体的酶液组成及作用酶液组成：酶-纤维素酶+果胶酶；纤
11、维素酶+蜗牛酶渗透稳定剂-糖醇系统：甘露醇、山梨醇、葡萄糖和蔗糖；盐类系统：氯化钙、硫酸镁、氯化钾、PDS作用：促进酶解作用，保持原生质体的完整性5 / 524 简述植物原生质体培养基的特点含有高浓度甘露醇； Ca+、Mg+增加； 大量元素浓度低；广泛使用 2,4-D；碳源以葡萄糖较好，最可靠； 氮源（谷氨酰胺） ，铵根离子不能过高，硝酸盐有毒害作用25 原生质体融合，融合的主要方法自然界具细胞结构的生物都具有相似的细胞结构，按照相似相容的原理，通过细胞膜的融合，就可以达到同一生物或不同种、属、生物、甚至遗传关系更远生物间的细胞融合，形成细胞杂种。主要的融合方法：自发融合诱导融合：1 离子诱导
12、融合；2 高 Ca-高 pH 值法；3 聚乙二醇 PEG 法26 体细胞杂交过程原生质体制备-原生质体融合-杂种细胞选择杂种细胞培养-杂种细胞再生植株-杂种植株鉴定27 融合产物的种类及特点1 亲和的细胞杂种；双亲的亲缘关系较近，杂交植株可育，具双亲的细胞核和细胞质2 部分亲和的细胞杂种；杂种以一个亲本细核物质为主，只有少量的另一亲本核，胞质是双亲的。3 胞质杂种：含有一个亲本的核物质，细胞质是双亲的28 植物细胞无性系变异，特点是指植物的组织、细胞、原生质体在离体培养条件下所得的培养物及再生植株的变异。特点：1 是植物组织与细胞培养中一种广泛存在的现象；2 变异设计的形状广泛，包括数量性状、质量性状、染色体数目、生理生化特性等方面3 细胞无性系变系是可遗传的4 无性系变异的频率高低与外植体的来源及培养的时间的长短有关5 变异幅度大二畸变率低，单个或少数基因变异占较大比例，一般再生植株二代基本可以得到稳定，同时还具有隐性性状活化的特点29 提高植物细胞无性系变异频率的方法30 细胞突变体的类型及对应的筛选方法细胞突变体：指遗传物质在结构或数量上发生的一种相对稳定的可遗传的变化。类型：1 营养缺陷型细胞突变体-负选择法 毒害正常生长细胞2 抗病细胞突变体-绿岛法 3 抗氨基酸及其类似物细胞突变体-正选择法4 抗除草剂突变体-绿岛法
