1、实验2 检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质,可溶性还原糖的鉴定:制备组织样液(提取或分离出含还原性糖的过程) 鉴定样液 (取样液2mL于试管中加刚配的斐林(班氏)试剂2mL水浴2min左右观察颜色变化)蛋白质的鉴定:制备样液(制备豆浆或稀释蛋清) 鉴定(试管中加样液2mL加2mL双缩脲试剂A摇均双缩脲试剂B试剂34滴摇均观察颜色变化),(1)还原糖的检测和观察(葡萄糖、果糖、麦芽糖)常用材料:试剂:斐林试剂注意事项:还原糖有必须颜色变化:,(甲液:0.1g/ml的NaOH 乙液:0.05g/ml的CuSO4),葡萄糖,果糖,麦芽糖,浅蓝色,棕色,砖红色沉淀,用水浴加热,甲乙液必须等量混合均匀
2、后再加 入样液中,现配现用,苹果和梨,检测生物组织中的化合物,脂肪的鉴定:制作切片(含脂肪量越高的组织越好,切片越薄越好) 染色(滴苏丹染液23滴切片上23min后吸去染液滴体积分数50%的酒精洗去浮色吸去多余的酒精) 制作装片(滴12水于材料切片上盖上盖玻片) 镜检鉴定(显微镜对光低倍镜观察高倍镜观察) 总结:三大类物质的鉴定步骤都是:取样 颜色反应 观察鉴定,但可溶性还原糖鉴定要水浴加热,脂肪鉴定要洗去浮色后制片再用显微镜观察,蛋白质鉴定要先加双缩脲试剂A液(质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液),后加B液(质量浓度为0.01g/ml的CuSO4溶液)。,(2)脂肪的鉴定 常用材料: 试
3、剂: 注意事项:切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰 有的地方模糊。酒精的作用是:需使用显微镜观察 使用不同的染色剂染色时间不同 颜色变化:,洗去浮色,橘黄色(用苏丹染色)或红色(用苏丹染色),苏丹或苏丹染液,花生子叶或向日葵种子,(3)蛋白质的鉴定 常用材料: 试剂:注意事项:先加 ,再加 鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比颜色变化:,双缩脲试剂( A液:0.1g/ml的NaOH B液: 0.01g/ml的CuSO4 ),变成紫色,鸡蛋清,黄豆组织样液,牛奶,A液1ml,B液4滴,(4)淀粉的检测和观察 常用材料:马铃薯 试剂: 颜色变化:,碘液,变蓝,思考:,斐林试剂与双缩脲试剂在使用方法的区别,斐林试剂需要等量混合、现配现用,同时需要水浴加热 双缩尿试剂需要先加A液1mL再加B液4滴,