1、动物细胞培养和核移植技术,植物细胞工程常用的技术手段有哪些？,那么动物细胞常用的技术手段呢？,植物组织培养 植物体细胞杂交,问题探讨,动物细胞工程的技术手段,动物细胞培养、动物细胞核移植、 动物细胞融合、生产单克隆抗体等,动物细胞工程技术的基础,动物细胞培养,从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。,原理：,动物细胞培养,细胞增殖,动物细胞培养的过程（见课本）,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官（取材）,细胞悬液,10代细胞,传代培养,无限传代,单个细胞,加培养液,（分解细胞间的蛋白）,过程：,动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质,细胞株和细胞
2、系的区别：,1、遗传物质,2、培养代数,原代培养：传代培养：,原代培养与传代培养的区别,分装之前，10代以前,分装后继续培养，10代以后,1、无菌、无毒的环境,动物细胞培养的条件,添加一定量的抗生素 定期更换培养液 培养液和培养器具无菌处理,动物细胞培养的条件,1、无菌、无毒的环境 2、营养,补充合成培养基中缺乏的物质,葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、动物血清、血浆等,培养基的不同是动物细胞培养和植物组织培养最重要的区别,动物细胞培养的条件,1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH,36.5 +0.5度 PH为7.2-7.4,动物细胞培养的条件,1、无菌、无毒的环境 2、营
3、养 3、温度和PH 4、气体环境：,O2和CO2,（95%空气和5% CO2 ）,2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？,1、较植物组培培养基有何独特之处？,独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等,这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强,3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？,防止细胞间接触抑制现象，使细胞与培养液更充分接触,4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？,不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，而不能发育成个体,5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？,能,6、动物细胞培养过程中特别要注意什么？,注意时间的控制,7、能够用胃
4、蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？,不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近,动物细胞培养,植物组织培养,植物细胞的全能性,细胞株、细胞系,植物体或组织,快速繁殖、培育无病毒植株等,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,液体培养基,固体培养基,细胞增殖,培养结果,培养目的,培养基特有成分,培养基性质,原理,（1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （2）培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 （3）用于检测有毒物质 （4）用于生理、病理、药理等方面的研究,动物细胞培养的应用,如何使动物细胞的全能性表达出来?,利用动物细胞核移植技术,动物核移植：,将动
5、物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植（难度高）,用核移植的方法得到的动物。,克隆动物：,记一记,动物体细胞核移植技术,黑面绵羊去核卵母细胞,白面绵羊乳腺细胞核,重组细胞,动物细胞培养 （或早期胚胎培养）,早期胚胎,胚胎移植,另一头绵羊的子宫,妊娠、出生,克隆羊多利,细胞核移植,1、卵母细胞为减数第二次分裂中期的次级卵母细胞 2、原因？,细胞比较大，易操作 细胞质中含有使体细胞核全能性表达出来的物质,3、克隆过程运用的技术手段？,动物体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植,4、多利的
6、大部分性状与谁一样？,白面绵羊,5、结论？,高度分化的体细胞核具有全能性,克隆动物的研究意义,1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.作为异种移植的供体 4.保护濒危动物,体细胞核移植技术存在的问题,1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。 2.成功率非常低 3、克隆动物食品的安全性问题。,1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞（ ） A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞,2、动物细胞工程技术的基础是 A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养,A,D,3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别
7、在于 A.培养基不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。,A,教学反馈,4、一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（ ）,无毒的环境 无菌的环境 培养基需要加入血清 温度与动物体温相似 需要O2，不需要CO2 CO2能调节培养液PH,A、 B、 C、 D、 ,D,5、动物细胞培养的特点 （ ） 细胞贴壁 有丝分裂 细胞分化 接触抑制 减数分裂 原代培养一般传110代 A、 B、 C、 D、,A,7.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于-（ ） A.培养基不同；B.动物细胞培养不需要在无菌条
8、件下进行；C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。,A,8.关于动物细胞培养的有关叙述，正确的是( )A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C.动物细胞培养的目的只是获得大量的细胞分泌蛋白D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理,D,9.下列哪项不属于体细胞核移植技术的应用（ ）A.加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育B.保护濒危物种C.获得组织器官异体移植的供体D.大量产生紫杉醇,D,10、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答： 1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自_。 （2）容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是 ，然后用酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是 。,动物胚胎或幼龄动物,剪碎,胰蛋白,使细胞与培养液充分接触，便于培养,（3）培养首先在B瓶中进行，瓶中的培养基成分有 _等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培养到第 代，到这时的培养称为_ 。 （4）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用 处理，然后配置成 ，再分装。 ,动物血清,10,原代培养,胰蛋白酶,细胞悬液,
