1、1. MRM 优 化 MRM 优化 时 ， 流动相 宜 慢不宜 快 ， 否则校 准 时 间 太短得不到准确结 果 ； 一 般 0.2mL/min 电压 优化内容 ： Q1 预杆电压 ； Q2 碰撞电压 ； Q3 预杆电压 电压 优化过程 ： 以设定步长优化 Q1 预杆电压 ,得到最优值 使用优化的 Q1 预杆电压 ， 以设定步长优化 Q2 碰撞电压 使用优化的 Q1 预杆电压和 Q2 碰撞电压 ， 以设定步长优化 Q3 预杆电压 ； 使用优化的 Q1 预杆电压和 Q3 预杆电压 ， 对 Q2 碰撞电压进行步长为 1 的精细调节 MRM 优化的两种方式 ： Search product ion
2、and optimize MRM 自动找产物离子 （ 推荐 ） Optimize MRM event/SIM event 指定产 物 离子 更改接口电压 2. Carry over（ 交叉污 染 ） 和 cross talk（ 串 扰 ） Carry over： 交叉污染 ， 来自自动进样器 或色谱柱 指前一个样品的残留物对下一个样品分析的干扰 Cross talk： 串扰 ， 来自 Q2 上一个化合物在 Q2 碰撞池中留下 的 离子 x 刚 好是下一个化合物所 扫描的子离子 ， 当 pause time 设定太小时 ， 就可能被当成下一个化合物的子离子一起传送经过 Q3， 最后使 另一个通道
3、出峰 。 比如同位素或结构相似物 他们母离子不同 ， 但是很可能打出同样的子离子 ， 所以 pause time 太短时 ， 这些残留在碰撞池中的子离子就可能会被 被当成下一个化合物的子离子一起传送经过 Q3， Cross talk 只能通过增加 pause time 来减少 。 8040 中 pause time1 ms， default=3 ms。 3. Dwell time, Pause time, Loop time LCMSMS 得 到 的 色 谱 图 中 ， 为 了 保 证 每 一 个 峰 的峰 面积 和 岀 峰 时 间 的 RSD， 需确 保 一 个 色 谱峰 有 18-20 个
4、 采 集 点 。 一般 经 过 MRM 自 动 优 化 后 得 到 Dwell time 和 Pause time 分别 默 认 为 100ms 和 3ms， 此时 系统会 计 算 响应 的 Loop time（ 每 个 通 道 的 Dwell time 和 Pause time 的加 合 ， 若 有正 负 离 子 还要 加 上 15 2=30ms 的 正 负切 换 时 间 ） ， 即 每 个 采 集 点所 需 的 时 间 （ 两 个 采 集点 的间 隔 时 间 ） ；接上 色 谱 柱 后 对 色 谱 条 件 进行 优 化 ， 最 后 计 算 目 标 峰的 峰 宽 ， 此 峰 宽 除 以 Lo
5、op time 即得 采集点 数 ； 若 采 集 点 数不 在 18-20 以 内 ， 改 变 Dwell time 进而改 变 Loop time 以得到 正 确 的 采集点 数 。 解 释 范 围 默 认 Dwell time 驻留 时 间 0.8 ms 8040 100 1 ms 8030 100 Pause time 延迟 时 间 1 ms 3 Event time 一个 目 标 分 子 或 离 子 的 测 定时 间 ， 可 以 包 含 多 个 子 离 子 32 通 道 Loop time： 采集一个色谱 点 所 需要的 总时 间 ， 包 含 多 个 通 道 保证 一 个 色 谱 峰
6、有 18-20 采 集 点 正负 极 切 换 时 间 15 ms 4. MRM 同步功 能 如 3 中 所 述 ， 理 想 条 件 下 每个 色 谱 峰 的 采 集 点 数 应 为 18-20 点 ； 但 如 果 采集 通道 很 多 ， 如 同时检 测 一 两 百 种 目 标 物 ， 则可 能导 致 loop time 很 大 ， 采 集 点 太 少 ， 造 成 定 性 定量 困 难 。 此时 可 以 针 对 某 目 标 物 在 其 岀 峰 时 间 前 后 一 小 段 时 间内 设 置 该 目 标 物 的 离 子 通 道 ， 而 在 其 他时间 段 取 消 该 离 子 通 道 ， 这 样就 可
7、 以 有 效 的 减 少 某 一 时刻 的 离 子 通 道 数 ， 从 而缩 短 loop time,增大 采 集 点 数 。 LabSolution 可以 实 现 MRM 时 间 段 的 自 动 设 置 ， 以 下是 其 操 作 步 骤 。 1) 在方法中设置同步窗口 Method 菜单中选择 Data processing prameter 窗 口 ， 点击 Identification 选项卡 2) 建立完化合物表之后对 method 菜单中点击 Update MRM event time by compound table. 5. 参比离子丰 度 定 性 1) 欧盟 2002/6571
8、文件 规 定质谱技术中相对离子强度的最大允许限度范围 2) 在 Data processing prameter 窗口 Identification 选项卡中勾选 “Use reference ions” 3) Postrun 中 查看标样中的离子丰度 比 选择欲设置化合物 （ event#） 的质谱图 ， 双击选中该峰 （ 确 定出峰时间 ） ； 右键 菜 单中选择 mass table 得到下图 ，查看定性离子 /定量离子的离子丰度比 （ rel. Intensity）。 4) Browser 中打开数据 文 件 ， 在 method view 窗口中选择 compound table 选
9、项 ,在 edit 模式下 ， 选中欲设置丰度比的化合物 ， 右键单击选择 set reference ion ration.将标样中的离子丰度比填写进 ratio 框中 ， 再设置误差窗口 。 5） 如此就把离子丰度比 加 入到了定性条件 中 ， 只 有 达 到出峰时间正确 和 离 子 丰度比范围 内的目标峰才能被成 功 定 性 定 量 。 6. 组设 置 分组是根据类 型 (例 如同系 物 和同分异构 体 ) 将 峰 进行分 组 ， 从而对每组进 行 计 算 。 7. 液氮罐的使 用 注意事 项 按上北下南左西 右 东 说 ， 指 向 西偏南 的 绿色 阀 （ 有两边的 钢 管环 绕 ）
10、的增 压 阀 ， 用于 当氮 气压 不够 时 ， 打开后可 以 快 速 的 使 内层的液氮变成 氮 气 。 增压阀对面 的 绿 色 阀 （ 指 向 东偏北 的 ） 是 接 LCMS气路 的 。 北偏西 的 银灰 色 阀 门是手 动 泄压 阀 ， 旁 边 有带压力表 的 安全 阀 （ 防 止 氮气压力过 高 ） ， 因为安全 阀 喷气时声音很 大 ， 所 以有时 可 以选手动泄压 阀 手 动泄 压 。 南偏东 的 蓝色 阀 门 是向液 氮 罐里灌液氮用 的 ， 平时不 用 打 开 。 除非你想 取 液 氮 。 气体不断的外泄 是 增压阀 开 的太 大 ， 压力超 过 17-20 bar， 所以安
11、全阀会 自 动打开 排 气 ， 待到 安全压力下就会自 动 关 闭 。 如 果 想不浪费就把增 压 阀开小 一 点 ， 一般关闭状态下 旋 开 1/4圈到半圈左 右 。安全阀给冻的结 霜 也是因 为 增压阀开太 大 ， 但如果 液 氮 用 到快完有时候就 算 压力没 有 超过也会发生 结霜 ， 这时就要把 增 压阀开 大 了 ， 一会儿结霜 就 会消 除 。 一般是说超 过 15kg（ 对应 为 217.5PSI） 安全阀就会自动打开排 气 ， 但实际都会 到 17安全阀才 会排 气 ， 好 像增压 阀 那地方 有 个螺母可以调节 这 一值 的 。 平常表压一般是 控 制 在 10-15kg。
