1、ABI 310基因分析仪,Applied Biosystems公司1995年推出了310型全自动遗传分析仪;310型不仅具有DNA测序、PCR片段大小分析和定量分析功能,而且实现了全部操作自动化,包括自动灌胶、自动进样、自动数据收集分析。,ABI 310的组成,化学组成 STR kits, fluorescent dyes, matrix samples, buffers, polymer, formamide 硬件部分 CCD camera, laser, electrodes, capillary, pump block, hot plate for temperature control
2、, autosampler 软件部分 Data collection, GeneScan Software, Genotyper Software,ABI Prism 310 遗传分析仪,Capillary,Samples,310 进样的原理,Electrode,加 样 模 块,Capillary or Gel Lane,Labeled DNA fragments (PCR products),Principles of Sample Separation and Detection,软件部分,310 Data Collection SoftwareGeneScan SoftwareGenot
3、yper Software,310 Data Collection Software,Controls 310 run conditions Translates light on CCD camera into electropherogram (raw data) Sample sheets and injection lists are created,Macintosh 1.0.2 1.2.2 2.1 (5-dye),(prior to separation of fluorescent dye colors),Raw Data from the ABI Prism 310,GeneS
4、can Software,Macintosh 2.1 3.1 3.1.2 (5-dye),Windows NT 3.7 (5-dye),GeneScan软件是用来进行DNA片段分析的工具,它可以将混合在一起的DNA片段按照它们的长度分离,提供电泳图谱,并根据分子量标记建立标准曲线,进而计算各个DNA片段的长度大小。,Screens in GeneScan Program,Processed data Sizing data Electrophoresis history Sample Information Raw data Analysis log file,Save 4 x 4 Matri
5、x Created,Dye set 的设置,Modules 的优化(Manual Control window),查找上次的Instrument/RunStatus,创建新的 GeneScan injection list,GeneScan Injection Sheet,电泳操作步骤,准备样品填写样品表 Sample Sheet创建 injection list,样品准备,1.准备样品,2.变性,95 C 变性3 min 迅速冰冷3 min。,创建新的样本分析表,创建新的 injection list:,Matrix 的创建,Hi-Di 甲酰胺 25 LMatrix 标准品 1 L,上样量 26 L。95 , 3 min 冰冷3 min。,