1、Q：正相手性色谱柱使用前需要注意什么? A：将正相手性色谱柱 AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H 接上液相色谱仪之前先要保证液相色谱系统中的所有管路均为正相流动相。如果液相系统里面是反相溶液，比如水/乙腈=50/50(v/v)。那么需要先用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相的所有管路（包括所有溶剂入口、六通阀、检测器等） ，然后用正相流动相冲洗液相的所有管路，最后再接上正相手性色谱柱；如果液相系统的反相流动相中含有缓冲盐，要先用纯水冲洗 HPLC 系统，然后用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相的所有管路，最后用正相流动相冲洗。 Q：正相手性色谱柱中保存液是什么? A：正相手性色谱柱 AD-H、AS
2、-H、OD-H、OJ-H 中的保存液是正己烷/异丙醇=90/10(v/v)。其它手性色谱柱的保存液请查阅 使用说明书 上的说明。 Q：新柱 CHRALPAK IA 和 CHRALPAK IB 与原来的大赛璐手性柱有什么区别？A：CHRALPAK IA 和 CHRALPAK IB 是将多糖衍生物共价键合在硅胶上，而大赛璐原来的手性柱固定相都是将多糖衍生物涂敷在硅胶表面的。正因为是共价键合，所以 CHRALPAK IA 和 CHRALPAK IB 柱能使用任何液相流动相，比如四氢呋喃、氯仿、丙酮、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯等。CHRALPAK IA 和CHRALPAK IB 与大赛璐原有的正相柱相比，
3、扩大了溶剂选择的范围，增加了新的分离选择性，在原来大赛璐手性色谱柱上分不开的化合物有可能在CHRALPAK IA 和 CHRALPAK IB 上得以分开。 Q：CHIRALPAK AD-H、CHIRALPAK AS-H、CHIRALCEL OD-H、CHIRALCEL OJ-H 四款正相色谱柱的区别是什么？ A：区别是固定相的种类不同。CHIRALPAK AD-H、AS-H 的硅胶表面涂敷的是直链淀粉衍生物；CHIRALCEL OD-H、OJ-H 的硅胶表面涂敷的是纤维素衍生物。CHIRALPAK AD-H 的硅胶表面涂敷的是直链淀粉三 (3,5二甲苯基氨基甲酸酯)；CHIRALPAK AS-
4、H 硅胶表面涂敷有直链淀粉-三(S)-甲基苄基氨基甲酸酯；CHIRALCEL OD-H 硅胶表面涂敷有纤维素-三3,5- 二甲苯基氨基甲酸酯; CHIRALCEL OJ-H 硅胶表面涂敷有纤维素 -三4- 甲基苯甲酸酯。不同种类的多糖衍生物决定了这些手性柱的分离对象各不相同，既相互包含，又相互补充。 Q：优化手性化合物的分离方法时，如何增加分离选择性？ A：正相手性色谱柱上增加分离度的方法有：降低流动相中醇的含量、降低柱温、更换流动相中醇的种类、更换手性柱。 Q：建立手性化合物的分离方法时，选定了正相手性柱之后，如何选择流动相？A：流动相首选正己烷和异丙醇的混合溶液，根据样品的酸碱性决定是否添
5、加酸碱性添加剂。如果是中性样品则不需要添加添加剂，如果是酸性样品需要添加三氟乙酸或乙酸，如果是碱性样品需要添加二乙胺，添加剂的量一般为 0.1 %。 流动相中醇的含量一开始可以使用 30%，根据样品出峰的快慢和分离度再调整醇的含量。 流动相中醇的种类一般使用异丙醇，也可以使用乙醇。 Q：建立手性化合物的分离方法时，如何选择手性柱？ A：根据文献或者参考大赛璐公司的应用指南 中结构类似物的分离方法，选择手性柱；另外可以寄少量消旋品，大赛璐公司能免费为您选择分离最佳的手性柱。 Q：CHIRALPAK AD-H 柱和 CHIRALPAK AD 是什么区别？ A：CHIRALPAK AD-H 柱和 C
6、HIRALPAK AD 的填料种类是一样的，表面涂敷的都是直链淀粉三(3,5二甲苯基氨基甲酸酯)，手性选择性基本相同。只不过填料的粒径不一样，CHIRALPAK AD-H 是 5 m ，CHIRALPAK AD 是 10 m。CHIRALPAK AD-H 能代替 CHIRALPAK AD 并且 CHIRALPAK AD-H 柱效更高。 Q：手性柱谱图中异构体的分离度下降了，这可能是什么原因，该怎么办？ A：分离度下降的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化，或者色谱柱受损柱效发生了变化。首先查看是否是因为温度、流动相成分等外在因素发生了变化导致分离度下降，如果排除了各种外在因素就有可能是分
7、析柱本身的柱效下降导致的。如果分离度在短时间内急剧下降伴随柱压上升，可能是有强极性溶剂损害了柱子；如果分离度在长时间内慢慢下降，可能是柱头受污染或柱头塌陷，需要更换保护柱或者更换分析柱。 Q：正相手性色谱柱柱压高了怎么办？ A：手性柱压力高的原因有可能是流动相中醇的含量太高，或者液相流路中有堵塞，或者柱头有样品析出，或者填料被压缩柱头塌陷等。针对不同的原因请有针对性的采取相应的措施。如果是流动相中醇含量太高，则需要升高温度或者降低流速。如果液相流路中有堵塞需要排除堵塞。如果柱头有样品析出则需要使用流动相溶解样品以及样品预处理除掉样品中易析出的成分。如果填料被高压压缩柱头塌陷，则需要重新购买新的
8、手性柱。 Q：正相手性柱进了水后，柱子会不会损坏？ A：正相手性色谱柱 AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H 一旦进了水，柱压会升高，但是只要柱压不超过柱压上限，柱子就不会损坏。只需用无水乙醇低流速(0.1-0.2 ml/min)将水全部充分置换出来，再用正相流动相低流速(0.1-0.2 ml/min)将乙醇全部置换出来就能继续使用该正相手性色谱柱。 Q：手性柱使用完了之后如何清洗保存？ A：正相手性色谱柱如果使用正己烷和醇类的混合流动相之后，只需要用正己烷/异丙醇=90/10(v/v)的保存溶液冲洗 30 min 即可。反相手性色谱柱如果使用了水溶液和乙腈的混合流动相之后，只需要用水/乙腈 =70/30(v/v)的保存溶液冲洗30 min 即可。Q：正相手性色谱柱的柱压范围是多少？ A:正相手性色谱柱 AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H 中的柱压绝对不能超过 9.8 MPa，最好不超过 5 MPa。所以建议在实际使用过程中，在液相仪器上设置泵的保护压力为 6 MPa，这样一旦系统的压力超过 6 MPa，泵就会自动停止运行，保护手性柱不受高压破坏。
