1、AKTA 使用方法：阴/阳离子交换柱（1）buffer 都要进行超声除气 10min（母液需要用 0.45m 过滤膜过滤）。（2）洗泵。点击 Pumps Start pump A wash 和 Start pump B wash。用 QA buffer 冲洗 pump A，用 QB buffer 冲洗 pump B。（3）洗系统（管道）。将 Conc%B 改为 100%，点击 Start system wash。（4）改流速，平衡柱子。将 System flow 的流速改为合适的流速（4mL/min, 2 mL/min, 0.4mL/min），点击 Set flow rate。然后选择柱位。用
2、 QB buffer 平衡 Q 柱 4-5 个柱体积，再用 QA buffer 平衡 Q 柱 4-5 个柱体积。（5）准备收集盘，设置运行程序。准备烧杯收集 outlet。（6）上样，选择 A pump 上样，当电导上升时 waste 改为 outlet。上样不要进气泡，上样结束后将 A pump 放入 Buffer A。电导下降到约 1 时，outlet 改为 waste，停止程序。（7）Elution, 运行洗脱程序。（设置程序时，一定要勾选 using fraction collector）（8）及时将 outlet 取出并保存好。（9）收集收集管，并将 buffer 放回。Superd
3、ex(分子筛、凝胶过滤层析)（1）浓缩。将蛋白样品溶液用 30K 的浓缩管在 4浓缩。（2）洗泵。用 Superdex buffer 冲洗 pump A。（3）用 Superdex buffer 冲洗整个系统（整个系统体系 6-8mL）两个柱体积（约 10mL 左右）。（4）平衡。用 Superdex buffer 平衡两个柱体积（柱体积 23.65mL）。（5）准备收集盘，用 Superdex buffer 冲洗 Loop 环，设置运行程序。（6）上样，运行程序。（设置程序时，一定要勾选 using fraction collector）（7）根据分子筛图谱对收集的样品取样进行 SDS-PAGE 电泳。（8）根据分子筛图和 SDS-PAGE 电泳图，选择最终收集的样品。分装到1.5mL Ep 管中，置于-80 冰箱保存。
