1、肾脏病理诊断在肾脏病学中的重要性,构成完整的肾脏疾病诊断 显示病变的活动指标 协助临床制定治疗方案 协助临床判断治疗效果 协助临床判断预后,目 的,1. 了解肾脏病理知识2. 根据临床资料推断病理改变,基础篇阅片,Anatomy of Kidney,Note the positions of Glomerulus Loop of Henley PCT, DCT, CTCortex, Medulla, Pelvis.,肾活检病理的研究方法,光学显微镜检查半薄切片和多种特殊染色方法 免疫病理学方法免疫荧光、免疫组织化学电子显微镜检查透射电镜、扫描电镜、免疫电镜,要求:切片薄(3m),有特殊染色。肾
2、小球数一般10个/切片。 观察:,光镜,HE(苏木素伊红染色):观察细胞核,分辨细胞种类,提示GBM厚度。 PAS(过碘酸雪夫氏染色):观察GBM、TBM及细胞外基质(ECM), 但系膜基质(MM)染得比实际宽,且GBM很少用该染色。 PASM(六胺银):GBM为主,MM也很清楚(胶原, LN,FN 呈黑色)。 Masson:观察嗜复红蛋白(多提示免疫复合物),间质纤 维化(胶原纤维均呈绿色,GBM、TBM、MM也为绿色,细胞核、免疫复合物、血栓、血浆成分均呈红色)。 PASM+Masson:,PAS,Masson,HE,PASM,原理:一种抗体只能与相应的一种抗原特异性结合将荧光素标记在已知
3、抗体上,用标有荧光素的已知抗体与待检肾组织反应若肾组织中有与已知抗体相应的抗原存在,则两者结合为抗原-已知抗体-荧光素免疫复合物该复合物在具有紫外光源的荧光显微镜下观察,作为指示物的荧光素被激发放出鲜艳的荧光,免疫荧光,要求:抗体和补体齐全,标本抗原性保存良好 特点:快而敏感,但不易保存 观察: (1)何种抗体沉积:球蛋白类:IgG、IgA、IgM:以确定参与免疫反应的球蛋白种类补体类:C3、C1q 或C4 :以证实免疫反应过程中补体被激活的途径,即经典(C1q)或旁路途径(C3)血浆蛋白类:FRA(纤维蛋白原)特异性抗原:如HBsAg、HBcAg、k、入 等,免疫荧光,(2)沉积部位:Mes、GCW、TBM、A、BBM (3)形态:线状、颗粒状、团块状 (4)强度( +) 高倍镜下隐约可见+ 低倍镜隐约可见,高倍镜下可见+ 低倍镜可见,高倍镜下清晰+ 低倍镜清晰,高倍镜下耀眼+ 低倍镜耀眼,高倍镜下刺眼,免疫荧光,必要性: 1、在光镜病理改变轻微的肾脏疾病,EM检查非常必要 2、在伴特殊有形结构的肾脏疾病诊断中,EM具有非常重要的价值优点:定位准确缺点:视野较小,观察局限、片面,电镜,观察: 1、足突是否融合-广泛性、部分、节段性2、基底膜的变化3、电子致密物的沉积部位与形状、密度4、肾小球固有细胞与系膜基质变化5、特殊有形结构物质的沉积部位与形态,电镜,正常肾小球,