1、SYSMEX五分类血液分析仪 XT-2000i检测原理及临床应用,血细胞分析仪的发展简史,二分群时代：淋巴细胞、非淋巴细胞三分群时代：（大细胞、中间细胞、小细胞）五分类时代：淋巴、单核、中性粒、嗜酸粒、 嗜碱粒,五分类血球方法学概览,方法学 第一代：纯物理原理(CD-3700，SE-9000) 激光、射频、电阻 第二代：物理+化学（SYSMEX SF-3000，） 酶染色、颗粒染色 特异性溶血 第三代：物理 +分子生物学（SYSMEX XT-1800i/XT-2000i） 分子生物学技术（DNA、RNA染色）,内 容,XT-2000i检测报告组成 白细胞系统的检测原理和临床病例分析 红细胞系统
2、参数的临床意义 网织红细胞的参数 血小板系统参数的临床意义 标本采集的要求,XT-2000i - 规格 -,参数 30项 研究参数 2项（IG，IG） 处理速度: 80标本/小时 检测模式: 4种模式（CBC, CBC+DIFFCBC+RET,CBC+DIFF+RET 标本量: 手动进样: 85 ul自动穿刺: 150 ul末梢血预稀释进样：40ul+160ul稀释液,XT-2000i报告单的组成,（一）2个直方图、4个散点图 （二） 30项数字结果：RBC、WBC、PLT、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD、RDW-CV、MPV、PCT、PDW、P-LCR、NEU%/#、
3、MNON%/#、LYM%/#、EO%/#、BA%/#、 RET %/#, IRF, LFR, MFR, LFR,XT 分析流程,检测模块,分析原理,检测通道,图形,RBC/PLT,WBC,鞘 流 电 阻 法,半导体激光 FCM,RBC/PLT 通道,PLT 直方图,参数,PLT,HGB,HGB 通道,比色法,HGB,全 血 标 本,DIFF 通道,RET 通道,DIFF散点图,WBC# Baso,RET PLT-O IRF,RET散点图,Lymph Mono Neut+Ba EO *IG - research,RET,半导体激光 FCM,WBC/Ba 通道,WBC/BA 散点图,RBC 直方图
4、,RBC,only forXT-2000i,白细胞系统的检测原理和 临床病例分析,白细胞系统参数,DIFF散点图、WBC/BASO散点图 ：白细胞总数 ：中性粒细胞 ：淋巴细胞 ：单核细胞 ：嗜酸性粒细胞 ：嗜碱性粒细胞 ：绝对值 ：百分数,半导体激光和流式细胞的应用,侧向散射光,RNA/DNA含量,细胞内部结构,细胞体积大小,前向散射光,侧向荧光,激光束,分光镜,WBC/BASO 原理,步骤1: 吸入标本 通过 SRV吸入标本血样和试剂 步骤2: 溶血STROMATOLYSER-FB使红细胞溶血 除嗜碱性粒细胞以外的WBC 收缩 步骤3: 分析 分析前向散射光和侧向散射光的散射图,BASO
5、试剂系统,BASO,other WBC,RBC,Hemolysed (Acid, hypotonic solution),保持原形,脱浆收缩,溶血,WBC DIFF 分类通道原理,步骤1: 吸入 从 SRV吸入血液和试剂 步骤2: 溶血 STROMATOLYSER-4DL 溶解RBC- WBC膜被轻微损伤，打孔 (acid, hypotonic solution) 步骤3: 染色(RNA and DNA)STROMATOLYSER-4DS 染色 染液: 荧光染料 ( Polymethine Dye) 步骤3: 分析 分析前向散射光和荧光的散点图,溶血 (WBC membrane is weak
6、ly damaged),染色 RNA DNA,Diff 试剂系统,Blast原核细胞, IG.未成熟粒细胞,异常淋巴细胞 等,高荧光浓度,低荧光浓度,高荧光浓度,正常细胞,WBC分类-散点图（正常标本）,淋巴,单核,中性,嗜酸,侧向荧光(RNA ,DNA),红细胞碎片,侧向散射光(内部结构),分类-散点图(异常标本),淋巴,单核,中性,嗜酸,侧向荧光(RNA ,DNA),红细胞碎片,侧向散射光(内部结构),异型淋巴,IG,核左移,出现幼稚粒细胞的病例,该病例为儿童急性粒细胞白血病（AML-M2），患儿因突发高热而前来就诊，首次血常规检查发现，外周血原始细胞占71%，幼稚红细胞占2%。),出现幼
7、稚淋巴细胞的病例,急淋（ALL）-L1,急淋（ALL）L1,红细胞系统参数,直方图 ：红细胞总数 ：血红蛋白浓度 ：红细胞压积 ：平均红细胞体积 ：平均血红蛋白量 ：平均血红蛋白浓度 ：红细胞体积分布宽度,三种直方图的典型变化 - 缺铁性贫血的直方图 -,特点： 曲线波峰左移，峰底变宽，显示小细胞不均一性。,三种直方图的典型变化 - 巨幼红细胞贫血治疗前的直方图 -,特点： 曲线波峰右移，波底增宽，显示明显的大细胞不均一 性。,三种直方图的典型变化 - 轻型-海洋性贫血的直方图 -,特点： 小峰左移，峰底变窄，典型的小细胞均一性贫血。,红细胞体积分布宽度的临床意义,一、定义： 红细胞体积分布宽
8、度（Red blood cells volume Distribution Width）是反映周围血红细胞体积异质性的参数，用所测单个红细胞体积的变异系数来表示（CV=SD/X也可用SD表示）。 RDW-SD指把直方图顶点的高度定为100%，自下而上高度为20%时的红细胞分布宽度；RDW-CV指假定红细胞直方图分布曲线为正规分布曲线时，把标准偏差除以MCV，再乘以100所得出的数值。,红细胞体积分布宽度RDW的 临床意义,缺铁性贫血与轻型地中海的鉴别诊断 有关缺铁性贫血的早期诊断与治疗 用于贫血的形态学分类(MCV/RDW),缺铁性贫血与轻型地中海贫血的鉴别,RDW是两者鉴别的参考指标： 1、
9、IDA患者RDW100%升高； 2、轻型地中海贫血患者基本正常,缺铁性贫血的早期诊断,Uchida对1648例学生进行了各项指标的观察， 结果显示：MCV RDW 正常人 （894fl）（12.7 0.7）% 隐性缺铁前期（894fl）（13.7 0.7）% 隐性缺铁期 (866fl）（14.0 1.5）% IDA患者 79fl （15.6 1.7）%,缺铁性贫血的治疗过程,贫血的形态学分类(MCV/RDW),RET 检测参数,DNA/RNA核酸荧光染色 参 数：RET, IRF, LFR, MFR, HFR, PLT-O,内置全自动RET分析及成熟度分类 激光染色法检测PLT,RET 试剂系
10、统,Staining: Ploymethine: RNA Oxazine: DNA,RET,WBC,RBC,High Level Fluorescence,Low Level Fluorescence,Very High Level Fluorescence,Reagent: RETSEARCH II (Diluent + Dye),Fluorescence(RNA),RET-散点图,Forward Scatter(Volume),MFR,HFR,LFR,PLT,RBC-O,RET,WBC,IRF,网织红细胞检测的临床意义 RET，IRF(MFR+HFR),RET是一个独立的监测骨髓造血功能恢
11、复的参数IRF是评估造血功能恢复的可靠依据 IRF是评估造血功能恢复比RET更敏感的指标RET增高：表示骨髓造血功能旺盛。急性溶血性贫血，急性失血等明显增高。增生性贫血，骨转移等轻度升高。RET减少：肾脏，内分泌疾病，溶贫再生危象，再生障碍性贫血，放化疗后等。,PLT-I,报告,PLT-O 用于明显的病理性标本,PLT-O,XT-2000i以电阻抗法PLT-I为准 当出现异常标本时， XT-2000i会转换用光学法PLT-O检测,PLT-I/O 散射图,直方图(直流阻抗法),散射图(光学法),PLT-I/PLT-O 两种检测方法,PLT-I: RBC/PLT通道 电阻抗每次检测20-25万个细
12、胞，而RET通道内激光法每次只能检测60000个细胞，其中PLT3000个 电阻抗法的PLT数目的准确性与重复性比较好 PLT-O: RET/PLT-O通道 激光法对PLT的形态鉴别能力强 异常标本中的小RBC、WBC碎片、或PLT数目较少时，激光法能更准确地将PLT鉴别出来,PLT-I和PLT-O转换的标准,红细胞低鉴别线RL(%)10% 血小板低鉴别线PL(%)9% 血小板高鉴别线PU(%)39% 血小板高鉴别线PU(%)23FL 和PU20% 存在细胞碎片 存在红细胞凝集 血小板高鉴别线PU%13%和PLT35FL45% 和 PLT-I#80x109/L PLT-I115%,血小板系统参
13、数,直方图 ：血小板计数 ：血小板体积分布宽度 ：平均血小板体积 P C T：血小板压积 ：大血小板比例,血小板直方图的临床意义,在多种疾病中PLT直方图均可发生改变，如：特发性血小板减少性紫癫，特点是血小板数量减少，巨大血小板增多，直方图表现为曲线峰右移，而窄峰图则常因PLT减少所致。 影响因素： 曲线峰左移，可能存在细胞浆碎片； 曲线峰右移，常表示存在异常红细胞 （裂细胞或极端小的红细胞）。,P-LCR,参考值：0.13-0.43体积超过12fl的PLT占总PLT的比率 对检测血小板凝集、与红细胞的重叠以及监视血小板造血功能等有意义,MPV,参考值：9.4-12.5 fl是反映骨髓造血功能
14、是否良好的指标。用于病情观察：白血病化疗时，MPV增加是骨髓恢复的第一个征兆,MPV与PLT联合检测的临床意义,标本采集要求,最佳血液标本静脉血,静脉血和末梢血因采血方式和部位的不同而存在较大差别：血小板PLT：静脉血末梢血白细胞WBC：静脉血末梢血红细胞RBC：静脉血略末梢血 针刺采血： 皮肤刺破后，导致血小板形成红色血栓 活化血小板，使血小板聚集 同时在血管中间形成一运动迅速，成分含量高的液流,五分类血液分析仪标本采集要求,1、最好一次穿刺采血成功 2、使用封闭式真空注射器和厂家生产的 EDTA-K2抗凝管 3、采血后应立即颠倒混匀数次，使血液与抗凝剂充分混合，防止血液凝集 4、只能在室温下保存标本，低温（4）保存可使血小板计数结果减低,HST 流水线系统,Alpha 流水线系统,XS-系列仪器,XS-1000 i XS-800i,XS 系列 的特点,半导体激光核酸荧光流式技术 微量末梢血20uL进行WBC五分类和计数 精确定量的幼稚粒细胞参数IG 最新的XP中文操作系统 操作维护简便 超低运行成本 CBCDIFF 2.62元/标本 SNCS在线质控远程维护功能,追求新境界，创造新价值,谢谢各位！,
