1、1检验标本采集手册检验标本采集手册吉林大学第一医院检验科2005 年 11 月重要警示语将每一份标本都看作是无法重新获得、唯一的标2本，必须小心地：采集、保存、转运。医学实验室都接受 ISO 15189:2003 的认可 CAP文件分析前程序，ISO/IEC15189 文件定义为：按照时间顺序，从临床医生开出医嘱开始，到分析检验程序时终止检测结果报告发回的步骤，包括：检验申请、患者准备、原始样品采集、运送到实验室完成分析前程序的主体:大部分工作都是医生、护士、运输人员、检验人员共同协调，在实验室检测以外的空间完成的。分析前质量管理最易出现问题：临床反馈不满意的检验结果，60%报告最终可溯源到标
2、本质量不合要求。可靠的检验结果，第一个环节必须依赖于标本的高质量。要获得高质量的标本：临床医生：应主动明确地告之患者如何配合好护理人员和检验人员：采集好、检测好标本运输人员：及时快速规范转运好标本在实验室进行检测、检验结果审核、报告数据发回。3一、采集标本前质量保证、对策（一）加强沟通，合理选项医生应认真、完整地填写检验申请单，讲清每项填写的意。特别是：患者服药史、特殊病理变化、留取标本、送检标本的时间等。（二）患者准备，至关重要医护人员应了解在标本采集前影响结果的非病理性因素（药物、饮食、运动、治疗、生理变化、生活环境和习性、标本采集时间）正确指导患者，采取切实措施，规范采集标本前患者的一切
3、行为，保证采集的标本符合疾病的实际情况，留取合格的标本。应告之患者：试验名称、所需标本类型、为什么要检测、检测报告时间、如何获得结果。（三）采集前准备：条码生成与粘贴足够合格的采血人员标准化的采血程序手册合格的采血器材 1二.标本基本类别血液.全血、血浆、血清尿液 便 脑脊液心包、胸腔和腹腔积液关节积液羊水胃及十二指肠液前列腺液和精液痰其他（包括乳汁、泪液、房水、唾液、脓液和各种分泌物等）各种穿刺物4血液标本的采集一.血液标本基本要求保持标本完整性：控制各种干扰因素保持标本新鲜：最好的尺度是时间 拒绝不合格血标本：高脂肪、溶血、凝固、二.标本采集的时间（一）随机和急诊标本随机和急诊标本是指无时
4、间限定或无法规定时而必须采集的血和尿标本，一般无法让患者进行准备。此类标本主要是门诊、急诊和抢救病人必须做的一些检查标本，或在体内代谢相对较稳定的检查物质，或受体内外干扰较小的检查物质。凡此类标本在送检时应加以注明，评价检验结果时应注意昼夜节律影响。便于分析检查结果时参考。（二）空腹标本空腹标本一般指进食 8h 后（但不能超过 12h,禁食时间过长可引起部分指标异常；如补体 C3、转铁蛋白等。 ）采集的血和尿标本，住院病人多在清晨，此类标本常用于临床生化定量检查。因为标本是在空腹和安静时采集的，所以受饮食质、量以及日间生活、生理活动的影响较小。对病人来讲，若多次检查同一项目，也便于比较、对照。
5、测定血肌酑时还应禁肉食 3 天，且不能饮咖啡、茶等。乳糜血患者检测血脂应素食 3 天后。（三）指定时间标本指定时间标本多属功能试验采集的各种标本，因试验目的不同，采集标本的时间各有不同，必须按试验要求采集，如葡萄糖耐量试验等。三.血液标本检验结果的干扰因素（一）脂血 血液中脂蛋白成分的增加常会导致血清、血浆浑浊或奶酪状，通常称之为脂血。血清或血浆浑浊本身具有一定的临床意义，实验室报告这一结果，同时血清浑浊可导致许多指标出现假性升高（如总蛋白） 。另处，由于指质可以置换5水，经常导致血 K、Na 的的浓度在电极法测定时比火焰光度计法高。脂蛋白可以结合亲脂成分，降低与抗体的结合，从而干扰免疫检测结
6、果。（二）溶血溶血的标本可以给测定值带来很大的影响，标本溶血后血细胞内含量高的物质进入到血清可造成结果假性升高，同时溶血可干扰测定中的反应过程及比色，常会导致许多被测指标的浓度假性升高。（三）黄疸 由于血清总胆红素含量太高干扰许多指标的测定结果。（四）某些药物的影响某些药物对测定结果的影响是不容忽视的。药物的影响主要有（1）药物的代谢产物对某些试验方法的物理或化学干扰；药物增加一些蛋白质的结合水平，从而影响这些物质的存在方式；药物自身与蛋白质结合。总之，正确全面了解药物对测定结果的影响对检验医师和临床医师都是十分必要的，这对正确解释检验结果有帮助的。（五）巨酶免疫球蛋白与酶的复合物被称之为巨酶
7、，几存在于所有的诊断酶中，这些结合可以提高酶的半寿期，从而导致酶的活性升高。最明显的例子就是 CK1及 CK2，巨 CK1 是 CK-BB 与免疫球蛋白的复合物，巨 CK2 是线粒体 CK 的多聚物，这两种类型的巨 CK 均可使 CK-MB 活性上升。另一个例子是巨淀粉酶，它的显著特征是使血中淀粉酶活性升高，而尿中淀粉酶则正常。四、静脉采集基本要求（一）患者体位住院患者卧位。从卧位到直立位：则血浆量减少 12%。大多数细胞成分及大分子物质有 5%-15%升高。不应在输液侧采血：如不可避免，必须注明。否则一切后果采血者负责。试管准备：按检验条码要求准确备齐各种试管而不能混用（二）血管选择应选用较
8、大的血管。血管小：采血时易发生塌陷，引起凝血。不能采到足够的血量。6（三）注射器针头外径 1mm。针头外径1mm 可引起创伤，导致血管碎片入血，促发凝血。针头外径0.7mm 血液采集时间延长，针头内压力剃度可导致溶血和血小板激活。消毒部位：穿刺处所用消毒液已干（四）止血带压脉带控制在 1 min 内。一旦血液入针筒，就应去除。病人握拳：不能一握一放。抽血过程：应缓慢，不宜过快，将血液沿管壁徐徐注入标本容器，以免产生大量泡沫或溶血。保证血量：按条码要求选择采血容器颜色。避免抽血不当或血量不足。采血容器的颜色、用途和采血量头盖颜色 添加剂 用途 采血量（ml） 紫色 EDTA-K2 血常规、HLA
9、-B27 、心肌损伤标志物 2.0 蓝色 枸橼酸钠 凝血常规、等凝血试验 2.7黑色 枸橼酸钠 血沉 1.8 绿色 肝素 血流变学、D-D、FDP 2.0红色 分离胶促凝 生化检验 4.0 黄色 分离胶促凝 免疫检验 4.0 （五）采集多种血液标本的次序：NCCLS 推荐1. 多种血液标本时，采血次序为：血培养管、普通血清管、枸橼酸钠管、凝胶分离管/普通血清试管、肝素管/肝素凝胶分离管、EDTA 管、葡萄糖检测管。2. 同一患者采集多种试管，采血次序：EDTA 管、其他试管、凝血标本。3. 试管混匀：抗凝血必须及时、充分、轻轻颠倒混匀血液和抗凝剂，至少 5 次以上。避免采血损伤和用力转入容器。
10、（六）抗凝血量71、血液比例过高由于抗凝剂相对不足，血浆中出现微血凝块。2、血液比例过低抗凝剂相对过剩，对很多检验会造成严重影响。（七）记录标本信息：标本管上（条码）注明姓名、科别、床号等相关信息。（八）标明采血时间从采血和离心之间的延误可导致试验结果的质量，因此，标明采血时间很重要。（九）生物安全所有采集标本的器皿均应加塞密闭（十）标本运输和储存采血完成后，时间耽搁越少，检验结果的可靠性就越高。1.标本运输温度：在运输到检验科前，标本必须置于室温下，标本转运必须符合储存条件。ICSH 建议：在室温（1825）下，4h完成检测分离血浆和血清：血细胞与血清或血浆接触2h：血浆或血清将浓缩、分析物
11、被破坏。冷凝集试验、血氨、凝血项目检测立即送检。同一病人同时有数管血标本送检，应标明采血先后顺序，以便结果不一致时可进行溯源运输必须平稳。泡沫可使蛋白质变性，血小板激活。试管置于专用试管架和有合适温度的容器转运。2.储存条件：如不能及时检查，应放在室温、4、20、80冰箱中保存。（十一）避免标本溶血：是保证标本质量的重要环节。应将溶血标本弃置并记录，重新采血。标本溶血常见原因：采血不熟练、劣质采血器和试管、注射器血急速注入试管、试管混匀用力过猛、从已有血肿的静脉采血、采血量不足、穿刺处所用消毒液未干、注射器和针头连接不紧采血时空气进入产生泡。肉眼未见溶血，但乳酸脱氢酶、血红素、转氨酶或钾等值异
12、常增高时，应警惕是否发生了非显性溶血。（十二）血液浓缩原因：8使用压脉带时间过长进针处按摩、挤压或摸索寻找长期静脉治疗硬化或阻塞的静脉（十三）拒收标本标准1、患者信息不全2、标签不清，不具备识别系统的唯一性3、抗凝不当、标本凝固4、时间延误5、溶血标本6、储存温度不当7、采自输液管8、样本外漏、容器破损9、明显受污染的样本10、标本量过少11、标本项目与申请项目不符12、医嘱作废的标本13、容器不合格，影响检验结果（十四）接受标本：必须认真核对标本1、姓名2、申请项目3、标本类型4、试管和抗凝剂合适性5、标本是否泄漏或容器损坏6、标本量是否足够（十五）治疗药物浓度监测采样时间1 氨基糖苷类抗生
13、素：一般在用药结束后稍晚一点的时间开始，若滴注为1h，在滴注结束后 10min 取血样，若滴注小于 1h,一般在给药 30 min 取样。2、卡马西平：达稳态血药浓度时，给下一剂量前立即采样（谷值） 。 93、苯巴比妥：由于半衰期长，采样时间不重要，可加固定在同一时间采样，以便比较。 4、丙戊酮：给下一剂量前立即采样（谷值） 。5、地高辛：给药后 824 小时。(不管是静脉给药还是口服给药，完成药物的分布过程需要 812h.。 6、茶碱：口吸服后 24h。7、奎尼丁：若每 6h 服药一次，则给药后 6h 左右取血；若每 8h 服药一次，则给药后 56h 左右取血。总之，应于下次给药前采血测谷浓
14、度。8、环孢霉素：服药后 12h 。9、必要时遵照医嘱。微生物标本的采集一.血液及骨髓(一) 采集时间1、一般原则 (1)、病人发热初期或发热高峰.(2)、使用抗菌素前(3)、已经用药者,应在下次用药前2.、布鲁杆菌感染 (1)、最佳时间:发热期(2)、还可多次采血,24 小时抽 34 次3.、沙门菌感染(1)、可在不同时间采集标本(2、)肠热症患者在病程 13 周内采集标本4.、亚急性心内膜炎：除发热期外,应多次采集5、急性心内膜炎：治疗前 12 小时内分别在 3 个不同部位抽血样培养。6、急性败血症：脑膜炎、骨髓炎、关节炎、急性未处理的细菌性肺炎和肾盂肾炎除在发热期采血外，应在治疗前短时间
15、内在身体不同部位采血，分别作需氧、厌氧培养。7、不明原因发热10（1） 、发热期内多次采血（2） 、如果 24 小时培养为阴性结果，应继续采集 23 份或更多次血样进行培养。8、肺炎链球菌感染：最佳时期为高热、寒战或休克时。9、分枝杆菌感染：感染初期采血（二）采集部位及频率1、急性败血症：24 小时内抽血 3 次或更多，在不同部位如左、右手臂或颈部采集。2、急性心内膜炎：治疗前 12 小时内，在三个不同部位采集血标本3、亚急性心内膜炎：第一天在身体不同部位取三次标本。如果 24 小时培养为阴性结果，应继续采集 23 份或更多次多部位采集血样进行培养。4、无名热 ：不定期多次、多部位。24 小时
16、内不超过 3 次，如果培养为阴性结果，应继续采集送检。（三）标本采集量成人：10 毫升血液儿童：35 毫升婴幼儿：12 毫升 （四）标本采集注意事项1、用 75%酒精消毒瓶盖，不用碘酒消毒2、严格作好抽血部位的无菌操作3、同时做需氧和厌氧培养时，先将标本注如厌氧瓶中，然后再注如需氧瓶里。4、注如标本的培养瓶立即送检，如不能立即送检时，放室温保存，切勿放冰箱内5、化验单上注明采血时间二、尿液标本（一）采集时间：抗菌素应用之前，晨起第一次尿液（二）采集方法1、段尿采集方法：清洗尿道口，排尿弃去前段尿，留取中段尿 10 毫升于11无菌容器中立即送检。2、集尿法：结核分枝杆菌集菌检查。将 24 小时尿
17、留在一清洁容器中，取沉渣 10 毫升送检3、尿法：通过导尿管留尿 10 毫升于无菌容器中立即送检（三）注意事项1、尿严格进行无菌操作2、集后立即送检3、用药之前进行培养4、液中不得加防腐剂三.、粪便标本（一）采集时间1、泻病人在急性期用药前采集2、沙门菌感染 肠热症在 2 周以后；胃肠炎病人在急性期采集新鲜粪便（二）集方法1、自然排便法：自然排便后，挑取有脓血，黏液部位的粪便于无菌容器内送检。2、直肠拭子法：不易获得粪便可采用直肠拭子法采集。（二）注意事项1、标本新鲜2、用药前采集3、腹泻病人在急性期采集四、痰及上呼吸道标本（一）标本采集时间1、用药前清晨痰2、鼻咽拭子 用药前，无严格时间要求
18、（二）采集方法1、自然咳痰法：清晨起床后，清水反复漱口后用力除第一口痰于无菌容器中立即送检。2、上呼吸道标本：采用无菌棉拭子12（三）注意事项标本采集后立即送检，如不能立即送检，放冰箱保存五、化脓和创伤标本（一）标本采集1、开放性感染：标本采集前清创创口，然后用无菌拭子采取脓汁及病灶深部分泌物于无菌管中立即送检。2、闭锁性脓肿：无菌操作，穿刺抽取标本于无菌管中立即送检。（二）注意事项1、药前采集标本2、能立即送检标本，放 4保存，但培养淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌标本除外。六、穿刺液一一一 脑脊液1、集时间 怀疑为脑膜炎的病人，在用药前应立即采集脑脊液进行培养2、集方法 用腰穿方法采集脑脊液 35
19、 毫升于无菌管中立即送检一一一 注意事项1、于细菌检测：收集脑脊液后 15 分钟内送检，脑脊液不可放冰箱保存。2、于病毒检测：脑脊液标本应放置冰块，在 415 分钟内送检。3、行腰穿过程中，严格无菌操作一一一 胆汁及穿刺液1、检测时间：怀疑感染存在，应尽早在用药之前或停止用药后 12 天采集标本2、采集方法：无菌穿刺抽取标本于无菌管中立即送检，量不少于 1 毫升七、烧伤标本（一） 、采集时间 早期、深 度烧伤溶痂和度焦痂分离期、后期每天采集烧伤标本于无菌管中立即送检（二） 、采集方法 用无菌拭子，直接从烧伤创面的脓汁多部位采集（三） 、注意事项1、严格无菌操作132、床前采集标本进行厌氧培养3
20、、烧伤 12 小时以后进行采集创面标本，可获得阳性结果八、生殖道标本（一）标本采集尿道分泌物、阴道分泌物、宫颈分泌物、宫呛内容物、前列腺按摩液、精液等严格无菌操作留取于无菌管中立即送检。（二）注意事项1、严格无菌操作2、采取宫颈标本避免触及阴道壁3、床前采集标本进行厌氧培养九.组织标本（一）采集时间1、浅表皮肤黏膜 使用抗生素之前采用2、深部组织 手术或内窥镜检查是采集3、尸检标本 死后迅速采集（二）采集方法 无菌操作留取标本于无菌管中立即送检（三）注意事项1、严格无菌操作2、各种活检组织标本，常温下最长保存 24 小时3、甲醛固定的组织块标本不用于病原微生物分离附：样本拒收标准1、样本上无患
21、者条码或条码不符和要求2、样本外漏、容器破损及明显受污染的样本3、样本的检验项目申请不适合进行4、当日重复送样本（血培养除外）骨髓形态标本的采集一、髓标本的采集是由临床医生采集，应适量不得超过 0.2ml，取材应避免混血。二、脑脊液标本的采集是由临床医生采集，采集后应立即送检，接到标本后应14及时制作标本。三、血液涂片的采集（包括血细胞形态检查和疟原虫检查）方法两种：由临床护士用 BD 管采血，采血后标本应尽快送检，应在 2 小时内制成血涂片，标本不可放置过久。在未制作血涂片前，标本严禁放入冰箱内保存，分院送检的标本应制成血涂片送检。冬季室外送检的标本应保温，避免标本受冻溶血,如果标本放置时间
22、超过 24小时（夏季温度高）可拒收标本。细胞遗传（染色体）标本的采集一、预约时要求患者采血化验前半个月内尽量避免应用各种药物。二、到本室采血时要求患者精神尽量放松，因为患者过度紧张时机体释放的血管紧张素会影响染色体的生长。脱落细胞标本的采集一、痰标本：留取痰标本的方法有自然咯痰、气管穿刺吸取、经支气管镜抽取等，以自然咯痰为主，本应新鲜。应嘱患者用力咳出气管深处真正的呼吸道分泌物，于干净痰盒内，密封送到细胞室，而勿混入唾液及鼻咽部分泌物。二、液体标本（胸、腹水、心包液、尿液、脑脊液等）要求新鲜，送实验室应立即制片，否则细胞自溶退化而破坏，影响诊断。如不能立即制片，可在标本中加入 40%甲醛溶液以
23、防止细胞自溶。液体标本要求标本量 50-100ml（脑脊液除外） 。三、乳腺溢液：询问病史，让病人自行或制片人员沿乳腺导管轻轻挤压，将第一滴溢液去掉，再挤出制片，如有血选择血性乳液，粘片制成薄厚均匀的涂片，马上固定。四、气管镜刷片、妇科刮片由临床医生涂制。但标本需马上固定。若做液基细胞按液体标本方法制片。五、穿刺细胞学：到时本室取标本。血尿定位标本的采集15一、患者清晨 3 点排尿一次，这次尿不要，然后留取 3 点 6 点全程尿一次。全部收集在干燥、清洁、无污染的容器内来检验时带来。二、早 8 点到检验科由血尿定位定提供清洁尿杯分三杯留取新鲜尿液。三、本室可保存尿液中存在的有形成分形态冰箱温度
24、为 28。粪便标本的采集粪便标本的采集方法直接影响检验结果的准确性，通常采取自然排出的粪便：1、留取新鲜指头大小（5 克）的大便，放入干燥、清洁、无吸水性的容器内送检。不要混入其它杂物，容器上应贴好标签、条码或注明患者姓名、科别、床号、收集时间及检测项目。2、本应选择具有病理意义的便（如浓血、血粘液、水样等选取）应在半小时内送检，2 小时内检测完毕，否则应 PH 变化及消化酶的影响可使便的细胞成分破坏分解。最多不应超过 4 小时。3、无法排便而又必须检查时，可经肛门用肛试子采便。4、试验应嘱咐患者在收集标本前三天禁食动物性食物，并禁服铁剂和维生素 C.且连续检查三天，收集后须迅速送检。5、寒冷
25、时应保持温度，避免冻溶防止有形成分破坏。尿标本的采集一、根据不同检验目的。留取晨尿和餐后 2h 尿、12h 尿、24h 尿及随机尿。.尿常规检验通常为：（一） 、新鲜晨尿（这时的尿标本较浓缩和酸化，不受运动及进餐等影响。适用于尿蛋白、尿沉渣、尿亚硝酸盐检验及细菌培养）和随机尿 （尿液可能被稀释或受进餐、药物以及新陈代谢等影响，尿中成分检出情况不尽相同。餐后尿检测易出现糖尿） 。（二） 、尿胆原检测以 14：0016：00 时间段内留取的尿液为好。（三） 、尿液定量检查需要留取 12h 或 24h 的混合尿液，留取时应按规定时间内排出之尿液装入含有合适防腐剂的洁净容器内，混匀后记录总量，取 10
26、ml 送检。161、12h 尿：适用于 Addis 计数。试验当日清晨起，除正常饮食外，不得再饮水，以利尿液浓缩。于晚上留尿开始时，嘱患者排尿并弃去，收集此后 12h 内的全部尿液。2、24h 尿：适用于代谢产物 24h 定量测定或 24h 尿沉渣抗酸杆菌检查。留取要求同 12h 尿。二、尿液标本采集应清洁、干燥的一次性容器，应用时贴上条码。避免经血、白带、精液、粪便混入。标本留取后及时送检，以免因光线、细菌滋生造成化学物质和有形成分的改变和破坏。作细菌检验的标本，在微生物标本采集注意事项介绍。三、尿标本的防腐与保存：冷藏法：4冰箱，不得超过 6 小时。但应注意，有些成分如尿酸盐在低温时会沉淀
27、析出，影响其化学成分的测定；同时，碱性尿液中的红细胞以及细胞管型即使在冰箱中也会破坏。因此，要根据检测项目的需要，选择不同的防腐及保存方法。甲苯法：100ML 尿加 0.5ML 甲苯，适用于 24 小时尿液化学检查。前列腺标本留取注意事项由临床医师进行，标本少时 1 滴，多时可达 1ml 左右。置洁净载物玻片上，立即送检。以防干涸。 精液标本的采集一、嘱患者禁止合房七天，留取精液。二、直接用干燥、防漏、洁净的容器留取。容器不易过大，以免沾留太多。要求在半小时内保温送检验科。冬天最好放在内衣口袋里。三、标本采集次数：精子生成的日间变化较大，因此，对于少精症患者不能仅凭 1 次检查结果诊断。一般间
28、隔 12 周再检查 1 次，连续检查 23 次后再作判断。四、避免用避孕套工具留取。影响活动力。五、必要时在医生指导下留取。浆膜腔穿刺液的采集由临床医师进行；穿刺必须注意无菌操作，勿使细菌污染穿刺部位及标本。17采取量由检验目的按条码要求而定。为防止细胞变性、凝块发生或细菌溶解，应及时送检及检验。如不能送检，可加适量的枸橼酸钠抗凝剂（蓝色真空管）内，混均后立即送检。如要观察标本有无凝固现象，则不能加抗凝剂。胃液标本采集先将晨间空腹殘余胃液抽空弃去。然后在 1h 内连续抽出胃液放入同一瓶内。脑脊液标本的采集一、 本由医通过腰椎穿刺采集。穿刺应顺利，避免将因液混入标本。二、标本一般收集 3 管，每
29、管 2ml。第 1 管做细菌培养；第 2 管做化学或免疫检查；第 3 管做常规及细胞计数。三、标本就及时送检、及时检验。久置可致细胞破坏、变性、自容，糖分解及病原菌破坏或溶解等影响检验结果。18患者 1、状态 避免剧烈活动、禁食 12h 后作为采血标准。2、时间 一般生理成分在晨起时都处于较低水平，随着起床和活动增加而逐步上升，下午较高，入夜休息和睡眠后渐低，晨起前最低。个体日变动差(最高与最低)项目 日变动差 项目 日变动差钠(mmol/L) 4.8钾(mmol/L) 0.4氯(mmol/L) 3磷(mmol/L) 0.22总蛋白(mmol/L) 0.6白蛋白/球蛋白(mmol/L) 0.3
30、尿素氮(mmol/L) 1.2尿酸(mmol/L) 0.49胆固醇(mmol/L) 0.52甘油三酯(mmol/L) 0.33碱性磷酸酶(King U) 丙氨酸氨基转移酶(U/L) 3.6 门冬氨酸氨基转移酶(U/L) 3.9乳酸脱氢酶(U/L) 2.7胆碱酯酶(ph) 0.1淀粉酶(somogy U/L) 173、生活环境 4、药物 停服能干扰检查项目的药物，特别是进行脏器功能试验时更为重要5、吸烟 吸烟对检查的影响与吸烟量成正比. 6、性别 对许多检查项目有影响，女性受性期周期影响较大，男女发育阶段也有一定的差别。7、年龄 一般是从婴乳儿、儿童、青少年、青壮年、更年期和老年，从生长发育代谢旺盛至代谢减慢、衰老，各种生物活性物质从活跃到降低，免疫功能从发育不全到发育完善直致衰老、萎缩，其相关的检查也有相应的变化。19
