1、普通外科专业优秀论文 血管生长抑制素和 CD34 在胆管癌组织中的表达及其临床意义的研究关键词：CD34 胆管癌 原位杂交 血管生长抑制素摘要：目的: 原发肿瘤的生长、生存及转移均依赖于其病灶局部血管的新生以提供营养，这个过程叫做血管生成。近几年来对实体肿瘤血管形成的研究已取得较大进展。在肿瘤血管形成的调节方面，已发现许多血管形成的生长因子和抑制因子。因此，肿瘤的血管系统已成为一个有希望的、新的抗肿瘤治疗靶点。人们已致力于开发和研究能破坏或抑制血管生成、有效地阻止肿瘤的生长和转移的药物，这类药物称为肿瘤血管生成抑制剂，如血管生长抑制因子(angiostatin，AS)。CD34 是内皮细胞标记
2、物之一，参与血管生成，可作为 MVD定量的指标，而且具有较高的特异性和敏感性，是评估新生血管的金标准，并与肿瘤转移有关。本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达以及采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系，以探讨 AS 和 CD34 与胆管癌发生、发展及预后的相关性。 材料和方法: 1实验对象：收集中国医科大学附属第二医院外科 1999-2006 年外科手术治疗的胆管癌组织标本 45 例，病理证实均为胆管癌。其中男 18 例，女 27 例，年龄18-76 岁。根据 WHO 病理分类标准为高、中分化腺癌者 31 例，低分化腺癌 14例。肿瘤部位
3、：胆总管中下段 27 例、肝门部 18 例。经肉眼或病理所见有浸润转移者 34 例，无转移者 11 例。所有患者术前均未接受化疗和放疗。另取良性胆管标本 11 例作为对照。 2实验方法：本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达。采用人 AS 原位杂交检测试剂盒进行检测。针对人 AS 的cDNA 探针序列如下：1:5-GCACT TGGCI、 GTTGG TTGTA TGGCA C：2：5-CGTCA GGATT GCGGCAGTAG TTTC AT；3：5-CTGCT CTTTG CTGTG GTACT、GGAAq、GAC 细胞浆染成棕黄色为阳性，结果用 Meta Morph Ima
4、ging System 软件处理，按图象灰度结果分为五个等级：无染色，灰度值不少于130，为阴性(一)；轻微染色，灰度值在 125130 之间，为弱阳性()；染色较浅，灰度值在 115125 之间，为阳性(+)；染色较深，灰度值在 105115 之间，为较强阳性(+)；染色深，灰度值不大于 105，为强阳性(+)。采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系。 结果: 1AS 在不同胆管组织中的表达 在胆管癌组和良性组织中均可见 AS阳性染色，且表达主要定位于肿瘤细胞胞浆中，呈弥漫性或散在分布的棕黄色颗粒。AS 在胆管癌组织内的表达呈明显的异质性，大部分癌
5、组织边缘区细胞染色强于中心区，部分癌组织坏死周边区可见强阳性染色出现，内皮细胞及血管壁可见均匀的 AS 阳性染色。良性组织 AS 阳性表达率 18.2(2/11)，胆管癌组织阳性表达率 60.0(27/45)，二者相比，差异有统计学意义(Xlt;#39;2gt;=6.19，Plt;0.05)(见表 1)。 2胆管癌组织中 AS 的表达与临床病理参数的关系 AS 的表达与性别、年龄、肿瘤部位及分化程度等无相关性(Pgt;0.05)；而与肿瘤有无淋巴结转移有非常显著性相关(Plt;0.05)。 3MVD 在不同胆管组织中的表达 CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中。MVD 染色阳性细胞为血管
6、内皮细胞染成棕黄色或褐色，肿瘤内血管分布呈现异质性，在肿瘤组织浸润前缘密度较高，而在硬化坏死区则较稀疏。11 例非肿瘤性胆管组织和 45 例胆管癌组织的 MVD 表达率分别为 26.805.14，31.784.41，差异具有显著意义(t=4.34，Plt;0.05)(见表 3)。 4MVD 在胆管癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系 MVD 在淋巴结转移组和无转移组分别为41.239.76，30.936.12，差异有显著意义(Plt;0.05)。 MVD 在肿瘤的高中分化与低分化的表达分别为 32.627.96 和 39.227.75，差异具有显著意义(Plt;0.01)。同时 MVD 的表
7、达与肿瘤部位(胆总管下段为33.428.99、肝门部为 37.7910.15)也有显著性相关(Plt;0.01)。而与患者患病的年龄和性别无关(Pgt;0.05)。 结论: 1在国内首次进行胆管癌与血管抑素的相关性研究，本研究结果显示 AS 在胆管癌组织中呈高表达，而 AS 与年龄、性别及肿瘤的发生部位、分化程度无关，与有无淋巴结转移和肿瘤的有关； 2CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中，且在胆管癌组织中呈高表达，CD34 与年龄、性别无关，而与肿瘤的分化程度、发生部位以及有无淋巴结转移有关； 3本研究结果提示，AS 与 CD34 在胆管癌癌变中可能起协同作用。正文内容目的: 原发肿瘤的
8、生长、生存及转移均依赖于其病灶局部血管的新生以提供营养，这个过程叫做血管生成。近几年来对实体肿瘤血管形成的研究已取得较大进展。在肿瘤血管形成的调节方面，已发现许多血管形成的生长因子和抑制因子。因此，肿瘤的血管系统已成为一个有希望的、新的抗肿瘤治疗靶点。人们已致力于开发和研究能破坏或抑制血管生成、有效地阻止肿瘤的生长和转移的药物，这类药物称为肿瘤血管生成抑制剂，如血管生长抑制因子(angiostatin，AS)。CD34 是内皮细胞标记物之一，参与血管生成，可作为 MVD定量的指标，而且具有较高的特异性和敏感性，是评估新生血管的金标准，并与肿瘤转移有关。本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS
9、 的表达以及采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系，以探讨 AS 和 CD34 与胆管癌发生、发展及预后的相关性。 材料和方法: 1实验对象：收集中国医科大学附属第二医院外科 1999-2006 年外科手术治疗的胆管癌组织标本 45 例，病理证实均为胆管癌。其中男 18 例，女 27 例，年龄18-76 岁。根据 WHO 病理分类标准为高、中分化腺癌者 31 例，低分化腺癌 14例。肿瘤部位：胆总管中下段 27 例、肝门部 18 例。经肉眼或病理所见有浸润转移者 34 例，无转移者 11 例。所有患者术前均未接受化疗和放疗。另取良性胆管标本 11 例
10、作为对照。 2实验方法：本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达。采用人 AS 原位杂交检测试剂盒进行检测。针对人 AS 的cDNA 探针序列如下：1:5-GCACT TGGCI、 GTTGG TTGTA TGGCA C：2：5-CGTCA GGATT GCGGCAGTAG TTTC AT；3：5-CTGCT CTTTG CTGTG GTACT、GGAAq、GAC 细胞浆染成棕黄色为阳性，结果用 Meta Morph Imaging System 软件处理，按图象灰度结果分为五个等级：无染色，灰度值不少于130，为阴性(一)；轻微染色，灰度值在 125130 之间，为弱阳性()；染色
11、较浅，灰度值在 115125 之间，为阳性(+)；染色较深，灰度值在 105115 之间，为较强阳性(+)；染色深，灰度值不大于 105，为强阳性(+)。采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系。 结果: 1AS 在不同胆管组织中的表达 在胆管癌组和良性组织中均可见 AS阳性染色，且表达主要定位于肿瘤细胞胞浆中，呈弥漫性或散在分布的棕黄色颗粒。AS 在胆管癌组织内的表达呈明显的异质性，大部分癌组织边缘区细胞染色强于中心区，部分癌组织坏死周边区可见强阳性染色出现，内皮细胞及血管壁可见均匀的 AS 阳性染色。良性组织 AS 阳性表达率 18.2(2/11)
12、，胆管癌组织阳性表达率 60.0(27/45)，二者相比，差异有统计学意义(Xlt;#39;2gt;=6.19，Plt;0.05)(见表 1)。 2胆管癌组织中 AS 的表达与临床病理参数的关系 AS 的表达与性别、年龄、肿瘤部位及分化程度等无相关性(Pgt;0.05)；而与肿瘤有无淋巴结转移有非常显著性相关(Plt;0.05)。 3MVD 在不同胆管组织中的表达 CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中。MVD 染色阳性细胞为血管内皮细胞染成棕黄色或褐色，肿瘤内血管分布呈现异质性，在肿瘤组织浸润前缘密度较高，而在硬化坏死区则较稀疏。11 例非肿瘤性胆管组织和 45 例胆管癌组织的 MVD
13、表达率分别为 26.805.14，31.784.41，差异具有显著意义(t=4.34，Plt;0.05)(见表 3)。 4MVD 在胆管癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系 MVD 在淋巴结转移组和无转移组分别为41.239.76，30.936.12，差异有显著意义(Plt;0.05)。 MVD 在肿瘤的高中分化与低分化的表达分别为 32.627.96 和 39.227.75，差异具有显著意义(Plt;0.01)。同时 MVD 的表达与肿瘤部位(胆总管下段为33.428.99、肝门部为 37.7910.15)也有显著性相关(Plt;0.01)。而与患者患病的年龄和性别无关(Pgt;0.05)
14、。 结论: 1在国内首次进行胆管癌与血管抑素的相关性研究，本研究结果显示 AS 在胆管癌组织中呈高表达，而 AS 与年龄、性别及肿瘤的发生部位、分化程度无关，与有无淋巴结转移和肿瘤的有关； 2CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中，且在胆管癌组织中呈高表达，CD34 与年龄、性别无关，而与肿瘤的分化程度、发生部位以及有无淋巴结转移有关； 3本研究结果提示，AS 与 CD34 在胆管癌癌变中可能起协同作用。目的: 原发肿瘤的生长、生存及转移均依赖于其病灶局部血管的新生以提供营养，这个过程叫做血管生成。近几年来对实体肿瘤血管形成的研究已取得较大进展。在肿瘤血管形成的调节方面，已发现许多血管形成
15、的生长因子和抑制因子。因此，肿瘤的血管系统已成为一个有希望的、新的抗肿瘤治疗靶点。人们已致力于开发和研究能破坏或抑制血管生成、有效地阻止肿瘤的生长和转移的药物，这类药物称为肿瘤血管生成抑制剂，如血管生长抑制因子(angiostatin，AS)。CD34 是内皮细胞标记物之一，参与血管生成，可作为 MVD定量的指标，而且具有较高的特异性和敏感性，是评估新生血管的金标准，并与肿瘤转移有关。本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达以及采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系，以探讨 AS 和 CD34 与胆管癌发生、发展及预后的相关性。 材料和方法
16、: 1实验对象：收集中国医科大学附属第二医院外科 1999-2006 年外科手术治疗的胆管癌组织标本 45 例，病理证实均为胆管癌。其中男 18 例，女 27 例，年龄18-76 岁。根据 WHO 病理分类标准为高、中分化腺癌者 31 例，低分化腺癌 14例。肿瘤部位：胆总管中下段 27 例、肝门部 18 例。经肉眼或病理所见有浸润转移者 34 例，无转移者 11 例。所有患者术前均未接受化疗和放疗。另取良性胆管标本 11 例作为对照。 2实验方法：本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达。采用人 AS 原位杂交检测试剂盒进行检测。针对人 AS 的cDNA 探针序列如下：1:5-GC
17、ACT TGGCI、 GTTGG TTGTA TGGCA C：2：5-CGTCA GGATT GCGGCAGTAG TTTC AT；3：5-CTGCT CTTTG CTGTG GTACT、GGAAq、GAC 细胞浆染成棕黄色为阳性，结果用 Meta Morph Imaging System 软件处理，按图象灰度结果分为五个等级：无染色，灰度值不少于130，为阴性(一)；轻微染色，灰度值在 125130 之间，为弱阳性()；染色较浅，灰度值在 115125 之间，为阳性(+)；染色较深，灰度值在 105115 之间，为较强阳性(+)；染色深，灰度值不大于 105，为强阳性(+)。采用免疫组化法检
18、测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系。 结果: 1AS 在不同胆管组织中的表达 在胆管癌组和良性组织中均可见 AS阳性染色，且表达主要定位于肿瘤细胞胞浆中，呈弥漫性或散在分布的棕黄色颗粒。AS 在胆管癌组织内的表达呈明显的异质性，大部分癌组织边缘区细胞染色强于中心区，部分癌组织坏死周边区可见强阳性染色出现，内皮细胞及血管壁可见均匀的 AS 阳性染色。良性组织 AS 阳性表达率 18.2(2/11)，胆管癌组织阳性表达率 60.0(27/45)，二者相比，差异有统计学意义(Xlt;#39;2gt;=6.19，Plt;0.05)(见表 1)。 2胆管癌组织中 AS 的
19、表达与临床病理参数的关系 AS 的表达与性别、年龄、肿瘤部位及分化程度等无相关性(Pgt;0.05)；而与肿瘤有无淋巴结转移有非常显著性相关(Plt;0.05)。 3MVD 在不同胆管组织中的表达 CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中。MVD 染色阳性细胞为血管内皮细胞染成棕黄色或褐色，肿瘤内血管分布呈现异质性，在肿瘤组织浸润前缘密度较高，而在硬化坏死区则较稀疏。11 例非肿瘤性胆管组织和 45 例胆管癌组织的 MVD 表达率分别为 26.805.14，31.784.41，差异具有显著意义(t=4.34，Plt;0.05)(见表 3)。 4MVD 在胆管癌组织中的表达及其与临床病理特征的
20、关系 MVD 在淋巴结转移组和无转移组分别为41.239.76，30.936.12，差异有显著意义(Plt;0.05)。 MVD 在肿瘤的高中分化与低分化的表达分别为 32.627.96 和 39.227.75，差异具有显著意义(Plt;0.01)。同时 MVD 的表达与肿瘤部位(胆总管下段为33.428.99、肝门部为 37.7910.15)也有显著性相关(Plt;0.01)。而与患者患病的年龄和性别无关(Pgt;0.05)。 结论: 1在国内首次进行胆管癌与血管抑素的相关性研究，本研究结果显示 AS 在胆管癌组织中呈高表达，而 AS 与年龄、性别及肿瘤的发生部位、分化程度无关，与有无淋巴结
21、转移和肿瘤的有关； 2CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中，且在胆管癌组织中呈高表达，CD34 与年龄、性别无关，而与肿瘤的分化程度、发生部位以及有无淋巴结转移有关； 3本研究结果提示，AS 与 CD34 在胆管癌癌变中可能起协同作用。目的: 原发肿瘤的生长、生存及转移均依赖于其病灶局部血管的新生以提供营养，这个过程叫做血管生成。近几年来对实体肿瘤血管形成的研究已取得较大进展。在肿瘤血管形成的调节方面，已发现许多血管形成的生长因子和抑制因子。因此，肿瘤的血管系统已成为一个有希望的、新的抗肿瘤治疗靶点。人们已致力于开发和研究能破坏或抑制血管生成、有效地阻止肿瘤的生长和转移的药物，这类药物称
22、为肿瘤血管生成抑制剂，如血管生长抑制因子(angiostatin，AS)。CD34 是内皮细胞标记物之一，参与血管生成，可作为 MVD定量的指标，而且具有较高的特异性和敏感性，是评估新生血管的金标准，并与肿瘤转移有关。本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达以及采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系，以探讨 AS 和 CD34 与胆管癌发生、发展及预后的相关性。 材料和方法: 1实验对象：收集中国医科大学附属第二医院外科 1999-2006 年外科手术治疗的胆管癌组织标本 45 例，病理证实均为胆管癌。其中男 18 例，女 27 例，年龄1
23、8-76 岁。根据 WHO 病理分类标准为高、中分化腺癌者 31 例，低分化腺癌 14例。肿瘤部位：胆总管中下段 27 例、肝门部 18 例。经肉眼或病理所见有浸润转移者 34 例，无转移者 11 例。所有患者术前均未接受化疗和放疗。另取良性胆管标本 11 例作为对照。 2实验方法：本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达。采用人 AS 原位杂交检测试剂盒进行检测。针对人 AS 的cDNA 探针序列如下：1:5-GCACT TGGCI、 GTTGG TTGTA TGGCA C：2：5-CGTCA GGATT GCGGCAGTAG TTTC AT；3：5-CTGCT CTTTG CTG
24、TG GTACT、GGAAq、GAC 细胞浆染成棕黄色为阳性，结果用 Meta Morph Imaging System 软件处理，按图象灰度结果分为五个等级：无染色，灰度值不少于130，为阴性(一)；轻微染色，灰度值在 125130 之间，为弱阳性()；染色较浅，灰度值在 115125 之间，为阳性(+)；染色较深，灰度值在 105115 之间，为较强阳性(+)；染色深，灰度值不大于 105，为强阳性(+)。采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系。 结果: 1AS 在不同胆管组织中的表达 在胆管癌组和良性组织中均可见 AS阳性染色，且表达主要定位于
25、肿瘤细胞胞浆中，呈弥漫性或散在分布的棕黄色颗粒。AS 在胆管癌组织内的表达呈明显的异质性，大部分癌组织边缘区细胞染色强于中心区，部分癌组织坏死周边区可见强阳性染色出现，内皮细胞及血管壁可见均匀的 AS 阳性染色。良性组织 AS 阳性表达率 18.2(2/11)，胆管癌组织阳性表达率 60.0(27/45)，二者相比，差异有统计学意义(Xlt;#39;2gt;=6.19，Plt;0.05)(见表 1)。 2胆管癌组织中 AS 的表达与临床病理参数的关系 AS 的表达与性别、年龄、肿瘤部位及分化程度等无相关性(Pgt;0.05)；而与肿瘤有无淋巴结转移有非常显著性相关(Plt;0.05)。 3MV
26、D 在不同胆管组织中的表达 CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中。MVD 染色阳性细胞为血管内皮细胞染成棕黄色或褐色，肿瘤内血管分布呈现异质性，在肿瘤组织浸润前缘密度较高，而在硬化坏死区则较稀疏。11 例非肿瘤性胆管组织和 45 例胆管癌组织的 MVD 表达率分别为 26.805.14，31.784.41，差异具有显著意义(t=4.34，Plt;0.05)(见表 3)。 4MVD 在胆管癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系 MVD 在淋巴结转移组和无转移组分别为41.239.76，30.936.12，差异有显著意义(Plt;0.05)。 MVD 在肿瘤的高中分化与低分化的表达分别为 3
27、2.627.96 和 39.227.75，差异具有显著意义(Plt;0.01)。同时 MVD 的表达与肿瘤部位(胆总管下段为33.428.99、肝门部为 37.7910.15)也有显著性相关(Plt;0.01)。而与患者患病的年龄和性别无关(Pgt;0.05)。 结论: 1在国内首次进行胆管癌与血管抑素的相关性研究，本研究结果显示 AS 在胆管癌组织中呈高表达，而 AS 与年龄、性别及肿瘤的发生部位、分化程度无关，与有无淋巴结转移和肿瘤的有关； 2CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中，且在胆管癌组织中呈高表达，CD34 与年龄、性别无关，而与肿瘤的分化程度、发生部位以及有无淋巴结转移有关
28、； 3本研究结果提示，AS 与 CD34 在胆管癌癌变中可能起协同作用。目的: 原发肿瘤的生长、生存及转移均依赖于其病灶局部血管的新生以提供营养，这个过程叫做血管生成。近几年来对实体肿瘤血管形成的研究已取得较大进展。在肿瘤血管形成的调节方面，已发现许多血管形成的生长因子和抑制因子。因此，肿瘤的血管系统已成为一个有希望的、新的抗肿瘤治疗靶点。人们已致力于开发和研究能破坏或抑制血管生成、有效地阻止肿瘤的生长和转移的药物，这类药物称为肿瘤血管生成抑制剂，如血管生长抑制因子(angiostatin，AS)。CD34 是内皮细胞标记物之一，参与血管生成，可作为 MVD定量的指标，而且具有较高的特异性和敏
29、感性，是评估新生血管的金标准，并与肿瘤转移有关。本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达以及采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系，以探讨 AS 和 CD34 与胆管癌发生、发展及预后的相关性。 材料和方法: 1实验对象：收集中国医科大学附属第二医院外科 1999-2006 年外科手术治疗的胆管癌组织标本 45 例，病理证实均为胆管癌。其中男 18 例，女 27 例，年龄18-76 岁。根据 WHO 病理分类标准为高、中分化腺癌者 31 例，低分化腺癌 14例。肿瘤部位：胆总管中下段 27 例、肝门部 18 例。经肉眼或病理所见有浸润转移者
30、 34 例，无转移者 11 例。所有患者术前均未接受化疗和放疗。另取良性胆管标本 11 例作为对照。 2实验方法：本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达。采用人 AS 原位杂交检测试剂盒进行检测。针对人 AS 的cDNA 探针序列如下：1:5-GCACT TGGCI、 GTTGG TTGTA TGGCA C：2：5-CGTCA GGATT GCGGCAGTAG TTTC AT；3：5-CTGCT CTTTG CTGTG GTACT、GGAAq、GAC 细胞浆染成棕黄色为阳性，结果用 Meta Morph Imaging System 软件处理，按图象灰度结果分为五个等级：无染色，灰
31、度值不少于130，为阴性(一)；轻微染色，灰度值在 125130 之间，为弱阳性()；染色较浅，灰度值在 115125 之间，为阳性(+)；染色较深，灰度值在 105115 之间，为较强阳性(+)；染色深，灰度值不大于 105，为强阳性(+)。采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系。 结果: 1AS 在不同胆管组织中的表达 在胆管癌组和良性组织中均可见 AS阳性染色，且表达主要定位于肿瘤细胞胞浆中，呈弥漫性或散在分布的棕黄色颗粒。AS 在胆管癌组织内的表达呈明显的异质性，大部分癌组织边缘区细胞染色强于中心区，部分癌组织坏死周边区可见强阳性染色出现，内
32、皮细胞及血管壁可见均匀的 AS 阳性染色。良性组织 AS 阳性表达率 18.2(2/11)，胆管癌组织阳性表达率 60.0(27/45)，二者相比，差异有统计学意义(Xlt;#39;2gt;=6.19，Plt;0.05)(见表 1)。 2胆管癌组织中 AS 的表达与临床病理参数的关系 AS 的表达与性别、年龄、肿瘤部位及分化程度等无相关性(Pgt;0.05)；而与肿瘤有无淋巴结转移有非常显著性相关(Plt;0.05)。 3MVD 在不同胆管组织中的表达 CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中。MVD 染色阳性细胞为血管内皮细胞染成棕黄色或褐色，肿瘤内血管分布呈现异质性，在肿瘤组织浸润前缘密
33、度较高，而在硬化坏死区则较稀疏。11 例非肿瘤性胆管组织和 45 例胆管癌组织的 MVD 表达率分别为 26.805.14，31.784.41，差异具有显著意义(t=4.34，Plt;0.05)(见表 3)。 4MVD 在胆管癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系 MVD 在淋巴结转移组和无转移组分别为41.239.76，30.936.12，差异有显著意义(Plt;0.05)。 MVD 在肿瘤的高中分化与低分化的表达分别为 32.627.96 和 39.227.75，差异具有显著意义(Plt;0.01)。同时 MVD 的表达与肿瘤部位(胆总管下段为33.428.99、肝门部为 37.7910.
34、15)也有显著性相关(Plt;0.01)。而与患者患病的年龄和性别无关(Pgt;0.05)。 结论: 1在国内首次进行胆管癌与血管抑素的相关性研究，本研究结果显示 AS 在胆管癌组织中呈高表达，而 AS 与年龄、性别及肿瘤的发生部位、分化程度无关，与有无淋巴结转移和肿瘤的有关； 2CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中，且在胆管癌组织中呈高表达，CD34 与年龄、性别无关，而与肿瘤的分化程度、发生部位以及有无淋巴结转移有关； 3本研究结果提示，AS 与 CD34 在胆管癌癌变中可能起协同作用。目的: 原发肿瘤的生长、生存及转移均依赖于其病灶局部血管的新生以提供营养，这个过程叫做血管生成。近
35、几年来对实体肿瘤血管形成的研究已取得较大进展。在肿瘤血管形成的调节方面，已发现许多血管形成的生长因子和抑制因子。因此，肿瘤的血管系统已成为一个有希望的、新的抗肿瘤治疗靶点。人们已致力于开发和研究能破坏或抑制血管生成、有效地阻止肿瘤的生长和转移的药物，这类药物称为肿瘤血管生成抑制剂，如血管生长抑制因子(angiostatin，AS)。CD34 是内皮细胞标记物之一，参与血管生成，可作为 MVD定量的指标，而且具有较高的特异性和敏感性，是评估新生血管的金标准，并与肿瘤转移有关。本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达以及采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病
36、理参数间的关系，以探讨 AS 和 CD34 与胆管癌发生、发展及预后的相关性。 材料和方法: 1实验对象：收集中国医科大学附属第二医院外科 1999-2006 年外科手术治疗的胆管癌组织标本 45 例，病理证实均为胆管癌。其中男 18 例，女 27 例，年龄18-76 岁。根据 WHO 病理分类标准为高、中分化腺癌者 31 例，低分化腺癌 14例。肿瘤部位：胆总管中下段 27 例、肝门部 18 例。经肉眼或病理所见有浸润转移者 34 例，无转移者 11 例。所有患者术前均未接受化疗和放疗。另取良性胆管标本 11 例作为对照。 2实验方法：本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达。采用
37、人 AS 原位杂交检测试剂盒进行检测。针对人 AS 的cDNA 探针序列如下：1:5-GCACT TGGCI、 GTTGG TTGTA TGGCA C：2：5-CGTCA GGATT GCGGCAGTAG TTTC AT；3：5-CTGCT CTTTG CTGTG GTACT、GGAAq、GAC 细胞浆染成棕黄色为阳性，结果用 Meta Morph Imaging System 软件处理，按图象灰度结果分为五个等级：无染色，灰度值不少于130，为阴性(一)；轻微染色，灰度值在 125130 之间，为弱阳性()；染色较浅，灰度值在 115125 之间，为阳性(+)；染色较深，灰度值在 10511
38、5 之间，为较强阳性(+)；染色深，灰度值不大于 105，为强阳性(+)。采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系。 结果: 1AS 在不同胆管组织中的表达 在胆管癌组和良性组织中均可见 AS阳性染色，且表达主要定位于肿瘤细胞胞浆中，呈弥漫性或散在分布的棕黄色颗粒。AS 在胆管癌组织内的表达呈明显的异质性，大部分癌组织边缘区细胞染色强于中心区，部分癌组织坏死周边区可见强阳性染色出现，内皮细胞及血管壁可见均匀的 AS 阳性染色。良性组织 AS 阳性表达率 18.2(2/11)，胆管癌组织阳性表达率 60.0(27/45)，二者相比，差异有统计学意义(Xl
39、t;#39;2gt;=6.19，Plt;0.05)(见表 1)。 2胆管癌组织中 AS 的表达与临床病理参数的关系 AS 的表达与性别、年龄、肿瘤部位及分化程度等无相关性(Pgt;0.05)；而与肿瘤有无淋巴结转移有非常显著性相关(Plt;0.05)。 3MVD 在不同胆管组织中的表达 CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中。MVD 染色阳性细胞为血管内皮细胞染成棕黄色或褐色，肿瘤内血管分布呈现异质性，在肿瘤组织浸润前缘密度较高，而在硬化坏死区则较稀疏。11 例非肿瘤性胆管组织和 45 例胆管癌组织的 MVD 表达率分别为 26.805.14，31.784.41，差异具有显著意义(t=4.
40、34，Plt;0.05)(见表 3)。 4MVD 在胆管癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系 MVD 在淋巴结转移组和无转移组分别为41.239.76，30.936.12，差异有显著意义(Plt;0.05)。 MVD 在肿瘤的高中分化与低分化的表达分别为 32.627.96 和 39.227.75，差异具有显著意义(Plt;0.01)。同时 MVD 的表达与肿瘤部位(胆总管下段为33.428.99、肝门部为 37.7910.15)也有显著性相关(Plt;0.01)。而与患者患病的年龄和性别无关(Pgt;0.05)。 结论: 1在国内首次进行胆管癌与血管抑素的相关性研究，本研究结果显示 AS
41、在胆管癌组织中呈高表达，而 AS 与年龄、性别及肿瘤的发生部位、分化程度无关，与有无淋巴结转移和肿瘤的有关； 2CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中，且在胆管癌组织中呈高表达，CD34 与年龄、性别无关，而与肿瘤的分化程度、发生部位以及有无淋巴结转移有关； 3本研究结果提示，AS 与 CD34 在胆管癌癌变中可能起协同作用。目的: 原发肿瘤的生长、生存及转移均依赖于其病灶局部血管的新生以提供营养，这个过程叫做血管生成。近几年来对实体肿瘤血管形成的研究已取得较大进展。在肿瘤血管形成的调节方面，已发现许多血管形成的生长因子和抑制因子。因此，肿瘤的血管系统已成为一个有希望的、新的抗肿瘤治疗靶点
42、。人们已致力于开发和研究能破坏或抑制血管生成、有效地阻止肿瘤的生长和转移的药物，这类药物称为肿瘤血管生成抑制剂，如血管生长抑制因子(angiostatin，AS)。CD34 是内皮细胞标记物之一，参与血管生成，可作为 MVD定量的指标，而且具有较高的特异性和敏感性，是评估新生血管的金标准，并与肿瘤转移有关。本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达以及采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系，以探讨 AS 和 CD34 与胆管癌发生、发展及预后的相关性。 材料和方法: 1实验对象：收集中国医科大学附属第二医院外科 1999-2006 年外科手术
43、治疗的胆管癌组织标本 45 例，病理证实均为胆管癌。其中男 18 例，女 27 例，年龄18-76 岁。根据 WHO 病理分类标准为高、中分化腺癌者 31 例，低分化腺癌 14例。肿瘤部位：胆总管中下段 27 例、肝门部 18 例。经肉眼或病理所见有浸润转移者 34 例，无转移者 11 例。所有患者术前均未接受化疗和放疗。另取良性胆管标本 11 例作为对照。 2实验方法：本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达。采用人 AS 原位杂交检测试剂盒进行检测。针对人 AS 的cDNA 探针序列如下：1:5-GCACT TGGCI、 GTTGG TTGTA TGGCA C：2：5-CGTCA
44、 GGATT GCGGCAGTAG TTTC AT；3：5-CTGCT CTTTG CTGTG GTACT、GGAAq、GAC 细胞浆染成棕黄色为阳性，结果用 Meta Morph Imaging System 软件处理，按图象灰度结果分为五个等级：无染色，灰度值不少于130，为阴性(一)；轻微染色，灰度值在 125130 之间，为弱阳性()；染色较浅，灰度值在 115125 之间，为阳性(+)；染色较深，灰度值在 105115 之间，为较强阳性(+)；染色深，灰度值不大于 105，为强阳性(+)。采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系。 结果: 1
45、AS 在不同胆管组织中的表达 在胆管癌组和良性组织中均可见 AS阳性染色，且表达主要定位于肿瘤细胞胞浆中，呈弥漫性或散在分布的棕黄色颗粒。AS 在胆管癌组织内的表达呈明显的异质性，大部分癌组织边缘区细胞染色强于中心区，部分癌组织坏死周边区可见强阳性染色出现，内皮细胞及血管壁可见均匀的 AS 阳性染色。良性组织 AS 阳性表达率 18.2(2/11)，胆管癌组织阳性表达率 60.0(27/45)，二者相比，差异有统计学意义(Xlt;#39;2gt;=6.19，Plt;0.05)(见表 1)。 2胆管癌组织中 AS 的表达与临床病理参数的关系 AS 的表达与性别、年龄、肿瘤部位及分化程度等无相关性
46、(Pgt;0.05)；而与肿瘤有无淋巴结转移有非常显著性相关(Plt;0.05)。 3MVD 在不同胆管组织中的表达 CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中。MVD 染色阳性细胞为血管内皮细胞染成棕黄色或褐色，肿瘤内血管分布呈现异质性，在肿瘤组织浸润前缘密度较高，而在硬化坏死区则较稀疏。11 例非肿瘤性胆管组织和 45 例胆管癌组织的 MVD 表达率分别为 26.805.14，31.784.41，差异具有显著意义(t=4.34，Plt;0.05)(见表 3)。 4MVD 在胆管癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系 MVD 在淋巴结转移组和无转移组分别为41.239.76，30.936.1
47、2，差异有显著意义(Plt;0.05)。 MVD 在肿瘤的高中分化与低分化的表达分别为 32.627.96 和 39.227.75，差异具有显著意义(Plt;0.01)。同时 MVD 的表达与肿瘤部位(胆总管下段为33.428.99、肝门部为 37.7910.15)也有显著性相关(Plt;0.01)。而与患者患病的年龄和性别无关(Pgt;0.05)。 结论: 1在国内首次进行胆管癌与血管抑素的相关性研究，本研究结果显示 AS 在胆管癌组织中呈高表达，而 AS 与年龄、性别及肿瘤的发生部位、分化程度无关，与有无淋巴结转移和肿瘤的有关； 2CD34 抗体特异表达于血管内皮细胞胞质中，且在胆管癌组织
48、中呈高表达，CD34 与年龄、性别无关，而与肿瘤的分化程度、发生部位以及有无淋巴结转移有关； 3本研究结果提示，AS 与 CD34 在胆管癌癌变中可能起协同作用。目的: 原发肿瘤的生长、生存及转移均依赖于其病灶局部血管的新生以提供营养，这个过程叫做血管生成。近几年来对实体肿瘤血管形成的研究已取得较大进展。在肿瘤血管形成的调节方面，已发现许多血管形成的生长因子和抑制因子。因此，肿瘤的血管系统已成为一个有希望的、新的抗肿瘤治疗靶点。人们已致力于开发和研究能破坏或抑制血管生成、有效地阻止肿瘤的生长和转移的药物，这类药物称为肿瘤血管生成抑制剂，如血管生长抑制因子(angiostatin，AS)。CD34 是内皮细胞标记物之一，参与血管生成，可作为 MVD定量的指标，而且具有较高的特异性和敏感性，是评估新生血管的金标准，并与肿瘤转移有关。本研究采用原位杂交法检测胆管癌组织中 AS 的表达以及采用免疫组化法检测 CD34 的 MVD 值，并分析其与胆管癌临床病理参数间的关系，以探讨 AS 和 CD34 与胆管癌发生、发展及预后的相关性。 材料和方法: 1实验对象：收集中国医科大学附属第二医院外科 1999-2006 年外科手术治疗的胆管癌组织标本 45 例，病理证实均为胆管癌。其中男 18 例，女 2
