1、 目 录 一 、 仪 器 的 添 加 和 连 接 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 1 . 1 仪 器 的 添 加 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 1 . 2 端 口 的 配 置 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 1 . 3 连 接 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4、 . . 3 二 、 测 定 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 三 、 光 谱 测 定 . . . . . . . . . . . . . . .
5、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 3 . 1 界 面 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 3 . 2 参 数 设 定 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
7、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 3 . 3 采 集 和 保 存 光 谱 数 据 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 3 . 4 结 果 处 理 . . . . . . . . . .
8、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 3 . 4 . 1 显 示 范 围 的 变 更 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 3 . 4 . 2 峰 谷 检 测 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7
10、 3 . 4 . 3 面 积 计 算 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7 3 . 4 . 4 选 点 检 测 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
11、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8 3 . 4 . 5 处 理 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
12、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9 3 . 5 打 印 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 0 3 . 6 图 象 面 板 上
13、 光 谱 的 删 除 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 1 四 、 光 度 测 定 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
14、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 1 4 . 1 界 面 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
15、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 1 4 . 2 参 数 设 定 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 2 4 . 3 制 作 工 作 曲
16、 线 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 3 4 . 4 测 定 样 品 浓 度 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
17、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 4 五 、 动 力 学 测 定 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
18、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 4 5 . 1 界 面 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 4 5 . 2 参 数 设 置
19、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 5 5 . 3 采 集 动 力 学 数 据 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
20、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 6 1 U V P r o b e 快 速 操 作 说 明 一 、 仪 器 的 添 加 和 连 接 1 . 1 仪 器 的 添 加 打 开 UVP r o b e 软 件 在 菜 单 栏 中 选 择“ 仪 器” 、“ 增 加” 后 弹 出 如 下 的“ 加 入 仪 器 向 导” 按 照“ 加 入 仪 器 向 导” 的 提 示 选 择 要 添 加 的 仪 器
21、 的 型 号 输 入 仪 器 名 2 输 入 项 目 、 序 列 号 点 击“ 完 成” 仪 器 添 加 后 仪 器 条 上 显 示 仪 器 名 “ 视 图” 下 勾 选“ 仪 器 条” 可 见 。 1 . 2 端 口 的 配 置 在 菜 单 栏 中 选 择“ 仪 器” 、“ 配 置” 为 仪 器 指 定 连 接 的 通 讯 口 若 串 口 在 计 算 机 主 板上 可 以 尝 试 COM1 或 COM2 若 串 口 由 US B 转 化 则 尝 试 COM3 或 COM4 。 3 1 . 3 连 接 在“ 光 谱” “ 光 度” 或“ 动 力 学” 测 定 方 式 下 点 击“ 连 接” 键
22、 仪 器 与 P C 连 接 并 出 现 下 示的 初 始 画 面 仪 器 型 号 不 同 初 始 化 的 项 目 会 有 增 减 初 始 化 大 约 需 要 5 分 钟 左 右 进 行 一 系 列 的 检 查 和 初 置 如 一 切 顺 利 通 过 就 可 以 开 始 测定 。 4 二 、 测 定 首 先 选 择 测 定 的 方 式 在 标 准 工 具 条 上 能 发 现 如 右 图 所 示 的 各 键 自左 至 右 分 别 为 1 报 告 生 成 器 用 于 制 作 各 种 格 式 的 报 告 。 2 动 力 学 测 定 一 般 测 定 吸 收 值 随 时 间 的 变 化 通 常 用 于
23、酶 反 应 随 时 间 的 变 化 。 3 光 度 测 定 定 量 可 进 行 多 波 长 、 单 波 长 、 峰 高 或 峰 面 积 定 量 。 校 准 曲 线 可 使用 多 点 、 单 点 、K 因 子 等 方 法 。 由 于 具 有 自 定 义 方 程 的 功 能 以 前 DN A/ 蛋 白 质 测 定 等 需要 特 殊 选 购 的 软 件 才 能 进 行 的 工 作 使 用 UVP ROBE 可 自 编 程 序 进 行 测 定 。 4 光 谱 测 定 可 进 行 紫 外 可 见 区 的 光 谱 测 定 。 三 、 光 谱 测 定 3 . 1 界 面 光 谱 测 定 界 面 如 图 所
24、示 点 击 光 谱 工 具 条 上 的 键 可 分 别 开 关 图 象 面 板 左键 、 数 据 处 理 面 板 中 键 以 及 方 法 面 板 右 键 。 数据处理面板 方法面板 图像面板 5 3 . 2 参 数 设 定 点 击 光 谱 工 具 栏 上 的 即 可 出 现 如 下 图 所 示 的 设 定 测 定 条 件 的 画 面 在“ 测 定” 选 项 卡 中 可 选 择 测 定 的“ 波 长 范 围” 、“ 扫 描 速 度” 、“ 采 样 间 隔” 等 条 件 。 点 击 图 中“ 试 样 准 备” 选 项 卡 可 输 入“ 重 量” 、“ 体 积” 、“ 稀 释 因 子” 、“ 光 程
25、 长” 等 信 息 。 点 击 图 中“ 仪 器 参 数” 选 项 卡 可 选 择“ 测 定 方 式” 吸 收 值 、 透 射 率 、 能 量 、 反 射 率 以 及“ 狭 逢 宽” 等 条 件 。 但 是 UV- 1 6 0 0 / 1 7 0 0 的 狭 缝 宽 分 别 固 定 为 2 n m/ l n m 不 可 选 择 。 如 果 使 用 多 联 池 或 注 射 式 抽 吸 装 置 等 附 件 时 可 点 击“ 附 件” 选 项 卡 在 此 设 置 各 附件 相 关 的 参 数 条 件 。 3 . 3 采 集 和 保 存 光 谱 数 据 用 如 图 所 示 的 光 度 计 按键 操 作
26、 首 先 点 击“ 基 线” 进 行 基 线 校 正 然 后 点 击“ 到 波 长” 将 波 长 设 置 到 5 0 0 n m 再 点击“ 自 动 调 零” 。 为 何 要 如 此 做 原 因 非 常 简 单 由 于 一 般 的 分 光 光 度 计 的 能 量 在 5 0 0 n m左 右 最 强 在 此 自 动 调 零 可 得 到 最 正 确 的 基 线 。 通 常 上 述 操 作 在 开 机 后 进 行 一 次 就 足 够了 上 面 的 基 线 和 零 点 是 仪 器 本 身 的, 为 了 消 除 池 差 通 常 在 样 品 侧 和 参 比 侧 都 方 上 参 比 溶6 液 进 行 基
27、线 校 正 和 自 动 调 零 。 此 后 放 置 样 品 并 点 击“ 开 始” 键 即 可 测 定 。 扫 描 完 毕 输 入 保 存 的 路 径 以 及 文 件 名 点 击 确 定 保 存 文 件 。 3 . 4 结 果 处 理 3 . 4 . 1 显 示 范 围 的 变 更 变 更 范 围 十 分 简 单 只 需 在 点 击 图 象 上 最 大 和 最 小 的 位 置 然 后 输 入 适 当 的 数 字 即可 。 这 表 示 可 以 随 意 地 放 大 和 缩 小 图 象 的 标 尺 。 此 外 在 图 象 上 点 击 鼠 标 右 键 在 出 现 的 快 捷 菜 单 上 选 择 自 动
28、 标 尺 也 能 使 标 尺 设 置到 适 当 的 大 小 。 点击需要变更的位置然后输入需要的数值就可改变范围 改为1 改为550 7 3 . 4 . 2 峰 谷 检 测 点 击 菜 单 栏 上 的“ 操 作” 、“ 峰 值 检 测” 出 现 如 下 画 面 。 此 处 的 数 据 处 理 面 板 中 出 现 峰 谷 的 列 表 需 要 说 明 的 是 该 结 果 使 用 了 上 一 次 设 置 的 检 测条 件 当 然 用 户 还 可 根 据 自 己 的 需 要 加 以 改 变 。 如 果 图 中 有 多 条 光 谱 的 话 这 些 光 谱 的峰 谷 表 都 将 出 现 在 数 据 处 理
29、 的 面 板 中 点 击 表 格 下 的 标 签 即 可 切 换 。 若 需 改 变 峰 谷 的 检 测 条 件 可 在 在 数 据 处 理 面 板 上 点 击 鼠 标 右 键 在 出 现 的 菜 单 中点 击“ 属 性” 在 弹 出 的 属 性 对 话 框 中 设 置“ 阈 值” 属 性 对 话 框 如 下 图 所 示 。 3 . 4 . 3 面 积 计 算 如 果 要 计 算 光 谱 的 面 积 请 在 菜 单 栏 中 选 择“ 操 作” 、“ 峰 面 积” 。 8 上图是读数条左右移动决定光谱面积计算的范围是计算结果的显示。 如 果 计 算 面 积 的 区 域 想 删 除 可 在 欲 删
30、 除 的 区 域 中 点 击 鼠 标 右 键 从 出 现 的 菜 单 中选 择 删 除 。 此 外 上 图 中 面 积 计 算 到 了 基 线 如 果 希 望 改 变 从 菜 单 上 选 择 属 性 改 变“ 基 线 到 零” 的 选 择 框 图 象 和 数 据 处 理 面 板 上 的 结 果 都 将 改 变 。 3 . 4 . 4 选 点 检 测 菜 单 栏 中 选 择“ 操 作” 、“ 选 点 检 测” 。 选 点 检 测 可 以 从 已 经 得 到 的 光 谱 中 选 取 任 意 多个 点 的 数 据 选 择 时 只 要 拖 动 读 数 条 或 在 下 图 的 波 长 列 中 手 动 键
31、 入 波 长 值 即 可 。 9 3 . 4 . 5 处 理 测 定 得 到 的 光 谱 可 进 行 各 种 计 算 。 从 主 菜 单 上 选 择“ 操 作” 、“ 处 理” 即 可 如 果 打 开 了 多 张 光 谱 需 先 选 择 需 要 处 理 的 光 谱 数 据 集 然 后 选 择 运 算 的 算 符 及常 数 最 后 点 击 计 算 键 。 10 输 入 保 存 结 果 的 数 据 集 名 点 击 确 定 键 新 的 经 过 计 算 的 光 谱 数 据 集 将 重 叠 显示 在 图 象 面 板 中 。 3 . 5 打 印 进 入 菜 单 栏 “ 视 图 ”、“ 设 置 ” 在 弹
32、出 的 “ 设 定 ” 对 话 框 中 选 择 “ 快 速 打 印 ” 选 项 卡 为 各 打 印 项 目 注 册 模 板 后 点 击 确 定 退 出 对 话 框 。 在 界 面 中 激 活 要 打 印 的 项 目 鼠 标 左 键 单 击 选 择 菜 单 栏 “ 文 件 ”、“ 打 印 ” 即 可 。 11 3 . 6 图 象 面 板 上 光 谱 的 删 除 欲 删 除 图 象 面 板 中 的 光 谱 先 在 菜 单 栏 上 选 择“ 文 件” 、“ 属 性” 。 得 到 下 图 选 择 要删 除 的 光 谱 点 击“ 删 除” 。 四 、 光 度 测 定 4 . 1 界 面 光 度 测 定
33、界 面 如 图 所 示 在 光 度 测 定 工 具 条 上 有 右 列 各 键 点 击以 后 分 别 出 现 标 准 表 最 左 、 样 品 表 左 二 、 工 作 曲 线 图 右 2 和 样 品 图 最 右 。12 4 . 2 参 数 设 定 点 击 菜 单 栏 中 的 键 出 现 下 图 此 处 显 示 的 波 长 类 型 是“ 点” 表 示 测 定 高 度 如 果 选 择 的 是 范 围 则 需 输 入 起 始 和 结束 波 长 并 可 选 择 最 大 、 最 小 、 峰 、 谷 或 面 积 等 作 为 定 量 的 依 据 。 无 论 如 何 选 择 波 长 都 是 必 须 的 并 要
34、加 入 以 后 才 有 效 多 波 长 定 量 需 要 加 入 对 应的 多 个 波 长 。 测定的方式 选择测定波长的列名 选择和登录波长 登录后的波长显示区 标准表 样品表 工作曲线 样品图 13 4 . 3 制 作 工 作 曲 线 首 先 如 前 所 述 选 择 了 点 及 波 长 然 后 在 方 法 中 选 择 校 准 在 此 决 定 用 工 作 曲 线 法定 量 并 选 择 多 点 单 点 等 。 进 行 定 量 测 定 也 需 要 基 线 校 正 和 自 动 调 零 方 法 如 前 面 所 述 。 此 后 样 品 室 内 逐 个 放 入 标 准 输 入 名 称 、 浓 度 点 击
35、光 度 计 按 键 的“ 开 始” 键 即 可 。标 准 测 定 完 毕 工 作 曲 线 自 动 显 示 。 在 工 作 曲 线 图 象 上 点 击 鼠 标 右 键 选 择 属 性 可 从 该 图 象 上 得 到 许 多 有 用 的 信 息 见 下 图 只 需 在 这 些 显 示 的 项 目 中 做 标 记 相 应 的 信 息 即 出 现 在 工 作 曲 线 图 象 的 左 下 方 。 见 下 图的 划 圈 部 分 14 4 . 4 测 定 样 品 浓 度 样 品 室 内 逐 个 放 入 样 品 输 入 名 称 点 击 光 度 计 按 键 的“ 开 始” 键 即 可 注 意 无 论 是标 准
36、还 是 未 知 样 品 的 测 定 都 必 须 事 先 命 名 I D 否 则 不 能 采 集 数 据 。 五 、 动 力 学 测 定 5 . 1 界 面 动 力 学 测 定 界 面 如 图 所 示 在 动 力 学 测 定 工 具 条 上 有 键 自 左 到 右 分别 是 时 间 扫 描 图 象 、 数 据 处 理 面 板 、 测 定 参 数 面 板 和 酶 活 度 图 象 。 15 5 . 2 参 数 设 置 在 菜 单 栏 中 点 击 方 法 键 得 到 如 下 图 象 数据处理面板 测定参数面板 时间扫描图像爱内阁 酶活度图像 16 此 处 的 计 时 方 式 选 择 的 是“ 自 动”
37、 时 间 总 量 中 需 手 动 设 置 测 定 的 时 间 。 由 于 是 自 动计 时 方 式 所 以 采 样 步 长 图 中 为 时 间 周 期 和 读 数 次 数 将 根 据 时 间 总 量 自 动 设 置 。 此外 可 设 置 波 长 以 及 活 度 计 算 的 开 始 和 结 束 时 间 。 设 置 太 短 的 活 度 范 围 会 出 现 错 误 信 息 。相 反 如 果 计 时 方 式 选 择 的 是 手 动 的 话 则 可 输 入 时 间 周 期 和 读 取 次 数 而 时 间 总 量 测定 时 间 会 根 据 输 入 的 时 间 周 期 和 读 取 次 数 自 动 计 算 得
38、 到 。 活 度 范 围 用 于 酶 反 应 随 时 间的 变 化 如 果 单 纯 进 行 时 间 扫 描 的 话 则 可 不 考 虑 活 度 范 围 。 测 定 的 波 长 栏 内 可 选 择 单 波 长 或 双 波 长 波 长 l - 波 长 2 或 波 长 l / 波 长 2 两 种 方 法 。选 择 后 输 入 相 应 的 波 长 。 5 . 3 采 集 动 力 学 数 据 在 测 定 前 放 入 空 白 溶 剂 执 行“ 自 动 调 零” 或“ 基 线 校 正” 。 单 波 长 测 定 执 行“ 自 动调 零” 其 他 场 合 执 行“ 基 线 校 正” 。 把 样 品 放 入 分 光 光 度 计 。 点 击“ 开 始” 键 开 始 测 定 。
