1、2010年版药典和 GMP对制药行业实验用水质的需求分析 与 Millipore综合解决方案默克密理博与市场专员朱文峰什么是实验室用水？W实验室纯水与 Merck Millipore膜过滤技术商业化应用的鼻祖1973年首台实验室标准水纯化系统 Milli-Q2007年第十代实验室水纯化系统 Integral平台平台遍布中国 享誉世界的国际品牌遍布中国 、 享誉世界的国际品牌2实验室纯水系统的缔造者和领导者、标准的制定者、纯化技术的革新先驱！为什么关注实验室用水？ 水中的五大污染物污水 /自然水体 自来水 2/3级纯水 1级超纯水 专业级超纯水水中污染物对各类实验产生的影响监控指标离子 直接影响
2、特定离子的检测遇高浓度有机试剂形成结垢 堵塞仪器管路和色谱柱 电阻率 (M.cm25 ) 离子(Na+/Ca2+/Fe3+/SO42-/Cl-) 遇高浓度有机试剂形成结垢 ， 重金属离子抑制 PCR聚合酶的活性；影响电泳速度；影响细胞及微生物正常生长 滴定反应、 pH值测定等实验 电导率（S/cm 25） 电导率 =1/电阻率有机物 （腐殖酸、核酸酶、三聚氰胺、 PCB） 影响细胞培养、 PCR、电泳、 TOC测定等实验； 导致液相色谱基线不稳定、鬼峰增加、灵敏度下降、色谱柱寿命缩短 总有机碳 TOC(ppb) Rnases(ng/ml) Dnases(pg/l) 细菌z 细菌本身影响生物学实
3、验和仪器分析实验，裂解释放热原 ,酶等多种物质z 形成菌膜堵塞色谱管路，色谱柱，持续释放各种污染物 细菌总数 (cfu / mL) 热源 (Eu / mL)颗粒和胶体（硅胶体、泥沙、灰尘、管路剥落） 阻塞过滤装置、色谱柱，在柱内形成涡流效应 具有光散射作用，降低 UV的杀菌作用 对仪器的蠕动泵造成表面磨损影响溶剂分配精确度，严重时可造成泵的物理损坏 颗粒 ( 0.2m) (units / mL)严重时可造成泵的物理损坏气体 （ CO2、 O2） 改变水体的 pH值 形成气泡产生光折射效应药典中的水 制药用水 饮用水饮用水 生活饮用水卫生标准 为药材净制时的漂洗、制药用具的粗洗用水。除另有规定外
4、，也可作为药材的提取溶剂药材的提取溶剂 纯化水 电导率（或 EP2 2 44的相关要求和规定根据 ， 或 . .44的相关要求和规定z清洁认证 (Cleaning Validation)替换 HPLC检测并证实生产过程中已经过清洁处理的设备或系统，其洁净程度可以满足下一批次生产的要求中国药典 中国药典 2010版对 TOC检查用水的要求 检查用水的用途：对照品溶液的配制 系统适应性试验 仪器的清洗 空白和清洁验证对照品溶液的配制 ， 系统适应性试验 ， 仪器的清洗 ,空白和清洁验证 检查用水水质要求：TOC 010mg/L即 100 ppb120.10 mg/L 即 ；电导率 1.0 S/cm
5、(25 ) 的高纯水1. 应当是独立纯化系统制备出的超纯水作为清洗 、 空白对比的 “ 总有机碳检查用水 ” 来源 ， 应当独 立 于被检测的注射作为清洗 、 空白对比的 总有机碳检查用水 来源 ， 应当独 于被检测的注射用水，这样才能有效避免注射用水中污染物的干扰，确保实验结果的准确性。2. 纯化设备自身应当配备符合国际标准规范的检测设备纯 化设备应当配备 全 面的水质 监 控装 置： TOC在线检测仪 、电 阻率检测仪 ， 能化设备应当配备 面的水质 控装 在线检测仪 阻率检测仪 能够实时监控水质状况，确保每次用水水质符合要求。3. 纯化系统符合 GMP 标准能够提供 整 机 的 认 证
6、服务 (3Q认 证 ),水质 及 系 统 使用维护情况 的记 录能够提供机认服务 认 水质 系 使用维护情况 录13常规试验（pH/TOC/浊度/凯式定氮/色值/旋光度）主 要对 比 参数Elix Advantage 5 二级水系统石英双 重 蒸馏水 器不锈钢蒸馏水器参数 蒸馏水使用成本每升纯水的电费每升纯水的水费（0.150度/小时0.5元/度）/ 5 升/小时0.015元/升5升0.0035元/升0.0175元/升（3.5度/小时0.5元/度）/1.5升/小时1.17元/升20升0.0035元/升=0.07元/升(4.5度/小时0.5元/度)/5升/小时0.55元/升14升0.0035元/
7、升=0.049元/升常温、通过 CEFCCcUL高温 定期强酸清洁 高温 专人看护防过总成本0.015+0.0175+0.75+0.34=1.1225元 /升1.17+0.07+0.3333=1.5733元 /升0.55+0.049+0.05=0.649元 /升核算设备成本（平均到每升水）年消耗品（75000元/10年）/10000升=0.75元/升3400元/10000升=0.34元/升（2000元/2年）/3000升=0.333元/升0（1000元/2年）/10000升=0.05元/升0安全性 认证、自动控制无需看护、故障自动报警、 、专人看护防过热、热操控性 面板控制、移动取水手柄、 预
8、热、水桶接水、冷却 预热、水桶接水、冷却纯水需求：二级高纯水（电阻率5 M.cm25；TOC0.22m的颗粒 400 b 6000 PSI)10 m,1970s更高的运行柱压 ar or 更快的检出速度带来更高得检出限（ ppb-亚 ppb-ppt）更小的色谱柱填料和孔径（ 2 m）5 m,1980s3 3.5 m,1990s2 5 2000. m,2 m,2003UHPLC水中有机污染物对反相色谱柱影响的原理反相色谱柱中的固定相表面固定相与流动相中的疏水有机污染物结合，有效结合位点被污染物占据待分析物与固定相的结合受到制约Presentation title in footer | 00 M
9、onth 0000待分析物与固定相的结合受到制约流动相水质对色谱柱柱效和柱寿命的影响使用 DNA分离柱分析不同长度的寡核苷酸，以 瓶装水作为流动相，相同条件下进样 1950次后，柱效明显下降：分离度降低，峰形严重变差。使用 分离柱分析不同长度的寡核苷酸，以 Merck Millipore超纯水作为流动相，相同条件下进样 6400次后，柱效基本没有下降，分离度和峰形保持不变。2.53544.5第 1950次进样第 640021.522.533.5第 1 次进样354.51.5sity(mV)mV)-0.500.510 2 4 6 8 1012141618202.53.5ty (mV)mV)051
10、Intenstensity (m1.5Intensitntensity (m00.5Int0.5InPresentation title in footer | 00 Month 00000 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20Retention Time (min)Retention time (min)使用瓶装水-0.5101214161820Retention Time (min)Retention time (min)使用 Merck Millipore超纯水常用实验室用水分析Water Source 双蒸水 去离子水 饮用瓶 /桶装水 ASTM一级水 Merck Mil
11、lipore超纯水TOC (ppb) 50100 几百 50100 50 5电阻率（ M.cm） 1 18.2 0.5 18.2 18.2ESI + from 200 to 600 m/zMerck Millipore超纯水双蒸水 瓶装水 去离子水超纯水同时满足TOC5ppb 30/70 methanol/water; pH 4.8Negative dip一般的纯化水 Milli -Q超纯水Higher TOC Water Lower TOC Water有机污染物的影响 基线漂移、鬼峰每小时采集一次基线的信号！Water: Ultrapure water, 18.2 M.cm, 3 ppb T
12、OCWater: 10 M.cm, approximately 200 ppb TOCMabic S., Regnault C., Krol J. The misunderstood laboratory solvent : reagent water for HPLC”. LCGC North America 2005, 23 (1), 74-82.流动相：LCMS级瓶装水vs Milli-Q超纯水与 LCMS级瓶装水相比，采用 Milli-Q超纯水作为流动相可以获得更高的灵敏度，更低的背景噪声，有效提升质A LCMS级瓶装水 B Milli-Q超纯水谱的性能。(A) 利血平 (MW 608
13、), ESI+ (B) 咖啡因 (MW 194), ESI+ 214nm下对混合药物样品的多次进样结果对比一1 1acetaminophen2 acetazolamide3 phenobarbital4 carbamazepine5 phenytoin6 secobarbita7 - nabumetone结论？LC-PAK给你更专业的选择1980s仪器灵敏度1990s2000s2010sMilli-QLC-PakTimeLC-Pak能给你什么？ 在进水为 TOC5ppb超纯水的在进水为 超纯水的条件下，确保生产不低于500L TOC1ppb的超纯水 的超纯水 经验证确保有效去除水中的痕量有机物 ， 并适于 HPLC量有机物 ， 并适于 , UPLC & LC-MS使用C18 反相硅胶微生物实验室
