1、Waters 2695 分离单元 操作员指南 34 Maple Street Milford, MA 01757 715022695MD，版本 B声明 本文档中的信息如有更改，恕不另行通知，且这些信息并不作为 Waters Corporation 的承诺。 Waters Corporation 对本文档中可能出现的任何错误不负任何责任。本文档在出版时被认为是 完整和准确的。任何情况下，对与使用本文档有关或因使用本文档而导致的偶发或继发的 损害， Waters Corporation 不负任何责任。 20012006 WATERS CORPORATION。于美国印刷。保留所有权利。未经出版商的书
2、面 允许，不得以任何形式转载本文档或其中的任何部分。 Alliance、 Millennium、 PIC 和 Waters 是注册商标， LAC/E、 PerformancePLUS、 SAT/IN、 SCC 和 Synchronized Composition Control 是 Waters Corporation 的商标。 Micromass 是注册商标， MassLynx 和 MassLynx NT 是 Micromass Ltd. 的商标。 所有其它商标或注册商标均为其各自所有者的专有资产。注意： 使用本仪器时，请遵守质量 控制和方法开发的通用步骤。 如果发现某种化合物的稳定性有变化
3、、两种化合物间的溶解性状有变化或峰形状有变化， 请立即查明变化原因。变化原因查明之前，请不要相信分离结果。 注意： 本仪器的安装类别 （超电压类别）为 II 级。 II 级类别适用于使用本地电压水平的 （如墙壁电源插座）的设备。 注意： 用户若未经有关法规认证部门明确允许便对本设备进行改变或改装，将失去合法使 用该设备的权利。 注意： 处理承压聚合物管路时应该谨慎： 处于承压聚合物管路附近时，一定要戴防护眼镜。 熄灭附近所有明火。 请勿使用严重挤压或扭曲的 Tefzel 管线。 不要在 Tefzel 管线中使用四氢呋喃 (THF) 、浓硝酸或浓硫酸。 使用二氯甲烷及二甲基亚枫会导致 Tefze
4、l 管线膨胀，大大降低管线的耐压能力。 注意： 用 户应 当清 楚， 如果 以制 造商 未指定 的方 式使 用设 备， 可能 有损 设备 所提 供的 保护 。 注意： 为防止发生火灾，更换保险丝时应使用相同类型和额定值的保险丝。 注意： 为避免可能的电击，请在维修该仪器前断开电源线。常用符号 直流电 交流电 保护性导线端子 框架或底盘接线端 注意或参阅手册 注意，表面过热或温度过高 注意，有电击的危险 （高电压） 注意，有被针刺伤的危险 注意，紫外线光 保险丝 电源打开 电源关闭 UV2695 分离单元信息 设计用途 “Waters 2695 分离单元”可应用于体外诊断性测试，以分析多种化合物
5、，包括诊断指示剂 和疗效监测化合物。开发方法时，请遵照 American Journal of Medical Technology（美国医 疗科技期刊） (1978) 44 卷第 1 期 30 - 37 页上的“Protocol for the Adoption of Analytical Methods in the Clinical Chemistry Laboratory” 。此协议包含实现系统性能和方法性能所需的 完善的操作步骤和方法。 生物危害性 分析生理性液体时，请采取一切必要的预防措施，把所有的标本都当成潜在的传染源来对 待。相关预防措施请参阅 CDC - NIH Manual
6、 （CDC - NIH 手册） (1984) 上的“CDC Guidelines on Specimen Handling” 。 校正 按照适用的纯标准样校正方法对方法进行校正。生成标准曲线时至少应使用 5 个标准样。 浓度范围应覆盖质量控制样本、典型标本和非典型标本的全部范围。 质量控制 常规运行三个质量控制样本。质量控制样本应代表正常水平以下、正常水平和正常水平以 上的化合物。确保质量控制样本的结果在允许范围内，并在每天、每次测试时都评估其精 确度。质量控制样本的结果超出范围时搜集的数据可能无效。确信色谱系统的性能合格前， 请勿报告此类数据。目录 vii 前言 xxiii 第 1 章 Wa
7、ters 2695 分离单元介绍 1 1.1 分离单元概述 2 1.2 溶剂管理系统概述 4 1.3 样品管理系统概述 6 1.4 操作配置 10 1.4.1 系统控制器模式 . 10 1.4.2 无交互模式 12 1.4.3 远程控制模式 12 1.5 选件和附件 14 第 2 章 安装 2695 分离单元 . 19 2.1 安装概述 19 2.2 场地要求 20 2.3 固件和软件要求 22 2.4 拆除包装 23 2.5 进行电源连接 23 2.5.1 进行电源连接 23 2.6 进行流路连接 25 2.6.1 安装检测器滴盘 . 27 2.6.2 安装溶剂供给管路 27 2.6.3 进
8、行喷射气体连接 28 2.6.4 安装脱气器排放管路 30 2.6.5 进行废液管连接 30 2.6.6 安装针头清洗和柱塞密封清洗容器 31 2.6.7 连接色谱柱 32 2.6.8 连接色谱柱选择阀 33 目录viii 目录 2.6.9 连接检测器 37 2.7 信号连接 38 2.7.1 I/O 信号连接. 39 2.7.2 数字信号连接 42 2.8 添加硬件选件 44 2.8.1 安装可选的样品定量环 . 44 2.8.2 安装色谱柱加热器 47 2.8.3 安装注射器 47 第 3 章 2695 分离单元的操作前准备 . 49 3.1 操作概述 51 3.1.1 屏幕显示概述 .
9、51 3.1.2 使用小键盘 53 3.2 配置分离单元 57 3.2.1 设置配置参数 . 58 3.2.2 配置工作模式 67 3.3 准备溶剂管理系统 73 3.3.1 准备溶剂容器 . 74 3.3.2 脱气溶剂 74 3.3.3 灌注柱塞密封清洗泵 75 3.3.4 灌注溶剂管理系统 77 3.4 准备样品管理系统 77 3.4.1 清除样品管理系统 . 78 3.4.2 灌注针头清洗泵 78 3.4.3 调整密封包 80 3.4.4 加载样品转盘 80 3.5 准备操作的建议步骤 82 3.5.1 AutoStartPLUS 启动过程. 88 3.6 关闭分离单元 102目录 ix
10、 第 4 章 前面板控制 103 4.1 日常启动 103 4.2 加载样品瓶 104 4.3 监视 HPLC 系统 106 4.4 执行导引功能. 110 4.4.1 执行干灌注 112 4.4.2 执行湿灌注 . 114 4.4.3 清除 2410 和 410 参比流动池 . 117 4.4.4 设定喷射循环 . 118 4.4.5 平衡系统 . 119 4.4.6 调整色谱柱 120 4.4.7 样品进样 121 第 5 章 实现自动运行 123 5.1 在独立工作模式下实现自动运行 124 5.1.1 运行样品组 . 125 5.1.2 查看样品组 127 5.1.3 从样品模板实现运
11、行 129 5.1.4 运行期间修改样品组 130 5.1.5 停止运行 131 5.2 在 Millennium 控制下实现自动运行. 132 5.3 在 Micromass MassLynx 控制下实现自动运行 133 第 6 章 创建方法、样品组和样品模板 . 135 6.1 创建和编辑分离方法 136 6.1.1 创建分离方法 . 138 6.1.2 编辑分离方法 139 6.1.3 复制和编辑分离方法 139 6.1.4 锁定和解锁分离方法 140 6.2 设置分离方法参数 140x 目录 6.2.1 设置流动相屏幕参数值 . 141 6.2.2 设置样品参数值 146 6.2.3
12、设置自动进样器参数值 148 6.2.4 设置色谱柱参数值 149 6.2.5 设置 I/O 参数值 . 151 6.2.6 设置检测器参数 154 6.3 创建和编辑样品组 162 6.3.1 功能 . 163 6.3.2 链接样品组中的行 166 6.4 创建样品模板 167 6.5 使用磁盘驱动器 168 第 7 章 维护 . 171 7.1 维护注意事项 171 7.2 维护溶剂管理系统 174 7.2.1 概述 174 7.2.2 移除泵头、密封清洗装置及柱塞 . 176 7.2.3 更换柱塞密封 . 177 7.2.4 更换密封清洗装置密封 180 7.2.5 清洗和更换柱塞 .
13、182 7.2.6 更换入口止回阀阀芯 183 7.2.7 更换在线过滤器 . 185 7.3 维护样品管理系统 187 7.3.1 概述 . 187 7.3.2 更换下部针头清洗玻璃料 189 7.3.3 更换注射器 191 7.3.4 更换针头及密封包 195 7.3.5 清洗样品室 200 7.4 使用软盘驱动器更新软件版本 202目录 xi 第 8 章 诊断和故障排除 . 203 8.1 安全和处理 204 8.2 使用错误日志 . 204 8.3 执行主要诊断 206 8.3.1 灌注柱塞密封清洗泵 207 8.3.2 执行压缩检查 . 208 8.3.3 灌注针头清洗泵 . 210
14、 8.3.4 调整密封 . 211 8.3.5 服务实用程序诊断 . 213 8.4 执行其它诊断 214 8.4.1 执行电机和阀的诊断 216 8.4.2 执行传感器诊断 . 218 8.4.3 执行静态渗漏测试 . 219 8.4.4 执行阀渗漏测试 222 8.4.5 执行泵头移除和替换实用程序 . 224 8.4.6 执行输入和输出诊断 . 225 8.4.7 执行小键盘诊断 . 226 8.4.8 执行显示器诊断 226 8.4.9 执行样品转盘测试 . 227 8.4.10 执行在线脱气器测试 . 228 8.4.11 执行样品加热器 / 冷却器测试 229 8.4.12 执行样
15、品加热器 / 冷却器除霜过程 230 8.4.13 执行色谱柱加热器测试 . 231 8.4.14 重建进样阀 . 233 8.4.15 关闭梯度比例阀 (GPV) 234 8.4.16 创建 GPV 测试方法 234 8.4.17 查看固件校验和 235 8.5 故障排除 236 8.5.1 常规故障排除提示 . 236 8.5.2 排除色谱柱故障 . 238 8.5.3 排除硬件问题故障 . 242xii 目录 附录 A 规格 . 247 附录 B 备用零件 253 B.1 溶剂管理系统备用零件 . 253 B.2 样品管理系统备用零件 . 254 B.3 分离单元备用零件 . 256 B
16、.4 样品瓶和小容量插入物 . 256 附录 C 溶剂注意事项 259 C.1 简介 259 C.2 溶剂兼容性 260 C.3 溶剂混溶性 262 C.4 缓冲溶剂 . 265 C.5 头高度 265 C.6 溶剂粘度 . 265 C.7 流动相溶剂脱气 . 265 C.8 波长选择 . 268 索引 . 271图形清单 xiii 1-1 Waters 2695 XE 分离单元 （正视图） 1 1-2 溶剂管理系统中的流路 4 1-3 样品管理系统中的流路 7 1-4 注射器装置 9 1-5 HPLC 系统的数字信号控制 . 11 1-6 HPLC 系统的 I/O 信号控制 . 12 1-7
17、 Millennium 色谱管理器控制下的 典型 2695 分离单元 HPLC 系统 . 13 1-8 安装有 3 个色谱柱选择阀的 2695 色谱柱加热器 17 2-1 分离单元的安装步骤 19 2-2 典型系统尺寸 21 2-3 2695 分离单元的后面板. 24 2-4 进行流路连接的步骤 25 2-5 分离单元中的流路连接 26 2-6 将喷射管安装到溶剂容器中 29 2-7 用于流路连接的框架开口的侧视图 （已取下侧面板） 33 2-8 三个色谱柱选择阀配置 （出厂配置） 34 2-9 六个色谱柱选择阀连接 （示例） 36 2-10 色谱柱再生阀连接 （示例） 37 2-11 信号连
18、接步骤 38 2-12 I/O 信号连接器 . 39 2-13 断开样品定量环的连接 46 3-1 诊断测试结果屏幕 49 3-2 主屏幕 50 3-3 字母型屏幕键 55 3-4 输入字母型数据的步骤 56 3-5 配置屏幕 57 3-6 自动关闭对话框 60 3-7 事件输入对话框 61 3-8 报告选项对话框 62 图形清单xiv 图形清单 3-9 样品报告 64 3-10 压缩检查对话框 66 3-11 配置工作模式 67 3-12 准备溶剂管理系统以供操作 73 3-13 状态屏幕 75 3-14 诊断屏幕 76 3-15 准备样品管理系统以供操作 77 3-16 门已打开对话框 8
19、1 3-17 准备新或干 “分离单元” 以供操作 （基于喷射的设备） 82 3-18 准备新或干 “分离单元”以供操作 （基于 PerformancePLUS 脱气器的设备） . 83 3-19 准备空闲或已关闭的 “分离单元”以供操作 （基于喷射的设备） 84 3-20 准备空闲或已关闭的 “分离单元”以供操作 （基于 PerformancePLUS 脱气器的设备） . 85 3-21 由缓冲溶剂改为有机溶剂 （基于喷射的设备） 86 3-22 由缓冲溶剂改为有机溶剂 （基于 PerformancePLUS 脱气器的设备） . 87 3-23 AutoStartPLUS 主屏幕 . 88 3
20、-24 已选择 AutoStartPLUS 的方法屏幕 89 3-25 AutoStartPLUS 与常规启动程序的关系 . 91 3-26 样品组 AutoStartPLUS . 94 3-27 分离方法自动 APLUS 94 3-28 分离方法 Auto BPLUS . 95 3-29 分离方法 Auto CPLUS . 96 3-30 分离方法 Auto DPLUS. 97 3-31 分离方法 Auto Eq DegasPLUS 98 3-32 分离方法 Auto A:B GradPLUS 99 3-33 分离方法 Auto Eq ColumnPLUS . 100 3-34 分离方法 A
21、uto Purge LoopPLUS . 101 4-1 主屏幕 103 4-2 门已打开对话框 104 4-3 状态屏幕的第一个页面 106 4-4 状态屏幕的第二个页面 106图形清单 xv 4-5 样品组队列 107 4-6 设置导引控制运行的步骤. 110 4-7 导引功能菜单. 111 4-8 使用注射器的灌注 / 排放阀 . 112 4-9 干灌注对话框. 113 4-10 湿灌注对话框. 114 4-11 清除进样器对话框. 116 4-12 清除 410 参比对话框. 117 4-13 已设定喷射对话框. 118 4-14 平衡对话框. 119 4-15 调整色谱柱对话框 12
22、0 4-16 样品进样对话框 121 5-1 主屏幕 123 5-2 在独立工作模式下实现自动运行 124 5-3 运行样品屏幕 125 5-4 运行样品屏幕 功能视图 126 5-5 显示所需溶剂对话框的运行样品屏幕 127 5-6 样品组屏幕 进样视图 128 5-7 样品组屏幕 加载视图 128 5-8 安装对话框 129 6-1 创建或编辑分离方法的步骤 137 6-2 方法屏幕 138 6-3 流动相屏幕 141 6-4 梯度屏幕 144 6-5 样品屏幕 146 6-6 自动进样器屏幕 148 6-7 色谱柱屏幕 149 6-8 I/O 屏幕 . 151 6-9 I/O 事件表 .
23、 153 6-10 检测器屏幕 155 6-11 检测器选择示例 155 6-12 2487(1) UV/Vis 检测器屏幕. 157 6-13 486(1) UV/Vis 检测器屏幕. 158 6-14 410 RI 检测器屏幕 159xvi 图形清单 6-15 检测器事件屏幕 160 6-16 样品组屏幕 162 6-17 自动取标准样对话框 165 6-18 自动添加对话框 166 6-19 样品组中的链接行 167 6-20 方法屏幕 168 6-21 导出方法屏幕 169 6-22 导入方法屏幕 170 7-1 溶剂管理系统组件 175 7-2 溶剂管理系统活塞室组件 （分解视图）
24、176 7-3 柱塞和正面密封方向 178 7-4 密封清洗装置密封 181 7-5 柱塞、密封清洗和泵头 182 7-6 入口止回阀 184 7-7 更换在线过滤器 186 7-8 样品管理系统组件 （正视图） 187 7-9 样品管理系统组件 （右视图） 188 7-10 定位下部玻璃料止动器 190 7-11 注射器装置组件 191 7-12 安装注射器 193 7-13 移除进样器 196 7-14 移除密封包 197 7-15 更换针头 198 7-16 对齐针口 199 7-17 访问样品室 200 7-18 样品室组件 201 8-1 错误日志屏幕 205 8-2 打印错误日志
25、205 8-3 诊断屏幕 206 8-4 密封清洗灌注屏幕 208 8-5 压缩检查屏幕 209 8-6 灌注针头清洗对话框. 211 8-7 调整密封屏幕 212 8-8 其它诊断屏幕 214图形清单 xvii 8-9 电机和阀诊断屏幕 216 8-10 传感器诊断屏幕 218 8-11 静态渗漏测试屏幕 220 8-12 静态渗漏测试结果屏幕 221 8-13 阀渗漏测试屏幕 223 8-14 泵头移除和替换屏幕 224 8-15 I/O 诊断屏幕 . 225 8-16 小键盘诊断屏幕 226 8-17 样品转盘测试屏幕 227 8-18 脱气器诊断屏幕 228 8-19 样品加热器 /
26、冷却器测试屏幕 229 8-20 样品加热器 / 冷却器除霜屏幕 231 8-21 色谱柱加热器诊断屏幕 232 8-22 重建进样阀 233 8-23 关闭 GPV 实用程序 234 8-24 GPV 测试分离方法. 235 8-25 显示固件校验和 235xviii 图形清单表格清单 xix 1-1 可选的单次输送体积. 6 1-2 绝对压力传感器属性. 15 1-3 色谱柱选择阀选件. 16 2-1 安装场地要求. 20 2-2 最低检测器固件要求. 22 2-3 最低外部管理系统软件要求. 22 2-4 溶剂供给管路标识. 27 2-5 喷射气体管标识. 28 2-6 氦气喷射气体的可
27、接受杂质限制. 28 2-7 针头清洗和柱塞密封清洗管颜色代码. 31 2-8 I/O 信号 40 2-9 图形输出信号条件. 41 2-10 事件开关位置和功能. 41 2-11 配置屏幕中显示的 RS-232 输出参数 42 3-1 主屏幕中的屏幕键. 52 3-2 小键盘功能. 53 3-3 配置屏幕上的屏幕键. 59 3-4 压缩检查参数. 67 3-5 推荐使用的针头清洗溶剂. 79 3-6 样品转盘代码和颜色. 80 3-7 AutoStartPLUS 运行时间 89 3-8 参数值. 93 4-1 状态屏幕参数. 107 4-2 导引功能 111 5-1 运行样品屏幕中的图标.
28、126 6-1 分离方法参数屏幕. 140 6-2 流动相屏幕参数. 141 6-3 警报响应. 144 6-4 梯度表参数. 145 6-5 样品参数. 147 6-6 自动进样器参数. 148 6-7 色谱柱参数. 149 表格清单xx 表格清单 6-8 I/O 参数 152 6-9 I/O 事件表参数 153 6-10 操作参数. 154 6-11 检测器选择. 156 6-12 2487 UV/Vis 参数 . 157 6-13 486 UV/Vis 参数 158 6-14 2410 和 410 RI 参数. 159 6-15 2487 和 486 检测器事件参数 161 6-16 2
29、487 和 486 检测器操作 161 6-17 样品组表参数. 163 6-18 样品组功能. 163 7-1 2695 分离单元维护协议 172 7-2 2695 溶剂管理系统组件 175 7-3 2695 样品管理系统装置 / 组件 188 7-4 注射器大小 192 8-1 诊断屏幕键. 207 8-2 调整密封诊断的可接受范围. 213 8-3 其它诊断测试. 214 8-4 针头位置参数. 217 8-5 注射器位置参数 217 8-6 梯度比例阀 (GPV) 位置参数 218 8-7 传感器诊断参数. 219 8-8 连接 I/O 开关和输入 . 225 8-9 色谱故障排除 2
30、38 8-10 常规系统故障排除. 242 8-11 溶剂管理系统故障排除 243 8-12 样品管理系统故障排除 244 A-1 物理规格. 247 A-2 环境规格. 248 A-3 电气规格. 248 A-4 溶剂管理系统规格 2695 XE 配置 250 A-5 样品管理系统规格. 250 A-6 仪器控制和通信规格. 251 B-1 溶剂管理系统的推荐备用零件. 253表格清单 xxi B-2 样品管理系统的推荐备用零件. 254 B-3 分离单元的推荐备用零件. 256 B-4 分离单元样品瓶和小容量插入物. 256 C-1 与分离单元一起使用的水缓冲剂. 261 C-2 与 “分
31、离单元”一起使用的酸 261 C-3 与 “分离单元”一起使用的碱 262 C-4 与 “分离单元”一起使用的有机溶剂 262 C-5 溶剂混溶性. 263 C-6 常见色谱溶剂的 UV 截止波长. 268 C-7 不同流动相的波长截止值. 269 C-8 常见色谱溶剂的折射率. 269xxii 表格清单xxiii 前言 Waters 2695 分离单元操作员指南对“Waters 2695 分离单元”的拆除包装、安装、使用、 维护和故障排除进行了介绍。其附录中还介绍了规格、备件及溶剂注意事项。 本指南的使用对象为需要对“Waters 2695 分离单元”执行安装、操作、维护和 / 或故障排 除
32、操作的人员。 内容编排 本指南包含以下内容： 第 1 章介绍“Waters 2695 分离单元”的功能和选项。 第 2 章介绍如何拆除包装和安装“Waters 2695 分离单元”以及如何连接电源、流路和 信号。 第 3 章介绍如何打开“分离单元”电源、做好溶剂和样品管理系统的操作准备、执行 日常清理以及关闭“分离单元”电源。 第 4 章介绍如何从前面板控制“分离单元”。 第 5 章介绍如何在独立控制模式和远程控制模式下自动运行。 第 6 章介绍如何创建分离方法、样品组和样品模板。 第 7 章介绍日常维护过程。 第 8 章介绍“Waters 2695 分离单元”的故障排除过程。 附录 A 介绍
33、 “Waters 2695 分离单元”的规格。 附录 B 列出了推荐使用的备用零件和可选备用零件。 附录 C 提供了有关溶剂兼容性、混溶性、脱气和 UV 截止波长的信息。xxiv 相关文档 Waters Licenses, Warranties, and Support（Waters 许可、担保和支持） ：提供软件许 可和担保信息、介绍培训和扩展支持、解释 Waters 公司如何处理运输、损坏、索赔和退 货事宜。 Waters 2695 Separations Module Quick Start Guide （Waters 2695 分离单元快速入门指 南）：以简短、易读的形式介绍 “269
34、5 分离单元”的基本使用方法。 Waters 2695 Combined Media Documentation Set（Waters 2695 合并媒体文档集）： 在 CD-ROM 上提供了以下文档的 PDF 格式的电子文件：Waters 2695 分离单元操作员指 南、Wa t e r s 2695 Separations Module Quick Start Guide（Waters 2695 分离单元快速入门指 南）和 Waters 2695 PerformancePLUS Flow Chart Reference Sheet（Waters 2695 PerformancePLUS 流
35、程图参考表） 。 Web 上 的文档 可在“万维网”上找到相关产品信息及文档。网址为 http:/。 文档约定 本指南中可能会用到以下约定： 约定 用法 粗体 粗体代表用户操作，如：按键、菜单选项和命令。例如， “单击 Next（下一步）转到下一页。” 斜体 斜体表示由用户提供的信息，如：变量。它还表示强调和文档标题。 例如， “请使用文件的实际名称替换 file_name。” Courier 字体 Courier 字体表示源代码示例和系统输出。例如， “出现提示符 SVRMGR。 ” Courier Bold 字体 Courier Bold 字体表示源代码示例中由用户键入的字符或按下的按 键
36、。例如， “在 LSNRCTL 提示符下，输入 set password oracle 以访问 Oracle。” 按键 术语按键是指计算机键盘或小键盘上的按键。屏幕按键指仪器上屏 幕正下方的按键。例如， “2414 检测器上的屏幕按键 A/B 显示所选 通道。 ” 三个句点表示还有更多同类项可供选择。例如， “您可以在每个文件 夹中存储 filename1、 filename2。 ” 菜单选项之间的右箭头表示应该顺次选择每个选项。例如， “选择 File（文件） Exit（退出） ”是指应先从菜单栏中选择 File（文 件） ，然后再从 File （文件）菜单中选择 Exit（退出） 。xxv
37、 注 “注”介绍对操作员有帮助的信息。例如： 注意：在进行下一步之前，先记录您的结果。 注意 “注意”提供的信息与防止对系统或设备的可能损害有关。例如： 小心 “小心”提供保证操作员安全所需的重要信息。例如： 注意： 要避免损坏检测器流动池，请勿触摸流动池窗口。 注意： 为避免可能的电击，请在执行维护过程之前始终关闭检测器并拔下电源线。 注意： 为避免可能的灼伤，在卸下灯泡进行更换或调整前，请至少提前 30 分钟将灯关闭。 注意： 为防止化学或电气危险，操作系统时请始终遵守实验室的安全操作规程。xxvi1 1 第 1 章 Waters 2695 分离单元介绍 本章介绍 Waters 2695
38、分离单元 （图 1-1） 。本分离单元是集成的溶剂和样品管理平台。 其集成了两个传统的高性能液相色谱仪 (HPLC) 组件 （一个溶剂管理系统和一个样品管理 系统） ，从而简化了所有重要的分离功能。 图 1-1 Waters 2695 XE 分离单元 （正视图） TP01354 色谱柱加热器模块 注射器门 前面板显示器 和键盘 软盘驱动器 溶剂输送盘门 溶剂调整盘门 样品室门 溶剂瓶盘 检测器滴盘2 Waters 2695 分离单元介绍 1 1.1 分离单元概述 工厂配置 Wa ter s 可提供多种配置的“Waters 2695 分离单元”，它们之间的区别在于所包含的选件不 同。这些选件将在
39、第 1.5 节，选件和附件中进行介绍。其中两个基本配置为： 2695 提供四元溶剂装置、高性能溶剂输送装置、用于溶剂调整的集成的氦气喷射装 置、集成的柱塞密封清洗系统、 120 个样品瓶容量的样品管理系统、液晶显示器和键 盘用户界面以及软盘驱动器。 2695 XE 提供 2695 基础产品的功能，以四通道在线真空脱气器替换了氦气喷射系 统，并新增了色谱柱加热器和样品加热器 /冷却器。 HPLC 系统配置 为了与多种 HPLC 系统配置兼容，本分离单元支持 RS-232、 IEEE-488 和 I/O 连接。该分离 单元可充当： 简单的独立 HPLC 系统的 I/O 和定时信号源 使用 Wate
40、rs 2410 或 410 折射率检测器和 / 或 Waters 2487 双波长或 Wasters 486 可调吸 光率检测器的独立 HPLC 系统中的 IEEE-488 系统控制器 由 Millennium 32色谱管理器、 Micromass MassLynx 软件控制的 HPLC 系统或使用 RS-232 通信的数据系统中的组件 色谱参数控制 该分离单元可控制： 方法设定 溶剂组分 流量 柱塞密封清洗流量 针头清洗流量 样品进样 在线脱气 外部事件 IEEE-488 接口总线控制下的检测器操作 色谱柱加热（如果已安装）分离单元概述 3 1 样品加热 / 冷却（如果已安装） 氦气喷射率（
41、如果已安装） 二进制代码设备（如果已安装） 条码阅读器（如果已安装） 分离单元扩展了 HPLC 方法的传统概念，包含可影响色谱分离的所有参数。此方法采用了 许多通常包含在仪器配置中的参数（例如，压力限制和注射器抽取率） ，并使其成为分离 方法的一部分。用户可对这些参数的值进行设定以便更改各个方法，而无需在每次运行前 都设置仪器。 溢出保护 分离单元上的所有液体处理区域都有溢出保护；溢出的溶剂将流到前面板下面的废液管连 接器中。如果用户决定在分离单元的顶部安装检测器，则需在顶盖上加装一个滴盘以提供 渗漏保护。溶剂瓶盘最多可存储四个 1 L 的溶剂容器和一个 250 mL 的清洗溶剂容器，其所 提
42、供的渗漏保护最多可容纳 2 L 溢出液。 方法存储和恢复 分离单元可通过内置的软盘驱动器将分离方法、样品组和样品模板从标准 PC 格式的 3.5 英寸 软盘导出或导入到其中。从而简化了方法在系统间的传输。 注意： Waters 2695 分离单元不会感染 PC 病毒。 记录保持功能 分离单元可自动记录以下信息： 进样总数 溶剂使用总量（通过系统泵入的） 系统错误 针对每次运行设定的操作条件 用户可以： 在连接的打印机上打印此信息 通过 RS-232 总线将此信息传输到外部设备 将此信息以 ASCII 文件的形式导出到软盘4 Waters 2695 分离单元介绍 1 1.2 溶剂管理系统概述 溶
43、剂管理系统混合溶剂并通过一条无脉冲、低扩散的流路将溶剂从容器瓶传送到样品管理系 统中。溶剂管理系统包括一个流路设计，使用一个串行流路和两个独立驱动的柱塞以优化流 动控制。此设计仅需两个止回阀，从而提高了可靠性。 Synchronized Composition Control (SCC ) 根据选定的流量、组分和活塞体积确定梯度比例阀 (GPV) 频率。从而可获得极好的 梯度组分准确度和梯度精度。图 1-2 显示了溶剂管理系统中的流路。 图 1-2 溶剂管理系统中的流路 流路 溶剂管理系统中的溶剂流动如下（图 1-2）： 1. 使用容器中的氦气喷射溶剂或由在线真空脱气机为溶剂脱气。 2. 梯度
44、比例阀混合溶剂。 3. 混合的溶剂流经入口止回阀进入主活塞室，而收集器活塞将受压溶剂送入系统压力传 感器。 4. 就在收集器室排空之前，主活塞室中的溶剂被预压缩的压力将略低于系统压力传感器 所指示的压力。 5. 当收集器活塞室被排空时，主活塞将经由主压力传感器传送受压溶剂，重新注入收集 器活塞室，然后经由系统传感器传送受压溶剂，同时使得流经系统的流量保持恒定。 从步骤 3 开始，重复此循环。 6. 系统压力传感器测量操作压力。软件算法比较初级顶部压力和系统压力读数并控制预 压缩步骤以平衡压力，使溶剂流动顺畅、无起伏。 7. 溶剂继续从系统压力传感器出口流向灌注 /排放阀并进入在线过滤器。 8.
45、 经由在线过滤器后，溶剂流进入样品管理系统。 主活塞室 灌注 / 排放阀 系统压力 传感器 收集器 活塞室 止回阀 止回阀 梯度比例阀 溶剂 A 溶剂 B 溶剂 D 溶剂 C主压力 传感器在线过滤器溶剂管理系统概述 5 1 溶剂混合 梯度比例阀 (GPV) 最多可将四种溶剂按用户选择的组合方式进行任意混合。四种溶剂所占 比例之和必须等于 100%。 GPV 将产生可预计的梯度段，而与溶剂的可压缩性和系统反压 无关。溶剂选择和比例分配在溶剂输送系统的低压（吸入）一侧进行。溶剂在各个活塞室 中继续进行混合。 溶剂瓶盘 溶剂瓶盘最多可容纳四个 1 L 的容器和一个 250 mL 的清洗容器，并可容纳
46、 2 L 溢出液。 如图 1-1 所示，托盘的尺寸与分离单元顶部的滴盘顶部相适合。 灌注 / 排放阀 用户可在灌注 / 排放阀上连接一个注射器，可通过该注射器抽取溶剂管理系统中的溶剂。 柱塞密封清洗系统 密封清洗溶剂可润滑柱塞并可冲洗掉从每个活塞室高压侧强行通过柱塞密封的所有溶剂或 干盐。此清洗循环可延长密封的使用寿命。柱塞密封清洗系统的运行过程如下： 1. 柱塞密封冲洗溶剂从容器流向螺线管清洗泵，然后流到初级柱头中主柱塞密封后面的 腔体内。 2. 溶剂继续从该头流出，并流入收集器头中柱塞密封后面的腔体内。 3. 清洗溶剂从收集器头流到废液容器中。 当溶剂管理系统传送溶剂时，柱塞密封清洗泵将按
47、用户选定的时间间隔间歇性地循环传送 清洗溶剂。 无灌注保护 当由于溶剂容器已空而导致无灌注，从而使得操作压力在 50 个溶剂输送循环内持续低于 25 psi （1.7 巴， 172 kPa）时，分离单元将自动停止运行。 首选柱塞单次输送体积 基于综合测试，分离单元使用可优化液体输送和溶剂混合的离散可设定单次输送体积。为提 高特定应用程序的性能，用户可覆盖默认的 （预设置的）单次输送体积 (130 L)，选择一个 首选的单次输送体积（25 L、 50 L 或 100 L，如表 1-1 所示）。当使用可能需要额外混6 Waters 2695 分离单元介绍 1 合（由较大的单次输送体积提供）的溶剂
48、（例如，三氟乙酸 TFA 梯度）时，建议您使用 较大的单次输送体积。与静态或动态混合器不同，进行此额外混合时没有附加的延迟体积。 注意： 如果分离单元使用氦气喷射 法，则在低流量时 25 L 的单次输送体积不可用 （无论 是作为手动选项还是作为预设的设定值） 。 1.3 样品管理系统概述 样品管理系统可存放和定位样品瓶并将样品注入溶剂流。样品管理系统有 5 个样品转盘， 每个样品转盘中最多可容纳 24 个样品瓶，共计可容纳 120 个样品瓶。样品瓶为 2-mL 的工 业标准样品瓶，瓶盖为卡口盖、钳口盖或旋盖。托架旋转样品转盘，使其进入样品室的进 样站。 流路 溶剂、样品和针头清洗溶剂的流动由样
49、品管理系统中的四个阀门进行控制。图 1-3 中显示 了这四个阀门（标有 V1 至 V4）。可在 Status （状态）屏幕（图 4-4）中监视各个阀门的 位置。 表 1-1 可选的单次输送体积 流量范围 （毫升 / 分） 单次输送体积 （L ） 0.010 - 0.530 25 0.531 - 1.230 50 1.231 - 3.030 100 3.031 - 5.000 130样品管理系统概述 7 1 图 1-3 样品管理系统中的流路 样品管理系统中的流路将根据所执行功能的不同而相应地发生变化。请参阅图 1-3。 正 常流动 正常流动期间， V1 打开，允许溶剂在两个路径中流动： 95% 的溶剂流经 V2 主体、样品定量环压力传感器、样品定量环和针头。针头位于流 体位置，溶剂流出针口，经由密封包，然后再流入到色谱柱中。 5% 的溶剂流经限流器和密封包，然后流入到色谱柱中。 进样 进样循环分为三个步骤： 1. 将样品定量环与正常流动隔开 关闭 V1、 V2 和 V3，然后打开 V4，打开针头清洗 泵，针头移动到“密封”位置。然后打
