1、API 4000 培训教程,LCMS原理和仪器硬件介绍,液质系统的构成,测试的样品通过LC和针泵导入MS中,1. 样品导入,质谱的性能指标,质量准确度: 样品质量测量的准确度。高的质量准确度可以区分相近分子量的不同化合物。 分辨率: 是指分开两个峰的能力， 高的分辨率可以提高质量准确度、定性和定量性能。高的分辨率能够分离更复杂的物质。API 质谱系统通过半高峰宽(FWHM)来定义分辨率，用户可以选择Low，Unit，High三种分辨率。 灵敏度: 物质能被测量的最低浓度，不同类型和分子量的物质灵敏度会有不同。 质量范围: 决定所能测定的最低和最高m/z,四级杆质谱仪的示意图,Unstable
2、Ion trajectory,Stable Ion Trajectory,Source,Detector,DC and RF voltages,电喷雾离子化（ESI）- IonSpraytm,雾化气使LC导入的液体样品气化 喷雾针上的高压使液滴带电随着带电液滴中溶剂的挥发形成了离子,ESI 离子蒸发,液滴带有两种极性的离子，但其中的一种极性占支配地位,随着溶剂的挥发，液滴表面某种极性的离子增多，电场增强,当电场超过某个阈值后，离子互相排斥就从液滴的表面“飞溅”出去,残留物通过废液系统排出,APCI离子化过程分为3步进行： 电晕放电针使离子源的 N2 或 O2 带电 带电荷的N2 或 O2 传递
3、电荷给气化的溶剂分子 带电荷的气化溶剂又将电荷转移给分析物,大气压化学电离(APCI),四级杆理论,四级杆上加载三种类型的电压: 射频电压(RF) 固定频率的振荡电压，用来聚焦离子，形成共振离子轨迹. 筛选电压(Filtering DC ，简称FDC) 加载在不同的四级杆上(随RF电压的变化而变化). 用来筛选所需要通过的离子 帮助确定分辨率 牵引电压(Rod Offset Voltage ，简称ROV) 用来确定离子轴向飞行能量（即离子通过四级杆的线性速度）的直流电压。 仅有RF电压时(RF only)： 在四级杆上没有加载FDC电压，只有RF与ROV电压 此时四级杆通过所有的离子，不具有选
4、择性,RF电压如何聚焦离子,180 相移,= 离子,1. 离子被“B” 杆吸引. 2. RF 电压反转后, 所有的离子被 A 杆吸引. 3. RF电压反转后, 所有的离子被另外一个 B 杆吸引 4. RF 电压反转后, 所有的离子被另外一个 A 杆吸引 . ，重复以上过程，离子就悬空在四级杆中,RF,RF,180 相移,End View,仅有RF电压时 -A 杆 与 B 杆之间的相位相差180,离子如何通过四级杆到达检测器,*四级杆中的离子的飞行轨迹是否为螺旋形状或者其他更复杂的运动，目前还有争论,仅有RF电压时 -A 杆 与 B 杆之间的相位相差180,RF和ROV两种电压使离子螺旋*飞出四
5、级杆到达检测器,59,175,616,1254,1545,B,A,A,B,906,RF only 模式,PPG 为例: RF only 模式时，所有的离子都能通过四级杆,To Detector,Q0 & Q2 总为RF only 模式 当Q3选择时，Q1为 RF only 模式；当Q1选择时，Q3为 RF only模式,PPG 为例: RF + FDC电压让四级杆通过906离子. RF + FDC电压能过让所需的离子通过四级杆.,直接通过,59,175,616,1254,1545,稳定的离子,不稳定的离子碰撞上四级杆,B,A,A,B,906,RF + FDC,到达检测器,Q0 或者Q2上没有发
6、生筛选，所有的离子都能通过.,Q1 or Q3,Turbo V离子源介绍,Turbo Vtm 离子源,Turbo VTM 离子源特点,垂直和水平位置精确调节 内化的气体管路和电路连接，方便使用 90角垂直设计提供了高效的去溶剂化，提高仪器的耐受性对称的 750oC 加热头两种离子化探头: TIS & APCI,Turbo V 两种探头,根据实际使用情况，调节喷雾针露出13mm,如何安装和拆卸离子源,拆卸： 1. 完成正在进行的样品测试或者从Acquire menu中选择 Abort Sample command 2. Standby仪器停止LC流动相，然后Deactivate 仪器 3. 松开
7、样品导入连接管路的Peek 管接头，移开液相连接管路 4. 往上旋转2个黑色的卡隼松开离子源. 5. 水平往外拉Turbo V 离子源 安装离子源 1. 对准真空腔的接口把Turbo V 往里推到正确位置 2. 往下转动2个黑色卡隼至水平方向，然后同时转动至卡紧为止（离子源是否接好以接口处的密封性评定） 3. 连接液相管路到离子源相应的接头处 离子源保存：长期不用的离子源建议防尘防潮保存,API4000真空系统,API 4000 真空系统,接口不同处的真空度,Q1 区域 10 Torr,Q0, 入口电压(EP),6-8 mTorr,大气压,气帘气挡板,Orifice孔,气帘气,取样锥孔(Ski
8、mmer),Orifice 挡板, 去簇电压 (DP),1-2 Torr,真空差接口-API 4000,接口部件-API 4000 系统,耐用, 陶瓷材质具有化学惰性 接口表面具有加热功能和气体连接口 安装简便,聚焦后的离子通过取样锥孔(Skimmer)进入到Q0区域,四级杆内部构造图,Q0,Q1,Q2,Q3,API4000正常真空度范围,CAD=0时，真空度1.310-5torr CAD=12时，真空度5.510-5torr 具体的真空度值以装机时为准，当系统没有更换过与真空系统相关的零件时，真空度一般不会有大的变化。如果出现真空度太好或者太差的情况，在排除硬件的故障后，一般通过清洗接口可以
9、解决。,API4000气体管路连接,a.高纯氮（Curtain Gas），输出压力0.4MPa（MAX60psi）-用于气帘气和碰撞气 b.零级空气或以上（Gas1/Gas2），输出压力0.7MPa(MAX 105psi)为离子源提供雾化气 c.无油空气或以上（Exhaust Gas），输出压力0.35MPa(MAX60psi)为废气排放系统提供负压,API4000主机控制面板,主机电源开关按钮,RESET按钮及仪器状态指示灯,电源接口,液相同步信号接口,主机通讯接口,API 4000 开关机步骤,开机顺序 1.打开UPS电源，确认Curtain gas的输入压力为0.4MPa 2.打开机械泵的电源开关 3.机械泵工作至少15min 5.打开仪器电源开关 6.等系统真空达到1-210-5 torr后才可以正常操作仪器扫描(建议过夜后才开始使用校正仪器) 关机顺序 1.关闭仪器电源开关停止真空泵系统 2.机械泵继续工作至少15min 3.关闭机械泵上的电源开关 4.关闭三路气体,
