1、第 1 页 共 13页药品生产质量管理文件安捷伦 12600高效液相色谱仪再确认方案文件编码 Q/TJT-QCAVR002-2013-00 发放编号颁发部门 总工室起草人 日 期 年 月 日审核人 日 期 年 月 日审核人 日 期 年 月 日批准人 日 期 年 月 日执行日期 年 月 日历次修订的原因、目的：分 发 部 门厂 长 室 总 工 室 综 合 办 生 产 部 质 量 部 储 运 组 工 程 部 制剂车间 前提车间 外包车间 G M P 办 检测中心 集采中心 Q/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 1 页 共 13页药品生产质量管理
2、文件5.内容5.1 安装确认5.1.1 仪器基本信息的确认（见表 1）表 1 仪器基本信息确认记录仪器基本信息仪 器 名 称 Agilent1260 高 效 液 相 色 谱 仪 仪 器 编 号制 造 商 检 测 器 型 号检 测 器 序 列 号 购 入 时 间安 装 时 间 安 装 地 点Q/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 2 页 共 13页药品生产质量管理文件维修服务单 位 名 称 联 系 电 话地 址 联 系 人备 件 供 应 单 位 联 系 电 话技术资料检查名 称 确 认 结 果 备 注Agilent1260 高 效 液 相 色
3、谱 仪 说 明 书 有 无Agilent1260 高 效 液 相 色 谱 仪 采 购 合 同 有 无装 箱 单 有 无计 量 检 定 证 书 （ 应 在 计 量 检 定 周 期 内 ） 有 无 再 确 认 时 应 具 备Agilent1260 高 效 液 相 色 谱 仪 SOP 有 无 再 确 认 时 应 具 备按采购合同对装箱单所列内容进行确认品 名 型 号 及 序 列 号 数 量 确 认 结 果 有 无 有 无 有 无 有 无 有 无 有 无 有 无 有 无 有 无检查人： 日期： 年 月 日5.1.2 安装环境条件的确认表 2 安装环境条件的确认记录环境条件 要 求 检 查 结 果位 置
4、 应 清 洁 无 尘 ， 无 易 燃 、 易 爆 和 腐 蚀 性 气 体 ，排 风 良 好 符 合 不 符 合台 面 仪 器 应 平 稳 地 放 在 工 作 台 上 ， 周 围 无 强 烈 机 械 震 符 合 不 符 合Q/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 3 页 共 13页药品生产质量管理文件动 和 电 磁 干 扰 源 ， 仪 器 接 地 良 好 。环 境 温 度 15-30 符 合 不 符 合湿 度 室 内 湿 度 在 20%一 85% RH 范 围 内 。 符 合 不 符 合空 调 有 温 湿 度 控 制 措 施 符 合 不 符 合排
5、 风 通 风 良 好 符 合 不 符 合电 路 电 源 电 源 电 压 为 (220 士 22)V， 频 率 为 (50 土 0.5)Hz 符 合 不 符 合接 地 符 合 不 符 合不 间 断 电 源 符 合 不 符 合检查人： 日期： 年 月 日5.2 运行确认严格按Agilent-1260 高效液相色谱仪标准操作规程进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表 3表 3 运行确认记录操作步骤 合格标准 检查结果开机进入系统 符合 不符合系统值设置 符合 不符合打印机 符合 不符合退出系统关机 符合 不符合检查人： 日期： 年 月 日5.3性能确认5.3.1 试验条件
6、的确认表 4 试验条件的确认记录品 名 要 求 确 认 结 果电 子 分 析 天 平 最 大 称 量 不 小 于 100g， 最 小 分 度 不 大 于 1mg。 计 量 检 定 。 符 合 不 符 合容 量 瓶 校 验 符 合 不 符 合Q/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 4 页 共 13页药品生产质量管理文件刻 度 吸 管 校 验 符 合 不 符 合秒 表 分 度 值 不 大 于 0.1s 符 合 不 符 合数 字 温 度 计 测 量 范 围 为 0 100 ， 最 小 分 度 不 大 于 0.1 。 符 合 不 符 合标 准 物 质
7、 蒸发光的标准物质 氢化可的松 符 合 不 符 合其 他 色谱甲醇、超纯水、分析纯丙酮、异丙醇等。 符 合 不 符 合检查人： 日期： 年 月 日5.3.2 性能确认的内容及可接受标准表 5 性能确认的内容及可接受标准确认项目 可接受标准泵流量误差流量设定值ml/min0.5 1.0 2.0测定次数 3 3 3流动相收集时间/min10 5 5泵流量设定值误差 SS5% 3% 2%泵流量稳定性误差 SR3% 2% 2%基线噪声 不超过 510-4AU基线漂移 不超过 510-3AU/h紫外-可见光检测器 最小检测浓度 萘/甲醇溶液的最小检测浓度不大于 110-7g/ml整机性能定性测量重复性（
8、6 次测量）RSD61.5%定量测量重复性（6 次测量）RSD63.0%数据处理系统能正常采集、保存、处理数据1.工作站能正常设置采集方法的参数2.工作者设置的采集方法能正常保存Q/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 5 页 共 13页药品生产质量管理文件3.压力超过限定时工作站能自动报警4.漏液时工作站能自动报警5.设置错误的参数时工作站能自动报警6.修改原有方法后重新保存时有提示7.工作站能正常编辑样品系列表和单个进样信息8.点击开始后工作站能正常进行样品分析9.样品分析的数据能正常保存10.能使用工作站对保存的数据进行处理12.能正常打
9、印数据处理结果5.3.3 性能确认检定方法5.3.3.1 泵流量设定值误差 SS与泵流量稳定性误差 S R的确认表 6 泵流量设定值误差 SS和泵流量稳定性误差 SR的可接受标准流量设定值 ml/min 0.5 1.0 2.0测定次数 3 3 3流动相收集时间/min 10 5 5允许误差泵流量设定值误差 SS 5% 3% 2%泵流量稳定性误差 SR 3% 2% 2%注: 最大流量的设定值可根据用户使用情况而定。 对特殊的、流量小的仪器，流量的设定可根据用户使用情况选大、中、小三个流量，流动相的收集时间则根据情况适当缩短或延长。将仪器各部分连接好，以超纯水为流动相，分别设定 0.5、1.0 和
10、 2.0ml/min 三个流速，在流动相排出口用事先清洗、干燥并已称重的容量瓶收集流动相，0.5ml/min 时用秒表计时收集 10 分钟，1.0 和 2.0ml/min 时用秒表计时收集 5 分钟，在分析天平上称重，每个流速测定 3 次，按式(1)、式(2)计算 SS和 SR，查水的密度表计算，即得。SS = (Fm 平 Fs)/Fs100% (1)SR = (FmaxFmin)/Fm 平 100% (2)Q/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 6 页 共 13页药品生产质量管理文件式中，FmFm（W2-W1）/( t.t),流量实测值，m
11、l/min；W2容量瓶流动相的质量，g；W1容量瓶的质量，g； t实验温度下流动相的密度，g/cm；t 收集流动相的时间，min；Fm 平 同一组测量的算术平均值，ml/min；Fs流量设定值，ml/min；Fmax 同一组测量中流量最大值，ml/min；Fmin 同一组测量中流量最小值，ml/min；表 7 泵流量设定值误差 SS和泵流量稳定性误差 SR测定记录Fs 收集时间（分钟）W1 W2 Fm Fm 平 Ss SR 结论10100.5105% 3%符合规定不符合551.053% 2%符合规定不符合552.052% 2%符合规定不符合注：实验温度 纯水的密度 t：实验温度下超纯水的密度，
12、 g/cm检查人 日期： 年 月 日5.3.3.2 紫外-可见光检测器的检定5.3.3.2.1 基线噪声和基线漂移的检定选用 C18色谱柱，以 100%甲醇为流动相，流量为 1.0ml/min，紫外检测器的波长选在254 nm，检测灵敏度调到最灵敏挡。开机预热，待仪器稳定后（约 60 分钟）记录基线60min，从 30min 内基线上读出噪音值；从 60min 基线上读出基线漂移值。 （附图谱）由检测器的衰减倍数和测得的基线峰一峰高对应的记录仪标度，计算基线噪声，Q/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 7 页 共 13页药品生产质量管理文件用
13、检测器自身的物理量(AU)作单位表示NdKB式中：Nd检测器基线噪声；K衰减倍数；B测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，AU。基线漂移用1h内基线偏离原点的值(AU/h)表示。表8 基线噪声和基线漂移的检定确认项目 确认结果 技术要求 是否符合规定基线噪声 AU 510 4 AU 是 否基线漂移 AU/h 510 3 AU/h 是 否检查人 日期： 年 月 日5.3.3.2.2 最小检测浓度在 5.3.3.2.1 的色谱条件下，由自动进样器或微量注射器注入 1020ul，浓度为110-7g/ml 的萘/甲醇溶液，记录色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰-峰高，按下式计算最小检测浓度。 (按 20ul
14、 进样量计算)。CL2NdCV/20H式中:C L最小检测浓度，g/mL；Nd基线噪声峰-峰高，mm；C标准溶液浓度，g/mL；H标准溶液的色谱峰高，mm；V进样体积，ul。表 9 最小检测浓度确认记录确认项目 确认结果 技术要求 是否符合规定最小检测浓度萘/甲醇溶液 g/ml 110-7g/ml 是 否Q/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 8 页 共 13页药品生产质量管理文件g/ml检查人： 日期： 年 月 日5.3.3.3 蒸发光检测器的检定5.3.3.3.1 基线噪声和基线漂移的检定选用 C18色谱柱，以 100%色谱乙腈为流动相，
15、流量为 1.0ml/min，漂移管温度设定为45C，气体流速设定为 1.5L/min 检测灵敏度调到 GAIN=1。开机预热，待仪器稳定后（约 60 分钟）记录基线 60min，从 30min 内基线上读出噪音值；从 60min 基线上读出基线漂移值。 （附图谱）由检测器的衰减倍数和测得的基线峰一峰高对应的记录仪标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量(AU)作单位表示NdKB式中：Nd检测器基线噪声；K衰减倍数；B测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，AU。基线漂移用1h内基线偏离原点的值(AU/h)表示。表10 基线噪声和基线漂移的检定确认项目 确认结果 技术要求 是否符合规定基线噪声 MV
16、 0.5MV 是 否基线漂移 MV/H 2MV/h 是 否检查人 日期： 年 月 日5.3.3.3.2 最小检测浓度在 5.3.3.3.1 的色谱条件下，使用氢化可的松标准品为样品，由自动进样器或微量注射器注入 1020ul，浓度为，记录色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰-峰高，按下式计算最小检测浓度。 (按 20ul 进样量计算)。CL2NdCV/20HQ/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 9 页 共 13页药品生产质量管理文件式中:C L最小检测浓度，g/mL；Nd基线噪声峰-峰高，mm；C标准溶液浓度，g/mL；H标准溶液的色谱峰高，mm
17、；V进样体积，ul。表 11 最小检测浓度确认记录确认项目 确认结果 技术要求 是否符合规定g/ml最小检测浓度溶液g/ml2.510 -7g/ml（5ng 的绝对进样量） 是 否检查人： 日期： 年 月 日5.3.3.4 整机性能（定性、定量重复性）的确认将仪器各部分联接好，选用 C18色谱柱，根据仪器配置的检测器，选择流动相和测量参数:紫外检测器和二极管阵列检测器用 100%甲醇为流动相，流量为 1.0ml/min，检测波长为 254nm，灵敏度选择在 0.04 左右，基线稳定后由自动进样器注入 510ul、浓度为 110-4g/ml 的萘/甲醇标准溶液。蒸发光散射检测器选用 C18色谱柱
18、，用 85%乙腈为流动相，流量为 1.0ml/min，设定漂移管温度为 45C，气体流速为 1.5L/min，连续测量 6 次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，按下式计算相对标准偏差 RSD6计算公式：式中:RSD6 定性(定量) 定性(定量)测量重复性相对标准偏差;Xi第 i 次测得的保留时间或峰面积;X6 次测量结果的算术平均值;i测量序号%10RSD16定62XiQ/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 10 页 共 13页药品生产质量管理文件表 12、整机性能（定性、定量重复性）的确认记录标物名称 萘 浓度 110-4g/ml 进样量 1
19、0ul 波长 254nm流动相 甲醇 流量 1.0ml/min 灵敏度选择序号 1 2 3 4 5 6 平均值 RSD6 是否符合规定保留时间(min)是 否峰面积 是 否标物名称 氢化可的松浓度 110-4g/ml 进样量 10ul 气体流量/温度45C 1.5L/min流动相 85%乙腈流量 1ml/min 灵敏度选择 GAIN=1序号 1 2 3 4 5 6 平均值 RSD6 是否符合规定保留时间(min)是 否峰面积 是 否6确认结果汇总表表 13 确认结果汇总表确认项目 检测结果流量设定值 ml/min 0.5 1.0 2.0测定次数 3 3 3流动相收集时间/min 10 5 5泵
20、流量设定值误差 SS （5%） （3%） （2%）*泵流量误差泵流量稳定性误差 SR （3%） （2%） （2%）结论Q/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 11 页 共 13页药品生产质量管理文件确认项目 可接受标准 确认结果*基线噪声 不超过 510-4AU*基线漂移 不超过 510-3AU/h紫外-可见光检测器 *最小检测浓度 萘/甲醇溶液的最小检测浓度不大于 110-7g/ml蒸发光检测器基线噪声 0.5MV基线漂移2MV/h最小检测浓度 2.510 -7g/ml（5ng 的绝对进样量）定性测量重复性 RSD6 1.5%*整机性能 定
21、量测量重复性 RSD6 3.0%1.工作站能正常设置采集方法的参数2.工作者设置的采集方法能正常保存3.压力超过限定时工作站能自动报警4.漏液时工作站能自动报警5.设置错误的参数时工作站能自动报警6.修改原有方法后重新保存时有提示7.工作站能正常编辑样品系列表和单个进样信息8.点击开始后工作站能正常进行样品分析9.样品分析的数据能正常保存10.能使用工作站对保存的数据进行处理数据处理系统能正常采集、保存、处理数据12.能正常打印数据处理结果7.结果的处理7.1 凡带*号的确认项目全部达到规定技术要求的仪器为判为合格仪器，通过确认。7.2 只配一个检测器的仪器，任何一个带*号的项目不合格，该仪器
22、为不合格仪器。7.3 配一个以上检测器的仪器，只要其中一个检测器带*号的检定项目和除检测器外其Q/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 12 页 共 13页药品生产质量管理文件他带*号的检定项目合格，可注明该检测器的通过确认。同时注明其他不合格的检测器，暂时限制使用，待经过维修并经计量检定机构检定合格后，才能使用。8.异常结果的处理9.再确认周期 一年，更换重要部件或对仪器性能有怀疑时，应随时确认。正常情况下，规定外部计量检定 6 个月后进行再确认。10.确认报告质量控制仪器设备确认报告确认项目名称 安捷伦 1260 高效液相色谱仪的确 认 报告起草人确认起讫日期 年 月 日 年 月 日确认结果报告概要：Q/TJT-QCAVR002-2013-00 安捷伦 1260高效液相色谱仪再确认方案 第 13 页 共 13页药品生产质量管理文件评估和建议：结论：确认小组成员会签：备注确认组长签发：
