1、126 主堡塞墅塑堕壅塞耋堂苤查!芏兰旦箜踅鲞蔓!塑曼!竺!曼墨P垦!i!i堡!皇P型!：!箜：塑!：!病毒病诊断与治疗中国30个地区HBV基因型分布特点和临床意义张爱民，王慧芬，王海滨，苏海滨，辛绍杰，胡瑾华，游绍莉【摘要】 目的 了解中国乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型的分布特点和临床意义。方法应用型特异性引物聚合酶链反应法，对中国30个省市自治区共2922份HBV感染者血清标本进行基因型检测，同时检测相关病毒学及肝功能生化指标。分析基因型分布特点及II缶床意义。结果 2922例HBV感染者中，B、C、BC、D基因型分别占159、835、041、02l，未发现其他基因型。北方地区C基因型占
2、绝大多数，南方地区浙江、江苏地区以C基因型为主，广东、湖南、湖北、江西以B基因型为主。B基因型较C基因型HBV感染者平均年龄小(P500拷贝ml，均排除了HAV、HEV、HcV、HDV、EBV和cMV感染和其他导致肝脏病变的疾病。血清标本一80保存。12 血清生化学及病毒学指标检测 血清ALT、AST、TBIL、PA、ALB、CHE，HBV抗原抗体、HBVDNA定量、抗HAV IgM、抗HCV、HDV Ag、抗HEVIgM、CMV IgM、EBV IgM在解放军第三。二医院临床检验中心做常规检测，其中HBV DNA定量的检测下限值为500拷贝ml(相当于100IUm1)，检测时间为患者入院后未
3、进行治疗前，所人选病例在住院前均未接受干扰素和(或)核苷(酸)类似物抗病毒治疗。13 引物特异性HBV DNA基因分型方法 引物设计和多聚酶链反应参照N aito等。的方法。第一组引物为A2、B2、C2分别为A、B、C型特异性下游引物，共用的上游引物为MixABC，该组引物鉴定基因型A、B、C型；第二组引物MixDEF和Dl、El和Fl，鉴定基因D、E和F。先用通用引物进行扩增，再用混合的第一组引物扩增进行A、B和C型基因分型，然后用混合的第二组引物鉴别D、E型和F型。HBV基因型A、B、C、D、E和F型分别可扩增到68、281、122、119、167 bp和97 bp的片段。经过两轮PCR(
4、每次PcR均设阳性和阴性对照)，取第二次PcR产物8斗l在80 gL的聚丙烯酰胺凝胶上电泳，EB染色，紫外灯下观察结果。14统计学方法结果用均值标准差和中位数(范围)表示，组问差异根据情况分别用单因素方差分析、秩和及卡方检验，统计学分析用STATA 7O软件进行，尸O05表示差异有统计学意义。2 结果21 基因型分布情况 2922例HBV感染者中，B基因型465例(159)，C基因型2439例(835)，B、c混合型12例(O4l)，D基因型6例(02l)，未检测到其他型。基因型地域分布特点详见表l和表2。表l 中国30省市自治区HBV基因型地域分布Tab-l Distribution HBV
5、 genotypes in 30 regions of China地区陀gion B n() c n() Bc n()D n()总计To“ 465(159)2439(835)12(041)6(O21)22基因型与性别、年龄的关系B、C基因型两组HBV感染者性别比较无统计学意义。B、C基因型年龄分别为(347172)岁、(394169)岁，差异有统计学意义(P0001)。23 基因型与HBeAg阳性率的关系 B、C基因型血清HBeAg阳性率分别为548、605，差异有统计学意义(尸；O023)。万方数据主堡塞墅塑堕盎煎壹堂塞查!生兰旦苤堑鲞笙!塑壁垫!竺兰望垦!垫!竺!：皇P堕!垫!：!堑：塑垒
6、!农2中国各地区HBV基因型地域分布Tab2 Di8tribution HBV genotypes in regions of China地区mgion B n() C n() BC n()D n(华北Nonh china 13l(1 I0) 1052(885) 4(O34)2(O17东北Nonhet 35(67) 484(927) 2(O38)l(O19华东Ea吼China 53(136) 334(859) 2(O51) 0华中central china 152(339) 294(655) 2(O45) l(022华南stll China 32(727) 12(273)西南Soutllwes
7、t 39(429) 5l(560) l(109西北Nonhwe8t 23(97) 212(891) 2(084)l(04224基因型与HBV DNA的关系 B、C基因型血清HBVDNA病毒载量分别为(61l176)log 10拷贝ml、(584169)loglO拷贝ml，差异有统计学意义(P=0038)。25基因型与肝功能生化指标的关系 B、C基因型两组比较，血清ALT、AST、TBIL、PA值差异均无统计学意义；血清ALB、CHE值B、C基因型分别为(3817630)gL、(3636816)gL，(5 3712 357)UL、(4 6042 367)uL，差异有统计学意义(P值分别为O016
8、和0001)。3讨论HBV基因型呈一定的地理区域性分布，在不同人种中的流行及传播的方式也存在差异。本组研究中国2922例HBV感染者中，B型、C型、BC混合型、D型各占159、835、O4l、02l，未检测到其他型。北方省市自治区C基因型占绝大多数，大部分地区超过90，南方省市自治区C基因型明显减少，浙江、江苏地区仍以C基因型为主，广东、湖南、湖北、江西以B基因型为主。按中国七大地区分析。东北、西北、华北、华东、华中、西南、华南地区C基因型逐渐减少，B基因型逐渐增加，但仅华南地区以B基因型为主。研究资料表明，C基因型HBV感染者的HBV DNA载量和HBeAg阳性率均显著高于B基因型，并可引起
9、更为严重的肝脏疾病，与炎症坏死及肝纤维化的关系更为密切，更易引起肝硬化和肝细胞性肝癌H引。本研究同样显示C基因型较B基因型HBV感染者HBeAg阳性率更高，ALB、CHE更低，ALB和CHE是反应肝脏功能的重要指标，说明C基因型HBV感染者肝脏功能损害较重，病情更重，这可能与B基因型HBeAg血清学转换早于C基因型，故更易发生生化学好转，病情相对较轻，预后较好。本研究显示C基因型较B型HBV感染者有更低的病毒载量，结果不支持C基因型HBV感染者病情更重可能与C基因型HBV感染者HBV DNA载量高有关，与既往研究不一致。感染HBV B基因型的人群平均年龄较C基因型感染者小，与既往研究一致，说明
10、B基因型HBV感染者随着年龄的增长所占比例下降，提示可能B基因型HBV感染者自然缓解率较高，预后较好。本研究通过对来自中国大部分地区的大样本量HBV感染者血液标本采用同一种方法进行基因型检测，结果相对以往研究有较好的普遍性和代表性，可能更能准确和真实的反应中国HBV感染者基因型地域分布特征，另外，本研究也对基因型的临床意义做了初步的分析，提示基因型可能影响HBV感染者不同的临床结局。4参考文献Wang Z，LiZ，zeng C，ef a1A new interfype recombin锄tbetween genotype8 C and D of hepatiti8 B vim8 iden6fi
11、ed inChinaJ Gen Vi m12005。86：985990高俊薇李雅娟，庄辉，等中国ll城市HBV慢性感染者的HBV基因型分布中华流行病学杂志2007，28：315-318赵薇，李俊，李兴丰。等感染乙型肝炎病毒不同基因型和亚型患者的临床特点分析中华流行病学杂志。2007。28：74-77Sumi HYokoeuka 0Seki N。et a1Innuence of hepatiti8 BVi川s genotypes on the pmg陀ssion of chronic type B liv盯di蛳HepatoIogy，2003，37：19-26Yuen MF，Sablon E，Y
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14、e-8pec访cme糟J Clin MicrobioI，200l。39：362364(收稿日期：20lOlO-20)1J11J1J1J1J2345678r；rLrLrLrLrL万方数据中国30个地区HBV基因型分布特点和临床意义作者： 张爱民， 王慧芬， 王海滨， 苏海滨， 辛绍杰， 胡瑾华， 游绍莉， ZHANG Ai-min，WANG Hui-fen， WANG Hai-bin， SU Hai-bin， XIN Shao-jie， HU Jin-hua， YOU Shao-li作者单位： 张爱民,ZHANG Ai-min(军医进修学院,北京,100853)， 王慧芬,苏海滨,辛绍杰,胡瑾华
15、,游绍莉,WANG Hui-fen,SU Hai-bin,XIN Shao-jie,HU Jin-hua,YOU Shao-li(解放军第三二医院肝衰竭诊疗研究中心)， 王海滨,WANG Hai-bin(解放军第三二医院临床检验中心)刊名： 中华实验和临床病毒学杂志英文刊名： CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL AND CLINICAL VIROLOGY年，卷(期)： 2011,25(2)参考文献(8条)1.Naito H;Hayashi S;Abe K Rapid and specific genotyping system for hepatitis B vir
16、us correspondingto six major genotypes by PCR using type-specific primers外文期刊 20012.Kao JH;Chen PJ;Lai MY Hepatitis B vires genotypes and spontaneous hepatitis R e antigenseroconversion in Taiwanese hepatitis B carriers 20043.Chu CJ;Hussain M;Lok AS Hepatitis B virus genotype B is associated with ea
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