1、化检员实用手册 By Kaixinxiaoge 一、实验室基础知识 一、实验室安全守则 (一 )分析人员必须认真学习分析规程和有关的安全技术规程，了解设备性能及操作中可能发生事故原因，掌握预防和处理事故的方法。 (二 )玻璃管与胶管、胶塞等拆装时，应先用水润湿，手上垫棉布，以免玻璃管折断扎伤。 (三 )稀释浓硫酸的容器要放在塑料盆中，只能将浓硫酸慢慢到入水中，不能相反 !必要时用水冷却。 (四 )蒸馏和提纯时不能离人，以防温度过高或冷却水突然中断。 (五 )化验室每瓶试剂必须贴有明显的与内容物相符的标签。严禁将用完的原装试剂空瓶不更换标签而装入别种试剂。发现试剂瓶上 标签掉落或将要模糊时应立即
2、贴好标签。 (六 )不准使用绝缘损坏或老化的线路及电器设备。保持电器及电线的干燥。 (七 )正确操作闸刀开关，应使闸刀处于安全合上或完全拉断的位置，不能若即若离，以防接触不良打火花。 (八 )使用酒精灯时，注意酒精切勿装满，应不超过容量的 2/3，灯内酒精不足 1/4 容量时，应灭火后添加酒精。燃着的灯焰应用灯冒盖灭，不可用嘴吹灭，以防引起灯内酒精起燃。酒精灯应用火柴点燃，不应用另一正燃的酒精灯来点，以防失火。 (九 )若局部起火，应立即切断电源，用湿抹布或石棉布覆盖熄灭。若火势较猛，应立即与有 关部门联系，请求救援。 (十 )打开浓盐酸、浓硝酸、浓氨水试剂瓶塞时应戴防护用具。 (十一 )打开
3、高温烘箱前，须确认箱内温度小于 100 后方可打开。 (十二 )若遇酸碱液灼烧时，速用大量自来水冲洗患处。属酸液烧伤，用 2%碳酸氢钠冲洗；属碱液烧伤，用2%硼酸冲洗，再用清水冲洗。 二、化学试剂的分类和规格 (一 )化学试剂按其用途分为一般试剂、基准试剂、无机离子分析用有机试剂、色谱试剂与制剂、指示剂与试纸等。 (二 )实验室最常见试剂的规格 1.基准试剂是一类用于标定滴定分析标准溶液的标准参考物质，可作为滴定分析中的基准 物用，也可精确称量后直接配制标准溶液。主成分含量一般在 99.95 100.05，杂质含量略低于优级纯或与优级纯相当。标签颜色为浅蓝色。 2.优级纯试剂，也称为保证试剂，
4、其成分高，杂质含量低，主要用于精密的科学研究和测定工作，简称 GR级。 3.分析纯试剂，简称 AR 级，质量略低于优级纯，用于一般的科学研究和重要的测定。 4.化学纯试剂，简称 CP 级，质量较分析纯差，用于工厂、教学实验的一般分析工作。 5.实验试剂，简称 IR 级，杂质含量多，主要用于普通的实验或研究。 三、化学试剂的使用方法和存放 (一 )使用方法 化验人员要熟知最常用试剂的性质，如市售酸碱的浓度，试剂在水中的溶解性，有机溶剂的沸点，试剂的毒性、危险性及其化学性质等，要注意保护试剂瓶的标签，它表明试剂的名称、规格、质量，万一掉失应照原样贴牢。分装或配置试剂后应立即贴上标签。决不可在瓶中装
5、上不是标签指明的物质。无标签的试剂可取小样检定，不能用的要慎重处理，不应乱倒。 为保证试剂不受沾污，应当用清洁的牛角勺从试剂瓶中取出试剂，决不可用手抓取。液体试剂可用干净干燥的量筒倒取或吸管吸取，取出的试剂不可倒回原瓶。打开易挥发的试剂瓶塞时不可把瓶口对准脸部。取出试 剂后要盖紧塞子，不可换错瓶塞。 不可用鼻子对准试剂瓶口猛吸气，如果必须嗅试剂的气味，可将瓶口远离鼻子，用手在试剂瓶上方扇动，使空气吸向自己而闻出气味。 (二 )存放 1.易燃易暴试剂应贮于铁柜中，柜的顶部有通风口。严禁在化验室存放大于 20L 的瓶装易燃液体。 2.药品柜和试剂溶液均应避免阳光直晒及靠近暖气等热源。要求避光的试剂
6、应装于棕色瓶中或用黑布包好存于暗柜中。 3.发现试剂瓶上标签脱落或要模糊时应立即贴好标签。无标签或标签无法辨认的试剂都要当做危险品重新鉴别后小心处理，不可随便乱仍，以免引起严重后果。 4.剧毒品，如氰化钾等，应锁在专门的毒品柜中，交由保卫人员管理，领用时至少有两人签字，并做好登记。 四、玻璃仪器的洗涤方法 (一 )沉涤仪器的一般步骤 1.用水刷洗：准备一些用于洗涤各种形状仪器的毛刷，如试管刷、烧杯刷、瓶刷、滴定管刷等。首先用毛刷蘸水刷洗仪器，用水冲去可溶性物质及刷表面粘附的灰尘。 2.用合成洗涤剂水刷洗：市售的餐具洗涤灵是以非离子表面活性剂为主要成分的中性洗液，可配成 10 20g几的水溶液，
7、 (也可用 50g 几的洗衣粉水溶液 )刷洗仪器，它们都有较强的去油能力，必要时可温热或短时间浸泡。去污粉因含有 细砂等固体摩擦物，有损玻璃，一般不要使用。 洗净的玻璃仪器倒置时，水流出后壁应不挂水珠。至此再用少量纯水刷洗仪器三次，洗去自来水带来得杂质，即可使用。 (二 )各种洗涤液的使用 要注意在使用各种性质不同的洗涤液时，一定要把上一种洗涤液除去后再用另一种，以免相互作用，生成的产物更难洗净。对于己知的污物使用合适的洗涤液往往事半功倍，因次最好在做完试验后及时清洗仪器，以免溶剂挥发后污物干涸或在空中发生变化生成难于清洗的物质。 几种常用的洗涤液 洗涤液及其配方 使用方法 铬酸洗液 研细的重
8、铬 酸钾 20g 溶于 40m1 水中，慢慢加入360m1 浓硫酸。 用于去除器壁残留油污。用少量洗液刷洗或浸泡一夜，洗液可重复使用。洗涤废液经处理解毒方可排放。 (2)工业盐酸 (浓或 1： 1) 用于洗去碱性物质及大多数无机物残渣 (3)碱性洗液 氢氧化钠 10水溶液或乙醇溶液 水溶液加热 (可煮沸 )使用，其去油效果较好；注意，煮的时间太长会腐蚀玻璃，碱一乙醇洗液不要加热。 (4)碱性高锰酸钾溶液 4g 高锰酸钾溶于水中，加入 10g 氢氧化钠，用水稀释至 100m1 清洗油污或其它有机物质，洗后容器沾污处有褐色二氧化锰析出， 再用浓盐酸或草酸洗液、硫酸亚铁、亚硫酸钠等还原剂去除 (5)
9、草酸洗液 5 10g 草酸溶于 100ml 水中，加入少量浓盐酸 洗涤高锰酸钾洗液后产生的二氧化锰，必要时加热使用 五、几种指示剂的配制 指示剂的配制 指示剂名称 变色域 pH 颜色 配制方法 酸性 碱性 甲基橙 . . 红 黄 0.1g 加水 100m1 溴甲酚绿 . . 黄 蓝 50mg，加 950m1/L 乙醇 100m1 甲基红 . . 红 黄 0.1g 加 600m1 几乙醇 100m1 酚酞 . . 无 色 红 lg 加 950m1 几乙醇 100m1 六、标准溶液的配置与标定 1. 0.1N NaOH 和 1N NaOH 标准溶液 1.1 配制 将氢氧化钠配制成饱和溶液、注于内壁
10、敷有石蜡的玻璃瓶中密闭放 溶液清亮、倾取上层清液备用。 (1) 0.1 N NaOH 标准溶液：量取 52m1 氢氧化钠饱和溶液、注入 1000ml 不含二氧化碳的水中，混匀。 (2) l N NaOH 标准溶液：量取 5ml 氢氧化钠饱和溶液、注入 1000ml 不含二氧化碳的水中，混匀。 1.2 标定 (1) 0.1 NNaOH 标准溶液：称取 105 110烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾 0.6 g，准确至 0.0002g。溶于 50ml水中，加热至沸，加入 1酚酞指示剂 2 3 滴。用 0.1N NaOH 溶液滴定至溶液成粉红色。 (2) 1N NaOH 标准溶液：称取邻苯二甲酸氢钾 6
11、g，加水 80ml 其余同上。 1.3 计算 N W V 0.2042 式中 W 邻苯二甲酸氢钾 (g)； V 氢氧化钠溶液的用量 (m1)； 0.2042 邻苯二甲酸氢钾 (KHC8H404)的毫克当量。 2. 0.1 N 硫代硫酸钠标准溶液 2.1 配 制 称取 26g 硫代硫酸钠和 0.2g 无水碳酸钠，溶于 1000ml 水中，缓和煮沸 10min，冷却。将溶液保存于棕色具塞瓶中，放置数日后过滤备用。 2.2 标定 2.2.1 标定法一 称取于 100烘至恒重的基准重铬酸钾 0.2g，称准至 0.0002g。置于 500m1 具塞锥形瓶中，溶于 25ml煮沸并冷却的水中，加入碘化钾 2
12、g 和 4N 硫酸 20m1。待碘化钾溶解后，于暗处放置 lOmin，加入 250m1水，用 0.1N 硫代硫酸钠溶液进行滴定，进终点时，加入 0.5淀粉指示剂 3m1，继续滴定至溶液由蓝色转成亮蓝绿色 。 同时作空白实验校正结果。 计算 N W V 0.04903 式中 W 重铬酸钾的重量 (g)； V 硫代硫酸钠溶液的用量 (m1)； 0.4903 每毫克当量重铬酸钾的克数。 2.2.2 标定法二 准确量取 0.1N 碘标准溶液 30 35ml，加入水 100m1 和 0.1N 盐酸 5ml，用 0.1N 硫代硫酸钠溶液进行滴定，近终点时加入 0.5淀粉指示剂 3m1，继续滴定至溶液蓝色消
13、失。 (注：水 100ml 和 0.1N 盐酸 5m1 所消耗碘量，应作校正 )。 计算： N N1V1 V 式中 N1 碘标准溶液的当量浓度； V1 碘标准溶液的用量 (m1)； V. 硫代硫酸钠的用量 (m1)。 . 0.05mol/LEDTA 一 2Na 标准溶液 3.1 配制 称取 208 乙二胺四乙酸二钠溶于 1000ml 水中，摇匀。 3.2 标定 (用纯锌作基准的标定方法 ) 标定前锌粒或锌片处理：将纯锌粒或锌片放于 1： 4 盐酸溶液中，浸沉片刻，用蒸馏水洗 净，再用乙醇浸洗两遍，最后用乙醚洗净，烘干备用。称取基准锌粒或锌片 6.5380g，溶于 20ml 盐酸 (密度 1.1
14、98 cm )中，待全部溶解后，加水稀释至 1000ml，摇匀。在 20。 C 的恒温槽内保温至 20，然后用水稀释至刻度，摇匀，即为 0.1000mol/L 的标准溶液，密封备用。 准确量取 30 35ml 制备的锌溶液，加 100ml 水，以乙二胺四乙酸二钠溶 液滴定至终点时，加入 PHl0 缓冲液 10ml 和铬黑 T 指示剂 5 滴，用 0.1mol乙二胺四乙酸二钠溶液滴定至溶液由紫色转变为纯兰色时，即为终点。 注： 1)PHl0 的缓冲溶液的配制：称取 54 克氯化铵，称准至 0.01 克，溶于 200 毫升水中，加入 350 毫升氨水，稀释至 1000 毫升。 2)铬黑 T 指示剂
15、：称取 0.5g 铬黑 T，溶于 10ml 缓冲溶液中，并用无水乙醇稀释至 100ml，盖紧塞，此溶液保存的有效期约 1 个月。可用下法配置长期保存指示剂：称取 0.58 铬黑 T，加 1008 固体氯化钠于乳钵中研磨均匀，装于棕色瓶中。 3.3 计算 Ml Vl M V 式中 Ml 锌 标准溶液的摩尔浓度； . Vn 锌标准溶液得用量 (m1)； V 乙二胺四乙酸二钠标准溶液的用量 (m1)； 七、消毒剂浓度的测定 (稳定性二氧化氯含量的测定 ) 1 原理 稳定性二氧化氯在酸性溶液中与碘化钾起氧化作用，释放出一定量的碘，再以硫代硫酸钠标准溶液滴定碘，根据硫代硫酸钠标准溶液的消耗量计算出稳定性
16、二氧化氯的含量。 2 试剂 2.1 0.1N 硫代硫酸钠标准溶液 2.2 10硫酸溶液 2.3 10碘化钾溶液 2.4 1淀粉溶液 3 操作方法 取三个棕色带塞锥形瓶，分别依 次加入 10硫酸溶液 5mL、 10碘化钾溶液 6mL样品 1mL，用二次水冲洗瓶壁，迅速用塞子塞紧瓶口，在阴暗处放置 5 分钟，用 0.1N 硫代硫酸钠标准溶液进行滴定分析，分别记下消耗量，取三次分析值的平均值，作为分析结果 V。 4 计算 V N 0.01349 CL02 含量 100 m 式中 N 硫代硫酸钠标准溶液当量浓度 V 消耗硫代硫酸钠标准溶液毫升数 m 被测样体积 (mL) 注：根据消毒液浓度大小将滴定液
17、浓度相应稀释，方 法同上。 二、理化检测 一、饮料用水 1 电导率 1.1 原理 水样中的导电性在一定条件下与水样中所含的阳离子和阴离子的总量的多少成比例。因此可用电导仪来测定水样溶解性固体的浓度，测定水样中的电导率是根据插在水样的两个电极之间的电阻来完成的。 1.2 仪器 意大利产 EC215 电导仪 烧杯 (250 毫升 ) 1.3 操作 1.3.1 按说明书校正电导 1.3.2 将水样倒入烧杯中，插入电极，直接读数。 2.PH 值 水的 PH 范围是：酸性水 5.5 4.5 碱性水 8.5 9.5 弱酸性水 6.5 5.5 弱碱性 水 7.5 8.5 中性水 6.5 7.5 2.1 试纸
18、法 撕下一小片试纸，用干净的玻璃棒沾上少量水样滴在试纸的一端，使其呈色，在 2 3 秒内与标准色阶表比较。 (注意：不可将试纸直接投入水样中呈色；呈色后的试纸亦不可与标准色阶表接触比色。 ) 2.2PH 计法同果汁检测 (二 )1 3 碱度 3.1 原理 碱度是水介质与氢离子反应的定量能力，通过用强酸标准溶液将一定体积的水样滴定至某一 PH 值而定量确定。以酚酞为指示剂，用强酸滴定至终点时的反应，称为酚酞碱度，用 P 表示；滴定到酚酞终点后，加入甲基橙指试 液，继续用强酸滴定至终点时的反应称为总碱度，以 T 表示。 3.2 试剂 3.2.1 0.02moL 几盐酸标准溶液 3.2.2 0.1m
19、oL/L 氢氧化钠标准溶液 3.3 操作 3.3.1 吸取水样 100mL 于 250mL 三角瓶中，加 2 3 滴酚酞指示剂，水样呈红色 (若不呈色，该水样无酚酞碱度 )，用 0.02mol/L 盐酸标准溶液滴定至无色，记录消耗盐酸标准溶液的体积为 V1。 3.3.2 再加 2 3 滴甲基橙指示剂，继续用 0.02mol/L 盐酸标准溶液滴定至橙黄色到桔黄色为止，记录消耗盐酸标准溶液的毫升数为 V2。 3.4 计算 酚酞碱度 (DmmoL/L) V1 C 1000 V 总碱度 (TmmoL/L) (V1 十 V2) C 1000 V 式中： C 盐酸标准溶液的量浓度 V 水样的体积 V1 用
20、酚酞作指示剂时消耗盐酸标准溶液的毫升数 V2 用甲基橙作指示剂时消耗盐酸标准溶液的毫升数 4 总硬度的测定 4， 1 原理 水中的钙、镁浓度的总和称为总硬度。将水样的 pH 调到 10i0.1 后，以铬黑 T 为指示剂，用 EDTA 滴定，当滴定达到等当点 (终点 )时，溶液中的 Ca2+、 Mg2+被 EDTA 完 全络合，溶液就从酒红色变为蓝色。由消耗已知浓度的 EDTA 溶液的体积，则可计算水样的 Ca2、 Mg2 的总量。 4.2 试剂 4.2.1 0.01moL/LEDTA 标准溶液 4.2.2 PH 10 缓冲溶液 4.2.3 铬黑 T 指示剂 4.3 操作 用移液管取水样 50m
21、I 于 250mL 三角瓶内，向水样中加 l 1.5mL 缓冲液，用小勺向水样中加入米粒大小铬黑 T 粉末，摇动混匀后溶液出现紫色 (紫红色 )，用 0.05moL 几 EDTA 标准溶液滴定至溶液出现蓝色为止，准确记录 EDTA 消耗量后计算其结果。 4.4 计算 总硬度 (CaOmg/L) VED TA 0.05608 N 1000 V 式中： VED TA 消耗 EDTA 的毫升数 N EDTA 的 moL 几浓度 V 取水样 mL 数 二、果汁 (一 )原料 I 浓缩果汁 1 感官检验 具有其特有的风味、状态、色泽。 2 可溶性固型物 2.1 原理 在 20 用折光仪测量待测液的折光率
22、，并用折光率与可溶性固形物含量 的换算表查得或折光计上直接读出可溶性固型物含量。 2.2 仪器 手持折光计 (测量范围 0 90 ) 阿贝折光仪 2.3 试液制备 澄清果汁要充分混匀；浑浊制品用擦镜纸或纱布挤出 汁液后进行测定。 2.4 分析步骤 2.4.1 测定前按说明书校正折光计 2.4.2 分开折光计两面棱镜，用脱脂棉蘸乙醇擦净。 2.4.3 用末端熔圆之玻棒蘸取试液滴于折光计棱镜面中央 (注意勿使玻璃棒触及镜面 )。 2.4.4 迅速闭合棱镜，静置 lmin，使试液均匀无气泡，并充满视野。 2.4.5 对准光源，读取目镜视野中的读数 (手持糖量计 )。 2.4.5 对准光源，通过目镜观
23、察接物镜。调节指示规，使视野分成明暗两部分，再旋转微调旋钮，使明暗界限清晰，并使分界线在十字交叉点上。读取目镜视野中的百分数，并记录棱镜温度 (阿贝折 光仪 )。温度换算表见附录。 2.4.6 允许差 同一个样品两次测定值之差，不应大于 0.5。取两次测定的算术平均值作为结果，精确小数点后一位。 2.5 引用标准 GBl2295 90GBl2143.1 89 3 总酸的测定 3.1 原理 根据酸碱中和原理，用碱滴定试液中的酸，以酚酞为指示剂确定滴定终点，按碱液的消耗量计算试液中的总酸含量。 3.2 试剂 3.2.1 0.1N 氢氧化钠标准溶液 3.2.2 1酚酞指示剂溶液 3.3 试液制备 称
24、取 10.0g 样品于小烧杯中，用量筒定容至 50ml(如溶液浑浊需过滤 )。 3.4 分析步骤 3.4.1 取 5.0ml 试液置于 250ml 三角瓶中，加入蒸馏水 30 50ml 及 4 滴 1酚酞指示剂， 0.1N 氢氧化钠标准溶液滴定至微红色 30S 不褪色，记录消耗 0.1N 氢氧化钠标准溶液的消耗数 (V1)。 3.4.2 空白实验 用水代替试液，以下按 3.4.1 条操作。记录消耗 0.1N 氢氧化钠标准溶液的消耗数 (V2)。 3.4.3 计算 X C (V1 一 V2) K F 100 m 式中 X 每 100 克 (或每 100 毫升 )样品中酸的克数 g 100g 或
25、g 100m1； C 氢氧化钠标准溶液浓度 N； m 试液体积 m1； K 酸的换算系数 (苹果酸： 0.067；柠檬酸： 0.064)； F 试液的稀释倍数； 3.5 引用标准： GBl2292 90 4 氨基态氮的测定 4.1 原理 氨基态氮为两性电解质。在接近中性的水溶液中，全部解离为双极离子。当甲醛溶液加入后，与中性的氨基酸中的分解离型氨基反应，生成单氢甲基和二羟基诱导体，此反应完全定量进行。此时放出氢离子可用标准碱液滴定，根据碱液的消耗量，计算出氨基态氮的含量。 4.2 试剂 4.2.1 0.1N 氢氧化钠标准溶液： GB601 配置与标定。 4.2.2 0.05N 氢氧化钠标准溶液
26、：用 0.1N 氢氧化钠标准溶液当天稀释。 4.2.3 中性甲醛溶液：量取 200ml 甲醛溶液 (GB685)于 400m1 烧杯中，置于电磁搅拌器上，边搅拌边用 0.1N氢氧化钠标准溶液调至 PH 为 8.1。 4.2.4 30过氧化氢 (HG3 1082)。 4.2.5 PH 6.8 缓冲溶液：按 GB604 中“缓冲溶液制备”配置。 4.3 仪器设备 酸度计 (直接读数，测量范围 0 14pH，精度 0.lpH) 电磁搅拌器 玻璃电极和甘汞电极 4.4 试液的制备 加入浓缩倍数等量的水，使其成为果汁，并充分混匀，供测试用。 4.5 测定步骤 4.5.1 将酸度计接通电源，预热 30mi
27、n 后，用 PH6.8 的缓冲溶液校正酸度计。 4.5.2 吸取试液 A 毫升 (氨基态氮含量为 1 5mg)于烧杯中，加 5 滴 30过氧化氢。将烧杯置于电磁搅拌器上，电磁插入烧杯内试样中适当位置。 4.5.3 开动电磁搅拌器，先用 0.1N 氢氧化钠标准溶液慢慢中和试样中的有机酸。当 pH 达到 7.5 左右时，再用 0.05N 氢氧化钠标准溶液调至 pH 为 8.1，并保持 lmin 不变。然后慢慢加入 10 15m1 中性甲醛溶液。 lmin后用 0.05N 氢氧化钠标准溶液滴定至 pH 为 8.1。记录消耗 0.05N 氢氧化钠标准溶液的体积。 4.5.4 计算 X C V K 14
28、 100 m 式中： X 每 100g(100m1)试样中氨基态氮的毫克数， mg 100g(mg 100m1)； C 氢氧化钠标准滴定溶液的浓度， mol/L； V 加入中性甲醛溶液后，滴定试样消耗 0.05N 氢氧化钠标准溶液得体积， m1； m 试样的质量 g(m1)； K 稀释倍数； 14 lml lN 氢氧化钠标准滴定溶液相当于氮的克数。 同一样品两次测定结果的算术平均值作为结果，精确到小数点后第一位。 4.6 同一样品两次测定结果之差： 氨基态氮 10mg g，不得大于 2； 氨基态氮 10mg g，不得大于 5。 4.7 引用标准： GBl2143.2 89 5 L 一抗坏血酸的
29、测定 5.1 快速测定法 5.1.1 原理 还原型抗坏血酸能还原 I2 为 I，反应终点时用淀粉指示剂变蓝判定。 5.1.2 试剂 5.1.2.1 2草酸溶液 5.1.2.2 1.0mg m1 抗坏血酸标准溶液：准确称取抗坏血酸 0.100g，用 2草酸溶液溶解并定容至100ml，置冰箱内保存，保质期一周。 5.1.2.3 1.0淀粉溶液：称取可溶性淀粉 1.0g 加水 100m1 溶解，并煮沸透明冷却备用。 5.1.2.4 0.02N 碘标准溶液：称 2.54g 碘和 15g 碘化钾，加水溶解后，定容至 l 升储于棕色瓶中。 5.1.3 操作方法 5.1.3.1 用移液管吸抗坏血酸标准溶液
30、10m1 放于 150m1 三角瓶中，加 2草酸溶液，加 1.0淀粉溶液 lml，用 0.02N 碘标准溶液滴定至蓝色， 15s 内 不变色为止记下此数为 A。 5.1.3.2 用移液管吸果汁 20m1 于 250ml 三角瓶中，加 25m12草酸溶液，加 1.0淀粉溶液 lml，用 0.02N 碘标准溶液滴至蓝色为止 (若果汁为橙色、浑浊、由于与蓝色相加合，终点色泽为蓝褐色 )，并记上毫升数为 B。 5.1.4 计算 Vc B 50 A(以 mg 100m1 计 ) 5.1.5 允许差：为提高准确度， A、 B 两数值最好控制在 1lml 内。 5.2 紫外分光光度计法 5.2.1 原理 紫
31、外快速测定法是根据维生素 C 具有对紫外产生吸收和对碱不稳定性，于 243nm 处测定样品液与碱处理样 品液两者的消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中维生素 C 的含量。 5.2.2 试剂 抗坏血酸标准溶液的配制：精确称取抗坏血酸 100mg，加 2m110盐酸溶液，加蒸馏水定容至1000m1，混匀。此液浓度为 100g ml。 5.2.3 测定方法 5.2.3.1 标准曲线的制作：取带塞刻度试管 8 支并编号，分别加入不同量抗坏血酸标准液。以蒸馏水为空白，在 243nm 处测定标准系列抗坏血酸溶液的吸光值。以抗坏血酸的含量 (118)为横坐标，以相应的吸光值为纵坐标作标准曲线。 5.2
32、.3.2 样品提取：将果蔬样品洗净、擦干 、切碎、混匀，称取 5.00g 于研钵中，加入 2.5m11盐酸溶液，匀浆，转移到 25m1 容量瓶中，定容至刻度。若提取液澄清透明，则可直接取样分析，若有浑浊现象，则可离心 (1000r min， 10min)取上清液分析。 5.2.3.3 样品测定： 样品测定：取 0.1 0.2ml 提取液，放入盛有 0.2 0.4m110盐酸溶液的 10m1 容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白，在 243nm 处测定其光值。 碱处理液的制备与测定：分别取 0.1 0.2m1 提取液、 2m1 蒸馏水和 0.6 0.8m11mol 1 氢氧化钠溶液
33、依次放入 10m1 容量瓶中，混匀， 15min 后加入 0.6 0.8m110盐酸溶液，混匀，并定容至刻度。以蒸馏水为空白，在 243nm 处测定其消光值。 5.2.4 计算 维生素含量 ( g g) m V Vl m 式中 m 从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量 (11g) Vl 测定时吸取样液提取液的体积 (m1) V 样品提取液总体积 (m1) m 样品质量 (g) 5.2.5 说明 5.2.5.1 根据待测提取液与待测碱处理液的消光值之差，查 维生素 C 标准曲线或直接以待测碱处理液为空白，测出待测提取液的消光值，查标准曲线，两者均可。 5.2.5.2 标准抗坏血酸液要在使用前临时配制
34、。 II 原汁 1 感官检验：应有该果汁特有的风味、状态、色泽。 2 检验方法 2.1 试样制备：混匀后直接取样。 2.2 分析步骤同 II (二 )成品 1PH 值的测定 1.1 原理 当以 pH 玻璃电极为指示电极，甘汞电极为参比电极，插入水样中时，便构成电池反应，两者之间产生一个电位差。由于参比电极的电位是固定的，因而该电位差的大小取决于水样中 (氢离子活度的负对数即为 pH 值 )。因 此可用电位测定仪测定其电动势，再换算成 PH，一般可直接用 PH计读得 PH 值。 1.2 仪器： F 一 20PH 计 1.3 试剂 1.3.1 混合磷酸盐 (6.86pH 25 )标准缓冲溶液 1.
35、3.2 邻苯二甲酸氢钾 (4.00pH 25 )标准缓冲溶液 (用不含二氧化碳的水配制，并储存在塑料瓶中，可稳定 l 至 2 个月。 ) 1.4 仪器操作 1.4.1PH 值校准 1.4.1.1 将已活化的电极插入仪器下端的插座中，并将电极用去离子水冲洗用滤纸吸干后，将复合电极插入标准缓冲溶液中，电极稍做搅动，停留约 1 分钟左右。 1.4.1.2 按“”键 ，再用键将温度调至被测溶液实际的温度。 1.4.1.3 按“ pH/MV”键，左下角标记“ PH”亮，为“ pH”功能。 1.4.1.4 按“ CAL”键 2 秒钟，当标记闪烁表示进入标准状态，释放该键。 1.4.1.5 校准完后，“ P
36、H”停止闪动。 1.4.1.6 将电极从标准液中取出，常规清洗后，即可放入另外一个标准溶液进行第二点校正，即重复上述步骤，直到校正完毕。两点校正后，仪器就可进行正常测量操作了。 1.4.2pH 值测量 校准完后，把电极用去离子水冲洗干净，用滤纸吸干，然后把复合电极插入被测溶液中，稍做搅动， 此时等待读数稳定后，即可记录 pH 值。 1.4.3 电池更换 当电池电压低于 6.5V 时，显示屏左上出现“ 1”符号，提示用户电池电压己低于正常工作电压，虽还能工作一段时间，但应尽快更换新电池。 2 净容量检验 2.1 仪器 容量瓶 (1000 毫升或 250 毫升 )温度计 (0 100 ) 2.2
37、检测步骤 2.2.1 将待测液温度调至 20。 2.2.2 将样液倒入容量瓶内，若液面超过刻度线，则用吸量管吸出多余样液并读其刻度数；若液面低于刻度线，则用吸量管补足相同样液并读其刻度数。 3 可溶性固形物检测 同 (一 )2 4 L 一抗坏 血酸的检测同 (一 )5 5 总酸度检测 5.1 原理 根据酸碱中和原理，用碱滴定试液中的酸，以酚酞为指示剂确定滴定终点，按碱液的消耗量计算试液中的总酸含量。 5.2 试剂 5.2.10.1N 氢氧化钠标准溶液 5.2.2 1酚酞指示剂溶液 5.3 分析步骤 5.3.1 取 5.0ml 试液置于 250ml 三角瓶中，加入蒸馏水 30 50ml 及 4
38、滴 1酚酞指示剂， 0.1N 氢氧化钠标准溶液滴定至微红色 30S 不褪色，记录消耗 0.1N 氢氧化钠标准溶液的毫升数 (V1)。 5.3.2 空白实验 用水代替试液，以下按 5.3.1 条操作。记录消耗 0.1N 氢氧化钠标准溶液的毫升数 (V2)。 5.4 计算 X C (Vn Vz) K F 100 m 式中 X 每 100 克 (或每 100 毫升 )样品中酸的克数 g 100g 或 g/100m1 C 氢氧化钠标准溶液浓度 N m 试液体积 ml K 酸的换算系数 (苹果酸： 0.067；柠檬酸： 0.064) F 试液的稀释倍数 5.5 引用标准： GBl2292 90 三、茶饮
39、料 (一 )原料 1 取样规则： 1.1 取样条件： 取样工作应在清洁、干燥、光 线充足的室内进行，避免日光直接照射，防止外来杂质的混入；取样用具和器皿必须清洁、干燥、无异味；盛器应密闭性良好。 1.2 取样方法： 1.2.1 取样件数 原料数量 (件 ) 取样数量 (件 ) 15 1 150 2 50 件以上 每增加 50 件 (不足 50 件按 50 件计 )增加 l 件 500 件以上 每增加 100 件 (不足 100 件按 100 件计 )增加 1 件 1000 件以上 每增加 500 件 (不足 500 件按 500 件计 )增加 1 件 注：在取样时如果发现茶叶的品质、包装或堆存
40、情况等有异常情况时，可酌情增加或扩大取样数量，以保证样品 的代表性，必要时应停止取样。 1.2.2 取样程序 在所取定的样品从其上、中、下部用取样器取出 500g，将所取的样品混合后采取四分法逐步分至500 1000g，作为平均样品分装于有盖的 洁净的广口瓶中，贴好标签，供检验用。 1.2.3 操作方法 (四分法 ) 将原始的样品充分混和均匀后堆放在干净的玻璃板上，压成厚度为 3cm 以下的圆形，并划成“十”字线。将样品分成四份，取两对角的二份，再如上混合，分为四份，取对角的二份。 (所取样品应当及时送往检验室，最迟不得超过 24h.) 3 填写取样报告 茶原料取样报告 品种： 取样时间： 项
41、目 内 容 批号 供货商 包装质量 数量 开箱感官 碎渣感官 气味 1.4 引用标准 GB8302 87 2 滋味评审： 采用茶水比例为 1： 100；取 3g 茶用 300m1 沸水冲泡，沸水应当采用纯净水。 8min 左右，首先闻茶汤气味，然后观察茶汤色泽，最后品尝茶汤滋味。填写报告单。 3 茶多酚含量测定： 3.1 原理 茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫兰色络合物，用分光光度法测定其含量。 3.2 仪器 实验室常规仪器及下列各项：分析天平 (0.0001 克 )、分光光度计。 3.3 试剂制备 3.3.1 酒石酸亚铁溶液 称取 1g(准确至 O.0001g)硫酸亚铁 (GB664 77
42、)和 5g(准确至 0.0001g)酒石酸钾钠 (GBl28881)，用水溶解并定容至 1L(溶液应当避光，低温保存，有效期 个月 )。 3.3.2 PH7.5 磷酸盐缓冲溶液 3.3.2.1 1 15M 磷酸氢钠：称取 23.377g 磷酸氢二钠 (GBl263。 77)，加水溶解后定容至 1L。 3.3.2.2 1 15M 磷酸二氢钾：称取 9.078g 磷酸二氢钾 (GBl274 77)，加水溶解后定容至 lL。 3.3.2.3 取上述 l 15M 的磷酸氢钠溶液 85m1 和 1 15M 的磷酸二氢钾溶液 15m1 混合均匀。 3.4 样品处理： 先用磨碎机将少量试样磨碎，弃取，再磨碎
43、其余部分。若水分含量太高则应当进行干燥处理 (烘温不超过 100 )后待样品冷却，将样品装入干燥容器，并立即密封。 3.5 试液制备： 称取 3g(准确至 0.0001g)磨碎试样于 500m1 锥形瓶 (500m1)中，加沸蒸馏水 450m1，立即移入沸水浴 (恒温水浴 )中，浸提 45min(每隔 10min 动一次 )。浸提完毕后立即趁热减压过滤。滤液移入 500ml容量瓶中，残渣用少量热蒸馏水洗涤 2 3 次。并将滤液滤入上述容量瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至刻度。 3.6 分析方法 准确吸取上述试液 lml，注入 25m1 的容量瓶中，加水 4ml 和酒石酸亚铁溶液 5m1 充分混合，再
44、加入 PH7.5 的缓冲液至刻度，用 10mm 比色皿在波长 540nm 处，以试剂空白溶液作为参比，用721 分光光度计测定吸光度 (A)。 3.7 计算公式 A 1.957 2 L1 茶多酚 ( ) 100 100 L2 M m L1：试液总量， m1. L2：测定时用液量， m1. M：试样的质量， g m：试样干物质含量百分率， A：试液的吸光度 3.8 重复性 . 如果同一样品两次测定值之差，每 100g 试样不得超过 0.5g,则取两次测定的算术平均值作为结果。 (测定结果取小数点后一位 ) 3.9 引用标准 GB8313 87 4 咖啡碱测定： 4.1 原理 茶叶中的咖啡碱易溶于
45、水， 除去干物质后，用特定波长测定其含量。 4.2 试剂制备： 4.2.1 碱性乙酸铅溶液：称取 50g 碱性乙酸铅 (HG3 1396 81)，加水 100ml， 静置过夜。 4.2.2 盐酸 (GB 622。 77)： 0.01N 溶液，取 0.9m1 盐酸，用水稀释至 lL，摇匀。 4.2.3 硫酸 (GB 625 77)： 9N 溶液，取硫酸 250m1，用水稀释至 1L，摇匀。 4.2.4 咖啡碱标准液：称取 100mg 咖啡碱 (纯度不低于 99 )溶于 100m1 水作为母液，准确吸取 5ml，加水至 100ml 作为工作液 (1m1 含咖啡碱 0.05mg)。 4.3 试液制备
46、 称取 3g(准确至 O.0001g)磨碎试样于 500m1 锥形瓶 (500m1)中，加沸蒸馏水 450m1，立即移入沸水浴 (恒温水浴 )中，浸提 45min(每隔 10min 摇动一次 )。浸提完毕后立即趁热减压过滤。滤液移入 500ml 容量瓶中，残渣用少量热蒸馏水洗涤 2 3 次。并将滤液滤入上述容量瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至刻度。 4.4 测定方法 用移液管准确称取试液 20ml 移入 250ml 容量瓶中，加入 10m10.01N 盐酸和 2m1 碱性乙酸铅溶液，用水准确稀释至刻度，充分混匀，静置澄清过滤，准确吸 取滤液 50m1，注入 100ml 容量瓶中，加入 0.2m19N
47、 硫酸溶液，加水稀释至刻度， .混匀，静置澄清过滤。用 10m1 比色杯，在波长274nm 处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度 (A)。 4.5 咖啡碱标准曲线的制作： 分别吸取 0、 5、 10、 15、 20、 25、 30m1 咖啡碱工作液于一组 100m1 容量瓶中，各加入 4.0m1 盐酸溶液用水稀释至刻度，混匀，用 10mm 石英比色杯，在紫外分光光度计上选择狭缝 0.1 0.18mm，在波长 274nm 处，以试剂溶液作为参比，测定吸光度 (A)。将测得的吸光度与对应的咖啡碱浓度绘制 标准曲线。 4.2.1 碱性乙酸铅溶液：称取 50g 碱性乙酸铅 (HG3 1396 81)，
48、加水 100ml，静置过夜。 4.2.2 盐酸 (GB 622-77)： 0.01N 溶液，取 0.9m1 盐酸，用水稀释至 lL，摇匀。 4.2.3 硫酸 (GB 625 77)： 9N 溶液，取硫酸 250m1，用水稀释至 1L，摇匀。 4.2.4 咖啡碱标准液：称取 100mg 咖啡碱 (纯度不低于 99 )溶于 100m1 水作为母液，准确吸取 5ml，加水至 100ml 作为工作液 (1m1 含咖啡碱 0.05mg)。 4.3 试液制备 称取 3g(准确至 O.0001g)磨碎试样于 500m1 锥形瓶 (500m1)中，加沸蒸馏水 450m1，立即移入沸水浴 (恒温水浴 )中，浸提 45min(每隔 10min 摇动一次 )。浸提完毕后立即趁热减压过滤。滤液移入 500ml 容量瓶中，残渣用少量热蒸馏水洗涤 2 3 次。并将滤液滤入上述容量瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至刻度。 4.4 测定方法 用移液管准确称取试液 20ml 移入 250ml 容量瓶中，加入 10m10.01N 盐酸和 2m1 碱性乙酸铅溶液，用水准确稀释至刻度，充分混匀，静
