1、从土壤中分离产淀粉酶的芽孢杆菌,巩固微生物分离纯化、细菌保藏等技能,对所学习过的微生物学实验方法进行综合技能训练,培养综合利用微生物学、生物化学等相关知识,自行设计、实施并判断实验结果的能力,学习掌握从环境中分离产淀粉酶菌株以及菌株初步鉴定的方法,实验目的,获得产淀粉酶的菌株并对其进行初步的鉴定,实验材料,实验材料,产淀粉酶的芽孢杆菌含量在不同土壤中含量也不同,实验前进行预埋工作,能使土壤中产淀粉酶的细菌含量增加。待实验前取样即可,在只用淀粉充当碳源的选择培养基中,只有能产生淀粉酶利用淀粉的菌体能成为优势菌种,从而得到富集,实验原理,在已确定的芽孢杆菌情况下,在菌落处滴加碘夜来观察透明圈情况。
2、,细菌富集一段时间后,生长环境不利,会产生芽孢,再在80-90 温度下杀死菌体,可使芽孢得到富集,配无菌水,并将其分装 到7个试管中,每只9ml。(7个管),目的菌株的富集,1、取10g土壤加入250ml烧杯中,再加入90ml无菌水,充分震荡,制成土壤混悬液。 2、在37摄氏度摇床(200r/min)培养箱中培养23个小时,使菌体充分扩散到无菌水中。 3、在80 水浴锅中加热1015分钟,杀灭菌体,使芽孢得到富集. 4、静置,取上清至富集培养基的锥形瓶中。在37摄氏度摇床(200r/min)培养箱中培养一天,使菌体富集且产生大量芽孢。,将富集后的芽孢菌液上清分别稀释 101、102、103、104、105 、106、107倍,分别取102 、104 、105 、106、107菌液0.1ml均匀涂布在10个淀粉培养基上,在37摄氏度培养箱培养2天,平板培养基表面便形成了若干分散的单菌落。,选择性分离,在单菌落处滴加碘液,挑取有透明圈的单菌落划线分离,在37的培养箱中培养2天。,初筛,鉴定,1、将单菌落点种落接到淀粉平板上纯培养,在37摄氏度培养2天。 2、在培养后的平板上滴加碘液,用直尺测量透明圈的大小。,