1、小白鼠实验性缺氧,哈尔滨医科大学机能实验学中心,病 例,某患者,女,45岁,误将亚硝酸钠白色粉末晶体当做 食盐食入约1 g,出现呕吐、腹痛、呼吸困难,抽搐、昏迷, 呼吸频率加快且幅度显著增加。心率90次/分,律不齐,各瓣膜 听诊区闻病理性杂音,电图显示:窦性心动过缓、频发室性早搏、 完全性右束支传道阻滞,出现室颤。皮肤粘膜的颜色呈咖啡色, 血液颜色变为暗红色,动脉血氧分压PaO2为6.3kPa, 动脉血氧容量CO2max为28.8 mmol/L,动脉血氧含量CaO2为 19.93 mmol/L,动脉氧饱和度SO2为55%。 临床诊断为严重亚硝酸盐中毒性缺氧。对此患者进行紧急抢救, 给予美兰(亚
2、甲蓝)20mg以50葡萄糖40ml稀释后静脉缓注, 同时予高流量吸氧,大剂量维生素C,ATP,辅酶A,细胞色素C, 输葡萄糖液,速尿静脉注射,抢救成功。,思 考,1.什么是缺氧?常用的血氧指标标准是什么?,2.常见缺氧类型有哪几种?发生的原因有哪些?,3.本病例所述的亚硝酸钠中毒事件属于那种类型的缺氧?如何解救,4.缺氧时呼吸为什么加深加快?,思 考,5.缺氧对机体的影响如何?,6.亚硝酸钠中毒性缺氧的解救为什么要给予大量维生素C和葡萄糖?,7. CO中毒原性缺氧的症状,机理以及如何解救?,8. 氧中毒对机体的影响如何?,9.机体在缺氧时表现为怎样的耐受性?,氧代谢四大环节: 外界氧气的含量与
3、肺组织的摄取氧 血液系统的携带氧 循环系统的运输氧 组织细胞的利用氧 缺氧:由于组织氧的供应减少或对氧的利用障碍, 而引起机体代谢、功能和形态结构异常变化的病理过程。,原 理,吸入气中氧分压降低低张性缺氧 肺通气、换气功能障碍静脉血分流入动脉 血液性缺氧 血红蛋白含量减少、供氧不足血红蛋白结构、功能异常循环性缺氧 全身循环功能障碍局部循环功能障碍线粒体功能受抑制用氧障碍 组织性缺氧 呼吸酶合成减少线粒体损伤,缺氧的分类,缺氧时体征及血氧改变,呼吸运动的变化规律(频率、幅度、节律) 循环系统的变化规律(心率、心肌收缩力,心输出量) 皮肤粘膜颜色的变化规律(紫绀、苍白等) 存活时间的变化 中枢神经
4、系统的变化规律 血氧变化,血氧分压(PO2):溶解于血液的氧分子所产生的张力;血氧容量(CO2max):100ml血液中的血红蛋白,在氧分压为13.3kPa(100mmHg),温度为38时,所能结合氧的最大毫升数;血氧含量(CO2): 标准状态下,100ml血液中实际含有的氧量(毫升数);血氧饱和度(SO2) :Hb的氧饱和度,即Hb结合氧的百分数约等于血氧含量和血氧容量的比值。,常用血氧指标,各种类型缺氧的血氧特点,实验目的,复制低张性与血液性缺氧的动物模型。 观察低张性缺氧时,不同神经机能状态对机体缺氧耐受性的影响。 观察一氧化碳及亚硝酸盐中毒对机体的影响,并了解相关急救知识。 掌握缺氧的
5、分类及不同类型缺氧的特征。,实验动物与药品器材,成年小鼠,雌雄不限; 钠石灰、甲酸、浓硫酸、5亚硝酸钠、1亚甲蓝、生理盐水 ; 密封广口瓶、一氧化碳发生装置、刻度吸管、1ml注射器及针头、酒精灯等。,观察指标,动物一般状况呼吸频率和深度存活时间皮肤粘膜颜色改变,乏氧性缺氧(1)选取体重相近的小鼠3只。分别做 红(甲)、 蓝(乙)、 无(丙)标记分别腹腔注射 1%咖啡因、 2%乌拉坦、生理盐水(注射剂量:0.1ml/10g)(2)安静15分钟,放入广口瓶中(已加钠石灰少许) 观察记录小鼠 缺氧前呼吸次数、深度和粘膜颜色等指标 塞紧瓶塞,开始记录存活时间,并每 3min重复观察其他指标1次,如有其
6、他变化,随时记录,直至动物死亡。(3)动物死亡后立即检测耗氧量,并计算耗氧率:耗氧率(R)=总耗氧量(A)/体重(W)/存活时间(T),实验方法,血液性缺氧1. 一氧化碳中毒性缺氧CO与血红蛋白的亲和力O2与血红蛋白的亲和力,碳氧血红蛋白(HbCO)不能与O2结合,还可抑制红细胞的糖酵解,使2,3-DPG生成减少,氧离曲线左移,HbO2中的O2不易释放。(1)准备一氧化碳发生装置 将1只小鼠放入广口瓶中,观察其正常表现后与一氧化碳发生装置连接 用刻度吸管取甲酸3 ml放于试管内,沿试管壁缓慢加入浓硫酸2 ml,塞紧瓶口(间断加热) 观察各项指标。 (2)当小白鼠出现中毒表现(痉挛、跌倒)时,立
7、即关闭CO发生装置,迅速将小白鼠放入通风处进行抢救。待小白鼠恢复正常后,再重复上述实验步骤直至死亡,并记录存活时间。,实验方法,2. 亚硝酸钠中毒性缺氧亚硝酸盐可使血红素中的二价铁氧化成三价铁,形成高 铁血红蛋白,与羟基结合牢固,失去结合氧的能力。选取体重相近的小鼠2只,观察正常指标 腹腔注射5亚硝酸钠0.3 ml 立即取其中 1只动物腹腔内注入l亚甲蓝溶液0.3 ml;另 1只立即注入生理盐水 0.3 ml 观察各项指标,比较2只小鼠的表现及死亡时间。,实验方法,注意事项,广口瓶一定要密闭。 进行亚硝酸钠中毒实验时,要事先用注射器准备好抢救药品,以便及时解毒。 亚甲兰勿污染环境。 浓硫酸是强
8、腐蚀药品,加液时要小心。 给小鼠腹腔注射时,应稍靠左下腹,勿损伤肝脏,但也应避免将药液注入肠腔或膀胱。,实验动物和器材,实验动物,小白鼠,捉拿小鼠的方法,腹腔注射方法,(一)低张性缺氧动物实验【基本体征】,注射乌拉坦的小白鼠对缺氧的耐受性最强。,注射咖啡因的小白鼠对缺氧的耐受性最差。,动物皮肤、黏膜出现明显的紫绀;,呼吸加深加快到变浅边慢,最后呼吸停止。,出现明显的烦躁不安,最终动物死亡。,Discuss and Analysis,动物所处的环境中空气氧消耗出现氧浓度降低。,亚硝酸钠中毒时动物皮肤、黏膜出现紫绀;,CO中毒时动物皮肤、黏膜出现明显的樱桃红;,呼吸相对平稳,加深加快出现较晚,最后呼吸停止。,出现明显的烦躁不安,最终动物死亡。,谢谢,