1、,沙门氏菌检验方法,沙门氏菌检验方法,沙门氏菌,1885年沙门氏菌等在霍乱流行时分离到猪霍乱沙门氏菌，故定名为沙门氏菌属。沙门氏菌属有的专对人类致病，有的只对动物致病，也有对人和动物都致病。沙门氏菌病是指由各种类型沙门氏菌所引起的对人类、家畜以及野生禽兽不同形式的总称。感染沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染食品，可使人发生食物中毒。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中，沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。沙门氏菌病是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一，其病原沙门氏菌属肠道细菌科，包括那些引起食物中毒，导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。它们除可感染人外，还可感染很多动物包括哺乳类、鸟、爬行类、鱼、
2、两栖类及昆虫。人畜感染后可呈无症状带菌状态，也可表现为有临床症状的致死疾，它可能加重病态或死亡率，或者降低动物的繁殖生产力。,检验方法,一、仪器和材料1.冰箱：04 2.恒温培养箱：361，423.显微镜：10100 4.高压灭菌器5.均质器 6.架盘药物天平：0g500g，精确度0.5g7.灭菌广口瓶：500ml 8.灭菌锥形瓶：500ml、250ml9.灭菌吸管：10ml 10.灭菌培养皿：90mm11.灭菌小吸管：内径3mm50mm12.灭菌毛细管,二、培养基和试剂1.缓冲蛋白胨水(BP)2.氯化镁孔雀绿增菌液(MM)3.四硫酸钠煌绿增菌液(TTB)4.亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)5.亚
3、硫酸铋琼脂(BS)6.DHL琼脂7.HE琼脂8.TSI琼脂9.蛋白胨水、靛基质试剂10.尿素琼脂11.氨基酸脱羧酶试验培养基12.沙门氏菌因子血清,三、操作步骤,1.准备工作 配制实验所需的缓冲蛋白胨水、亚硒酸盐胱氨酸培养基（无需灭菌）、HE培养基、三糖铁培养基等，并将准备好的均质杯、吸管、培养皿、大试管等一起灭菌。2.前增菌 在无菌环境下，称取25g待检样品放入盛有225ml灭菌好的缓冲蛋白胨水中，然后放到361的恒温培养箱内进行前增菌4-6h;3.分离培养 将增菌培养液摇匀，以无菌操作，用直径3mm的接种环挑取一环，划线于表面无凝结水的HE和SS琼脂平板上，于361分别培养18-24h（DHL、HE、SS）或40h48h（BS）。观察各个平板上有无典型或可疑沙门氏菌属的菌落。如无典型或可疑菌落，应再继续培养242h。然后观察培养的平板（黄色的菌落是大肠杆菌；蓝绿色或蓝色，产硫化氢，菌落中心黑色或几乎全黑色为可疑沙门氏菌）。,沙门氏菌属各群在各种选择性琼脂平板上的菌落特征,thank you!,
