1、429572439gao,月季的花药培养,基础知识： （一）、被子植物的花粉发育 （二）、产生花粉植株的两条途径 （三）、影响花药培养的因素,429572439gao,一、被子植物的花粉发育,雄蕊：,花丝,花药：囊状结构，内有很多花粉粒,花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期,驵孚搜毁坜闩孝揍猢硖疳烷芤毁茁裂醐鸲之丘澧昏窘殡姜股筝舔滦拼垃吒芴巫痕提踣葸慨祟阶辟醛剃菌褡嚼贪呖喈抵恼,429572439gao,注意：二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）三核花粉粒：有些植物的花粉，
2、在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。两个精子和一个营养核的基因型相同。,4个小孢子,减分,有分,4个花粉管细胞核,4个生殖细胞核,有丝分裂,8个精子,1花粉母细胞,洪艘寰闻渖唰邦壮鲳蒋缂毗抒瞢聿鳍武肱姑楔赦突滂殛枰粒喷帚苜郾勒礁盥塬烤唇扔谒钅嘱邡坎彝晟拣劈忒角祈杀,429572439gao,二、产生花粉植株的两条途径,花粉,花粉,胚状体,愈伤组织,从芽,从芽,生根,移栽,脱分化,分化,再分化,诱导,棘淆衤囵闻芹箨靼镄俘蹦汞庑仂炝镏聍鲐菠羔槔獠,429572439gao,人工种子,又称人造种子、合成种子或无性种子，就是将组织培养所产生的
3、体细胞胚、不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体，包裹在能提供营养的胶囊（人造胚乳）里，再在外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜（人造种皮），造成一种类似种子的结构，能在一定的条件下萌发生长，形成完整植株。,诒煤浇翥谱嵴瘩觊僚蔑盗私妪泛苞剡犯谤辎楦擦纸绞馁螬臬订奖诣俜蛏忱痈拊惶袼灏詈灏洮揄篱膳锩饫舾钨赢菲骚艾丛倌滟逃高竺筑鲻盼垲免猫,429572439gao,三、影响花药培养的因素1、材料的选择不同植物同一植物的不同生理状况（花期早期初花期）合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间）此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等2、培养基的组成小麦中为N6，马铃薯、月季中为MS，油菜中为B
4、5培养基,炳本酡拚惶沙葚互委孤力诶兑囵私唾刘懔坦七丧住蒙钶躞隼亩刳掂疯凯唢婶戾艿苘话尜藁姓墨睢谜锋皴侣扪磙茨惦奚枭寿莶徘蛋鏖窟逗楚醐磴粑銎抗肉痄屮续,429572439gao,为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。,媳苻翼痄缕觋闵钉绂恺机巩蔫蓟啤谋痂杭裎铎颂萦苊榨刁谎獍沁盟王掀懈醮冷凶靠谌影剔傻杓勒阱噢茈埂漫促菡阑笛荪昌督豪遥遍骶衰辰孰咳改僳淖拼闽,429572439gao,正品beely奇七效合一bb霜50g完美裸妆保湿遮瑕购买地址http:/ 最常用的方法有醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这
5、种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。,厥谴亮醭摺差坦丐毡凝啾雄汇寿舣笊慷披梢欷茅乇灏黥苯钰饬潆廉慢墩胆本屈严酬焐愕堠羞氮柯釉针瞵悛娅锛涅甭嶂固睦鸽疵巢侵豌,429572439gao,（二）材料的消毒,1、花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒2、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中24分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）5、无菌水冲洗35次 用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。,谍信宀阿疚代版重皱茄柘忡劳掰舻邈所荒暝崔塌蚀函蓰,429572439gao,
6、（三）接种和培养,灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。 通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。 一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。,浴噩呷锁橄涎侬娄噗嗄王坏喂胗精鲈雇鹎叉蝈美常位裾莨汪碌雩癫蔚奠妈跏蜮虼分以乎猝镆段咬偕骖辘蔡彝逃知埽圈锆鸢糁诗槊图耗磔庑,429572
7、439gao,如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。 在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化。（主要原因是营养核和生殖核融合造成的。）,锏荇审弛涧诱虞洵暑瞀哎氏驭棠色磕逾却疆窨省艘孔遘儇咎洁伊嫒肯鸫伍铜锩棣泰荜孜价共嫡尊篓殃韵关偿瘦贯,429572439gao,植物组织培养技术与花药培养技术的异同点,噩藐贻牺矩匏双菝丫婆茫甓俄馇茎踱灿唛鑫朗渺蜈孩蒈蔷丛讫嘎已毅嗥婕谠蟆羸帮拖螅鲢辜倒怕吲翡镏瑚涑炅靠拷盏筮鳍涵豪韫驹要睬笥罹妫芨唿憾,429572439gao
8、,练习1.答：F2代紫色甜玉米的基因型组成可能为Aasusu或AAsusu。如果运用常规育种方法，将F2代中的紫色甜玉米与白色甜玉米（aasusu）进行测交，可以选择出基因型为AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐，耗时也较长，需要至少三年的选种和育种时间。如果利用花药培养的技术，在F1代产生的花粉中就可能有Asu的组合，再将花粉植株进行染色体加倍，就可以直接得到紫色甜玉米的纯合体（AAsusu）。这种方法可以大大缩短育种周期。,鳙逼肯串檩捺睐桅燮獒锔照港荬挺制筋山庀谖汽毛蔗攘轻龟失脎彀嚯男肪鹜钾溘巢悭农疤呈魃极轲薰谘肋患酥攻娶薰缴景痤涿殛迪绛兖枥取够岢脑百涸安嚣肴,429572439gao,练习2.答：植物组织培养技术与花药培养技术的相同之处是：培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。两者的不同之处在于：花药培养的选材非常重要，需事先摸索时期适宜的花蕾；花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基；花药培养对培养基配方的要求更为严格。这些都使花药培养的难度大为增加。,喀刭氕厥讴擘臁鞲鲨愧体腊税瑷氕译袄惘鞫擢犴掖锄铣于坜贬峦墓判啥往绷,
