1、上海源奇 http:/ 电话：021-37196264 本检测结果仅供科研参考上海澳斯泰医学检验所基因检测报告患者姓名： 样品编号： 送检单位： 委 托 人： 联系电话： 委托日期： 2014 年 11 月 21 日 接收日期： 2014 年 11 月 24 日 报告日期： 2014 年 11 月 26 日 1样本提供者信息样本编号： 病 理 号：病 区：床 号：19科 室：胸外科姓 名： 性 别：女 出生日期：1950 年 7 月 22 日 临床诊断：样本种类：新鲜组织样品数量：1检测项目内容检测项目 1：肿瘤个体化治疗疗效相关融合基因检测1. 检测内容：EML4-ALK 融合基因2. 检测
2、方法：实时定量逆转录聚合酶链反应 (QRT-PCR)3. 主要材料：ABI 荧光定量试剂盒 源奇生物肿瘤相关融合基因检测试剂盒4. 主要设备：ABI 7300 荧光定量 PCR 仪 检测项目 2：肿瘤个体化治疗疗效相关基因突变检测1. 检测内容：EGFR 基因突变2. 检测方法：DNA 测序法、ARMS 法3. 主要材料：ABI PCR 测序试剂盒，源奇生物荧光+测序相关基因检测试剂盒4. 主要设备：ABI 3730XL DNA 测序仪、ABI 7300 荧光 PCR 仪2检测项目及结果检测项目 检测结果 相关药物名称/检测意义EML4-ALK 融合基因 阴性 克唑替尼EGFR Exon19
3、基因突变EGFR Exon20 基因突变EGFR Exon21 基因突变吉非替尼/厄洛替尼/埃克替尼实验员: 报告人： 复核人： 报告时间：2014年11月26日 注：此检测结果只对本次送检样本负责。由于肿瘤疾病的发生和发展是动态过程，因此若是样品采集一定间隔时间后（3 个月以上）的跟踪检测或者进行治疗方案的评估，建议遵医嘱。注：以上分析仅用于评估个体化用药的适用程度，具体的治疗方案须由临床主治医生决定。如有任何疑问，请联系相关负责人。3检测结果附图及解读一、肿瘤相关融合基因检测结果ABL-内参EML4-ALK 融合基因阳性对照阴性对照 标本42、EGFR 基因突变检测结果EGFR Exon1
4、9 基因EGFR Exon20 基因阳性对照标本阴性对照阳性对照标本阴性对照5EGFR Exon21 基因EGFR 790 基因内参 基因阳性对照标本 阴性对照阳性对照标本阴性对照6附：参考资料1. EGFR信号通路及通路上各靶标基因突变简介表皮生长因子受体（EpidermalGrowthFactorReceptor，EGFR）主要位于细胞膜上，属受体酪氨酸激酶家族。EGFR被配体激活后启动胞内该通路上的信号传导，经过细胞质中衔接蛋白、酶的级联反应，调节转录因子激活基因的转录，指导细胞迁移、黏附、增殖、分化和凋亡 1。EGFR下游的信号转导通路主要有两条（如下图）：一条是Ras/Raf/MEK
5、/ERK-MAPK通路，而另一条是PI3K/Akt/mTOR通路 2。研究表明，在许多实体肿瘤中存在EGFR信号转导通路上的基因发生体细胞突变及表达异常，从而导致肿瘤细胞无限制的扩增和迁移。因此，近年以EGFR和EGFR信号通路中关键的组分为靶标的分子靶标检测及靶向治疗成为国际肿瘤界个体化治疗关注的焦点。参考文献1. Cunningham D et al. N.Engl J Med. 2004;351:33745.2. Stintzing S et al. Dtsch Arztebl Int. 2009;106:2026.7EGFR基因目前，针对EGFR所开发的分子靶向药物主要分两类:1）小分
6、子酪氨酸激酶抑制剂(TKI)，如吉非替尼（Gefitinib，也称为易瑞沙/Iressa，阿斯利康）和厄罗替尼（Erlotinib，也称为特罗凯/Tarceva，罗氏制药)，抑制EGFR胞内区酪氨酸激酶活性；2）单克隆抗体(mAb)，如西妥昔（Cetuximab，也称为爱必妥/Erbitux，默克公司）和帕尼单抗（Panitumumab，也称为维克替比/Vectibix，安进公司)，与EGFR胞外区结合，阻断依赖于配体的EGFR活化。上述药物通过不同途径阻断EGFR介导的细胞内信号通路，从而抑制肿瘤生长、转移和血管生成，并促进肿瘤细胞凋亡，提高放化疗敏感性。EGFR酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-
7、TKI） ，吉非替尼和厄罗替尼已被FDA批准用于治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC） 。这些靶向药物已应用于晚期和不适宜传统化疗方案的NSCLC患者的临床治疗。但是，临床运用结果表明这些靶向药物仅对部分患者有效。进一步的研究发现EGFR基因外显子19和21的突变（体细胞突变）是患者对此类靶向药物有效的必要前提 1。2004年，美国哈佛医学院的研究人员Lynch等率先报道，肺癌细胞中有EGFR酪氨酸激酶基因编码区外显子19缺失或外显子21突变的患者，靶向药物易瑞沙的有效率高达80以上 2。临床研究表明，EGFR突变分布与临床上EGFR-TKI治疗的优势人群相一致，主要见于女性、腺癌、非吸烟者及亚裔
8、患者 3。然而，一部分对EGFR-TKI治疗有效的患者最终都会对EGFR-TKI产生耐药性。进一步临床研究还表明，EGFR基因外显子20的体细胞突变是EGFR-TKI继发耐药的主要机制之一 4。外显子20的突变类型主要是第790位密码子出现CT的转换，引起EGFR蛋白中该位点的氨基酸由苏氨酸转变为甲硫氨酸(T790M)。这一突变仅见于药物治疗后复发者，突变使得非小细胞肺癌患者对吉非替尼和厄罗替尼产生抗性。美国国家癌症综合网络(NCCN)2009年版的临床指南 5中明确指出：EGFR突变，尤其是外显子19缺失突变与肿瘤对TKIs如吉非替尼的敏感度有重要关系。所以EGFR的活化突变能够被用来为这些
9、患者选择最好的治疗方法。参考文献1.Pao W et al.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2004;101:13306-11.2.Lynch TJ et al.N.Engl.J.Med.2004;350:2129-39.3.Kimura H et al.Clin Cancer Res2006;12:3915-21.4.Maheswaran S et al.N Engl J Med.2008;359:366-77.5.NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology for NSCLC.V2.2009.82. EML4-ALK 融合基
10、因及耐药棘皮动物微管相关蛋白样(EML4)编码蛋白 N-末端部分融合至间变淋巴瘤激酶(ALK)的细胞内酪氨酸激酶结构域，重排为 EML4-ALK，导致异常酪氨酸激酶表达。2007 年 Soda等首次在非小细胞肺癌患者术后标本中检测到 EML4-ALK 重排融合。Shaw 等研究表明，在限定筛选条件的人群中，EML4-ALK 融合比例增高，如不吸烟或仅少量吸烟且无 EGFR突变者，EML4-ALK 阳性率高达 33%，这也是迄今报道 EML4-ALK 检出率最高人群。这项研究的结果提示，上述这些 EGFR-TKIs 治疗优势而不敏感人群实质上蕴藏着新的分子事件。 2010 年 ASCO 会议上报
11、道的 I 期临床研究结果显示， 82 例存在 EML4-ALK 融合的NSCLC 患者接受 crizotinib 治疗 (250 mg，bid)，90%出现肿瘤缩小， 57%的患者获得客观缓解。2011 年 ASCO 会议上，Shaw 等更新了 I 期研究的生存数据：82 例接受 crizotinib 治疗的患者，1 年生存率为 77%， 2 年生存率为 64%，中位 OS 尚未达到。鉴于这种不俗的疗效和轻微的不良反应，EML4-ALK 融合的发现与治疗突破被评为 2011 年临床肿瘤界十大进展之一，而美国 FDA 于 2011 年 8 月 26 日批准 crizotinib 上市，用于治疗
12、ALK 融合的NSCLC 患者。 2012 年 NCCN 更新之一即为：对于非鳞 NSCLC 患者，一线治疗时建议检测 EML4-ALK，若为阳性，推荐接受 crizotinib 治疗。A8081005 研究针对化疗失败并检测到 EML4-ALK 融合的 NSCLC 患者，已于 2012 年 4 月份结束招募，全球共随机 818 例，阳性率为 20.8%(818/3927)。2012 年的 ASCO 年会上报道了最新的有效性及安全性数据：中为治疗周期 25 周，ORR 为 53%，12 周的 DCR 为 85%，中位 PFS 8.5 个月。常见的不良反应为视觉异常(50%)，恶心 (46%)，
13、呕吐(39%)，腹泻(35% ，多为 12 级) 。有 146 例患者在 PD 后仍继续 crizotinib 治疗，多为单器官病灶的进展。53%的患者 PD 后 crizotinib 治疗超过 2 周，中位 PD 后治疗时间为 10 周，大多数患者有较好的体力状况。进展后仍给予靶向药物并加强局部病灶治疗是“个体化治疗”的表现，患者仍可从中获益。 参考文献：Takeuchi K et al. Nat Med. 2012 Feb 12;18(3):378-81Toyokawa G et al. Lung Cancer. 2013 Jun 17Watanabe N et al. Acta Oncol. 2013 Jun 119
