1、第三代测序原理什么是 DNA？ DNA是 英文 Deoxyribonucleic acid的 缩 写 ， 中文 含 义为 脱氧核糖 核酸。 脱氧核糖核苷酸的 类 型：腺 嘌 呤（ A） = 胸腺 嘧啶 （ T）胞 嘧啶 （ C） = 鸟 嘌 呤（ G）DNA分子的排列 顺 序是可以 检测的，从而可以解 读遗传 信息，即 测 序。DNA结构（视频）什么是基因？ 基因是具有遗传效应的 DNA分子片段，由许多脱氧核苷酸按照一定的碱基顺序构成的长链聚合物。基因身高肤色 智商胖瘦基因组 ：一个细胞内的全套染色体为一个基因组，或是一个细胞中的全部 DNA为一个基因组什么是基因组？ 基因组 染色体 基因测序
2、技术发展史第一代测序原理 -Sanger测序法双脱氧链终止法（ Sanger法）：1977年，英国人 Fred Sanger 发现，如果在 DNA复制过程中掺入 ddNTP，就会产生一系列末端终止的 DNA链，并能通过电泳按长度分辨 。 不同末端终止 DNA链的长度是由掺入到新合成链上随机位置的 ddNTP决定的。复制叉（ Replication fork）DNA ligase： DNA连接酶；DNA gyrase： DNA旋转酶；DnaB helicase：解旋酶SSB：单链结合蛋白；DNA连接酶（ DNA ligase） 功能：连接 DNA链 3-OH末端和另一 DNA链的 5-P末端，使
3、二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的 DNA链连成完整的链。DNA复制Sanger测序 法第一代测序成果：人类基因组2001年 2月份同时发表，从此有了人类基因组模板。ATCGAACTTCCATTGCACCAATATAGGTACGTAAATCGAACTTCC TTGCACCTATATAGGTGTACGTAA 参考序列：测序所得序列：碱基缺失碱基突变碱基重复 特点： 测序长度 700-1000bp；通量小，一次 96个样本，每个样本 1条序列 临床应用： 单基因病检测 ，如血友病、白化病、地中海贫血等第二代测序原理 -高通量测序NextSeq 500 灵活通量废液槽缓冲液化学试剂Flow Cel
4、lCAGTCATCACCTAGCGTA5GTGTCAGTCAGTCA35测序基础原理： 边合成边测序 (SBS)如何理解边合成边测序？用不同颜色的荧光标记四种 dNTP，在 聚合酶作用下，按照碱基互补配对原则（ A与 T配对， C与 G配对）进行链的延伸，每延伸一个碱基，碱基释放 荧光 。通过光学系统捕获荧光，从而获得碱基信息。MiSeq 建 库2 HOURSCluster1 HOURS测 序4 HOURS信息分析0.5 HOURS一体化进行： 上样后，测序仪自动化完成扩增和测序二代 测序法第三代测序原理 -单分子测序第三代测序方法与现在的测序技术相比之下的优点：1）更高的通量；2）更短的测序时间；3）更长的读取长度；4）更高的精确性，可以检测出极少的变异；5）需要很少的起始量；6）低成本。Helico BioScience 单分子测序技术Pacific Bioscience SMRT 技术Oxford Nanopore Technologies 的纳米孔单分子测序技术第三代测序原理 -单分子测序第三代测序方法与现在的测序技术相比之下的优点：1）更高的通量；2）更短的测序时间；3）更长的读取长度；4）更高的精确性，可以检测出极少的变异；5）需要很少的起始量；6）低成本。
