1、了解分光光度法测定有色化合物浓度的原理和方法 学习连续变化法（又称等摩尔系列法）测定配合物的稳定常数和组成比 熟练使用722型分光光度计,实验目的,磺基水杨酸与三价铁离子配合物的组成及稳定常数的测定,配合物的组成,M + nL = MLn,中心离子,配位体,配合物,Fe3 + nL = FeLn,磺基水杨酸,无色,n与pH有关,pH = 2 3时， n = 1,磺基水杨酸为三元有机弱酸：H3L（结构如右）,pH 23时生成紫红色的FeL pH 49时生成红色的FeL23-pH 911.5时生成黄色的FeL36- pH12时生成Fe(OH)3沉淀,Io = Ia + It + Ir 设 Ir一定
2、：Io Ia + It,实验原理,分光光度法,透射比（透光度）：,吸光度：,l 一定：,连续变化法 在测定系列的液中，每个测定试样中M的浓度和配位体浓度都在发生连续变化，但它们的总浓度保持恒定 f M浓度与总浓度之比A越大 f 就越与组成接近，Amax对应的 f 即为组成,配位离解平衡,平衡浓度： C(1-) C nC C不考虑离解生成的配合物的最大浓度,配合物的离解度 当配合物不离解，吸光度应为A，但实测为A，说明配合物发生了离解,离解度,吸光度,吸光度-组成图,A,A,f,分光光度计的工作原理,722s型分光光度计示意图,分光光度计的操作步骤,预热30min 选择波长（常常选择最大吸收波长
3、） 分光光度计的校正或校准（调零和调整） 测量吸光度或透射比,？,分光光度计的调零和调整,调零指调节透射比为0，调整指将透射比调为100光路断开或照射在纯黑体上时进行调零 照射在透明物质时（如蒸馏水等，分光光度法中称为参比物或空白）进行调整,显示窗,Mode按钮,调整按钮,调零按钮,样品盖,拉杆,波长旋钮,通过按Mode按钮，仪器可显示透射比T或吸光度A等 调零或调整时，通过按调零按钮或调整按钮使仪器显示为0.00或1.00,滤光片,比色皿,比色皿架,光路通孔,比色皿的使用,比色皿根据制造材料可分为玻璃或石英 比色皿的规格常按其厚度划分：0.5cm、1cm、2cm等 比色皿有两个光滑面和两个粗
4、燥面（毛面），测试时光滑面对着入射光并保持光滑面干净整洁，操作时手拿取毛面 盛装溶液时，需要润洗,配制0.00100 mol/L Fe3+溶液 配制0.00100 mol/L H3L溶液 在干燥、洁净的50mL烧杯中，按表格条件配制溶液，用分光光度计测定这一系列混合溶液的吸光度 测定条件 ：pH=2，= 500 nm，比色皿厚度1cm,实验步骤,以测得的吸光度A为纵坐标，f 为横坐标作图 （坐标纸上作图） 从图上找出有关数据，说明在本实验条件下Fe3+与磺基水杨酸形成的配合物的组成，计算离解度a和稳定常数K稳,数据处理,思考题1,若测得的1#、11#溶液的吸光度不为零，作图时如何处理？ 从理论上说，只有Fe3+或只有磺基水杨酸的溶液中，由于没有配合物生成，吸光度应该与蒸馏水一样为零 1#、11#溶液的吸光度可能为负 作图时按零处理,经文献查阅， Fe3+与磺基水杨酸形成的1：1型配合物的稳定常数为1014.64，而根据实验数据计算出的稳定常数与该值相差悬殊，原因是什么？ 主要原因是该实验计算出的稳定常数实际上为条件稳定常数（或表观稳定常数），即扣除副反应（酸效应）的稳定常数 实验误差和数据处理也会产生一定误差,思考题2,下次实验三氯化六氨合钴的合成,
