1、45 页+参考+附录 1 必须写的：1 摘要 2 关键词（生菜及其包藏，温度影响） 3 材料与方法 4 结果与分析 5 讨论 6 结论 7 文献 8 英文不同温度对生菜贮藏保鲜的影响摘要：生菜 ( lettuce) , 又称叶用莴苣 , 为菊科莴苣属一、二年生草本植物。a 生菜广泛用于鲜食， 是各类中西快餐中最主要配菜之一。近年来， 随着人们生活水平的提高，生菜的消费呈现迅猛上升之势。生菜的贮藏温度影响着生菜的保鲜效果，本试验研究在不同的贮藏温度下生菜品质变化，为生菜贮藏保鲜温度的确定提供依据。b关键词：生菜；贮藏温度；保鲜；1. 材料与方法1.1 材料处理生菜，选取整齐、质地脆嫩、颜色翠绿或
2、深绿，且无腐烂、无虫食的作为实验试材。适当剥去外部一些受损苞叶，使其大小整齐一致，将生菜用 0.02%次氯酸钠浸泡 3min,晾干水分后，五棵作为一个实验组，用塑料袋包装，分别在-4，0，4以及室温下贮藏。每隔2d 测定一次贮藏生菜的生理指标，贮藏期间相对湿度为 70%。1.2 实验使用的化学试剂碳酸钙粉（石英砂） ，80%的丙酮； 1mg.ml-1 葡萄糖标准液， 3，5-二硝基水杨酸试剂；去离子水；0.6%的硫代巴比妥蒜（ TBA） ，10% 的三氯乙酸（ TCA）;0.2mol/LPH=7.0 的磷酸缓冲液,0.1mol/L H202 溶液; 0.05mol/L PH=7.8 磷酸缓冲液
3、, 提取介质（0.05mol/L PH=7.8 磷酸缓冲液，内含质量分数为 1%的聚乙烯吡咯烷酮）,130mmol/LMet 溶液, 750umo1/L NBT溶液, 100umol/L EDTA 溶液，20umo1/L 核黄素，蒸馏水；质量分数 2% H202 溶液，pH5.5磷酸缓冲液，0.05mol/L 愈创木酚，20%的三氯乙酸（TCA） ；pH5.5 磷酸缓冲液，20%的三氯乙酸（TCA ）, PVP，0.1mol/L 儿茶酚；1.3 实验的仪器设备天平，分光光度计，水浴锅，离心机，研钵，打孔器，烧杯，容量瓶，移液管，试管，漏斗，滤纸，光照箱，培养箱，冰箱，电导仪，1.4 实验方法1
4、.4.1 失重率采用差量法计算。失重率（%）=(入贮前重量一贮藏后重量 )/入贮前重量100%1.4.2 叶绿素含量叶绿素含量的测定采用分光光度比色法1。取 0.5g 生菜叶片研磨，加少量的碳酸钙粉及 80%丙酮进行研磨，匀浆过滤后用 80%的丙酮定容至 15ml，以 80%的丙酮作对照，在分光光度计上测定 665nm,649nm, 470nm 处的光密度值。以 Amon 法公式计算叶绿素的含量。叶绿素总量（mg/g）= )()C或 干 重样 品 鲜 重 稀 释 倍 数提 取 液 体 积色 素 的 浓 度 1.4.3 还原糖含量采用 3,5 一二硝基水杨酸(DNS)比色法。称取生菜叶片样品 1
5、g，加 8mL 蒸馏水匀浆，10000rpm 离心 20min，吸取上清液 2.0mL，加 1.5mL 的 DNS 试剂，沸水中煮 5min,冷却后蒸馏水用定容到 25.0mL,测 A540。以葡萄糖作标准曲线并计算还原糖含量。1.4.4 电导率测定用打孔器取 10 片 68mm 的生菜叶片，用自来水冲洗数次，再用去离子水冲洗，然后用50ml 的去离子水加盖浸泡 1h, 测电导率 S1， （以蒸馏水为空白对照组。煮沸 12min，静置1h，再测电导率 S2。相对电导率 L=S1/S2.） 。14.5 丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法。取生菜叶片样品 1g 加入 2mL 10
6、% TCA 和少量石英砂,研磨，再加 8ml TCA 进一步研磨，匀浆液 4000r/min 离心 10min。取 2mL 上清液，加2ml 质量分数为 0.6%TBA 溶液，沸水中煮 15min，冷却后离心，取上清液测定 450，532和 600nm 波长下的吸光度值，以 TCA 溶液取代酶液作为空白。根据公式MDA 质量摩尔浓度(umol . L-1)= c . N. W -1计算出 MDA 浓度及生菜样品中的含量1.4.6 超氧化物歧化酶(SOD)活性取生菜样品 0.5g，加入 6mL 提取介质（0.05mol/L PH=7.8 磷酸缓冲液，内含质量分数为 1%的聚乙烯吡咯烷酮） ，冰浴
7、研磨，加入提取介质使得终体积为 10ml。4下 10500r/min 离心20min，上清液为 SOD 粗酶液。 酶活力测定：反应体系中顺次加入 0.05mol/L pH7.8 磷酸缓冲溶液 3mL,130mmol/LMet 溶液 0.6mL,750umo1/L NBT 溶液 0.6mL, 100umol/L EDTA 溶液0.6 mL,粗酶液 0.2mL, 20umo1/L 核黄素 0.6mL，蒸馏水 0.4ml 振荡摇匀，以缓冲液作空白对照，不加酶液(以 PBS 代替) 的反应管作为最大光化还原管，在 40001ux 下照光 20min 后立即避光迅速测定 A560 的值。 SOD 活性=
8、（A 0-AS）.V T.(0.5AO.WF.V1)-1 SOD 比活力=SOD 总活性.C -11.4.7 过氧化物酶 POD 活力测定愈创木酚比色法测定过氧化物酶活性，取生菜叶片样品 0.5g，加入 pH5.5 磷酸缓冲液6mL，冰浴研磨匀浆，匀浆液转移至离心管中，4000r/min 离心 10min，上清液转入 25ml容量瓶，沉淀物用 5ml pH5.5 磷酸缓冲液再提取两次，上清液并入容量瓶中，定容至刻度。酶活性测定反应体系：2.9mL 磷酸缓冲液(pH5.5), 1.0mL 0.05mol/L 愈创木酚,0.1mL 粗酶液，最后加入 0.1mL 质量分数 2% H202 溶液，迅速
9、颠倒混匀,于 37水浴中 15min,转入冰浴中，并加 2.0ml20%三氯乙酸终止反应，过滤，稀释，以煮沸 5min 酶液代替粗酶液作为对照，测 D470。以每分钟内 D470 变化 0.01 为 1 个过氧化物酶活性单位（ U）过氧化物酶活性=1.4.8 多酚氧化酶 PPO 活力测定比色法测定多酚氧化酶活性，1.4.9 过氧化氢酶 CAT 活性测定紫外吸收法测定过氧化氢酶活性，称取 0.5 克生菜叶片加入 23ml 4预冷的 PH=7.0 的磷酸缓冲液和少量石英砂研磨，转入 25ml 容量瓶中，用缓冲液冲洗研钵数次，合并冲洗液，定容至刻度。于 5下静置 10min,取上部澄清部分 4000r/min 离心 15min,上清液为提取粗酶液 ?，
