1、题 目：桔梗检验标准操作规程制定人： 年 月 日编码：GZZL642 02审核人： 年 月 日颁发部门：质量管理部批准人： 年 月 日执行时间： 年 月 日分发部门：档案室、质量管理部目的：建立桔梗的检验标准操作规程。范围：适用于桔梗的检验。职责：QC 执行，QC 主任、质量部经理监督执行。内容：一、仪器与用具显微镜、粉碎机、载玻片、盖玻片、直形冷凝管、量筒 50ml、水浴锅、分液漏斗、具塞锥形瓶 100ml、层板缸、微量进样器、喷瓶、电热鼓风干燥箱、硅胶 G 薄层板、放大镜、分析筛、电子天平、称量瓶、索氏提取器、水浴锅、漏斗、蒸发皿、干燥器、坩埚、茂福炉、振荡器、干燥滤器、蒸发光散射检测器、
2、超声机、高效液相色谱仪、减压抽滤器二、试剂与试药水合氯醛、甘油、硫酸、乙醇、氯仿、无水硫酸钠、甲醇、乙醚、桔梗对照药材、乙腈、正丁醇、三氯甲烷、桔梗皂苷 D 对照品、氨试液三、操作方法1、性状取本品，在自然光下观察，应呈圆柱形或略呈纺锤形，下部渐细，有的有分枝，略扭曲，长 720cm，直径 0.72cm。表面白色或淡黄白色，不去外皮者表面黄棕色至灰棕色，具纵扭皱沟，并有横长的皮孔样斑痕及支根痕，上部有横纹。有的顶端有较短的根茎或不明显，其上有数个半月形茎痕。质脆，断面不平坦，形成层环棕色，皮部类白色，有裂隙，木部淡黄白色。取本品少量嗅之气微，嚼之，味微甜后苦。2、鉴别(1)本品横切面：置显微镜
3、下检视应为木栓细胞有时残存，不去外皮者有栓皮层，细胞中含草酸钙小棱晶。栓内层窄，常见裂隙。韧皮部乳管群散在，壁略厚，内含微细颗粒状黄棕色物。形成层成环。木质部导管单个散在或数个相聚，呈放射状排列。薄壁细胞含菊糖。为呈桔梗显微特征。(2)取本品，切片，用稀甘油装片，置显微镜下观察，可见扇形或类圆形的菊糖结晶。(3)取本品粉末 1g，加 7%硫酸乙醇- 水（1:3）混合液 20ml，加热回流 3 小时，放冷，用氯仿振摇提取 2 次，每次 20ml，合并氯仿液，加水洗涤 2 次，每次 30ml，弃去洗液，氯仿液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 1ml 使溶解，作为供试品溶液。第 2 页
4、共 2 页GZZL64202另取桔梗对照药材 1g，同法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各 10l，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以氯仿-乙醚（2:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10%硫酸乙醇溶液，在 105加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点。3、检查(1)水分：取本品照水分测定标准操作规程第一法测定，应不得过 15.0%。(2)总灰分：取本品照灰分测定法标准操作规程总灰分测定法测定，应不得过6.0%。4、浸出物：取本品照浸出物测定标准操作规程中醇溶性浸出物测定法项下的热浸法,以稀乙醇为溶剂测定，本品醇溶性浸出物应不得少于 17.0%
5、。5、含量检查 照高效液相色谱法测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水（25:75）为流动相；蒸发光散射检测器。理论板数按桔梗皂苷 D 峰计算应不低于 3000。对照品溶液的制备 取桔梗皂苷 D 对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1ml 含0.5mg 的溶液，即得。供试品溶液的制备 取本品粉末（过二号筛）约 2.0g，精密称定，精密加入 50%甲醇50ml，称定重量，超声处理（功率 250W，频率 40kHz） 30 分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液 25ml，置水浴上蒸干，残渣加水20ml，微热使溶解，用水饱和
6、的正丁醇振摇提取 3 次，每次 20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液 50ml 洗涤，弃去氨洗液，再用正丁醇饱和的水 50ml 洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇 3ml 使溶解，加硅胶 0.5g 拌匀，置水浴上蒸干，加于以三氯甲烷 -甲醇（9:1）制备的硅胶柱（内径 2cm，10g）上，以三氯甲烷 -甲醇（9:1）50ml 洗脱，弃去洗脱液，再以三氯甲烷-甲醇-水（60:20:3）100ml 洗脱，弃去洗脱液，继用三氯甲烷-甲醇-水（60:29:6）100ml 洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至 5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液
7、5l、10l，供试品溶液 1015l，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。本品按干燥品计算，含桔梗皂苷 D（C 57H92O28）不得少于 0.10%。四、依据：本标准操作规程的制定依据中国药典2010 年版一部。第 2 页 共 2 页题 目：桔梗（饮片）检验标准操作规程制定人： 年 月 日编码：GZZL642-1 02审核人： 年 月 日颁发部门：质量管理部批准人： 年 月 日执行时间： 年 月 日分发部门：档案室、质量管理部目的：建立桔梗（饮片）的检验标准操作规程。范围：适用于桔梗（饮片）的检验。职责：QC 执行，QC 主任、质量部经理监督执行。内容：一、仪器与用具显微镜
8、、粉碎机、载玻片、盖玻片、直形冷凝管、量筒 50ml、水浴锅、分液漏斗、具塞锥形瓶 100ml、层板缸、微量进样器、喷瓶、电热鼓风干燥箱、硅胶 G 薄层板、放大镜、分析筛、电子天平、称量瓶、索氏提取器、水浴锅、漏斗、蒸发皿、干燥器、坩埚、茂福炉、振荡器、干燥滤器、蒸发光散射检测器、超声机、高效液相色谱仪、减压抽滤器二、试剂与试药水合氯醛、甘油、硫酸、乙醇、氯仿、无水硫酸钠、甲醇、乙醚、桔梗对照药材、乙腈、正丁醇、三氯甲烷、桔梗皂苷 D 对照品、氨试液三、操作方法1、性状取本品，在自然光下观察，本品呈椭圆形或不规则厚片。外皮多已除去或偶有残留。切面皮部类白色，较窄；形成层环纹明显，棕色；木部宽，
9、有较多裂隙。气微，味微甜后苦。2、鉴别(1)取本品，切片，用稀甘油装片，置显微镜下观察，可见扇形或类圆形的菊糖结晶。(2)取本品粉末 1g，加 7%硫酸乙醇- 水（1:3）混合液 20ml，加热回流 3 小时，放冷，用氯仿振摇提取 2 次，每次 20ml，合并氯仿液，加水洗涤 2 次，每次 30ml，弃去洗液，氯仿液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 1ml 使溶解，作为供试品溶液。另取桔梗对照药材 1g，同法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各 10l，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以氯仿-乙醚（2:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10%硫酸乙醇溶液，在 105加热至斑点显
10、色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点。3、检查(1)水分：取本品照水分测定标准操作规程第一法测定，应不得过 12.0%。第 1 页 共 2 页GZZL642-102(2)总灰分：取本品照 灰分测定法标准操作规程总灰分测定法测定，应不得过5.0%。4、浸出物：取本品照浸出物测定标准操作规程中醇溶性浸出物测定法项下的热浸法,以稀乙醇为溶剂测定，本品醇溶性浸出物应不得少于 17.0%。5、含量检查 照高效液相色谱法测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水（25:75）为流动相；蒸发光散射检测器。理论板数按桔梗皂苷 D 峰计算应不低于
11、3000。对照品溶液的制备 取桔梗皂苷 D 对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1ml 含0.5mg 的溶液，即得。供试品溶液的制备 取本品粉末（过二号筛）约 2.0g，精密称定，精密加入 50%甲醇50ml，称定重量，超声处理（功率 250W，频率 40kHz） 30 分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液 25ml，置水浴上蒸干，残渣加水20ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取 3 次，每次 20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液 50ml 洗涤，弃去氨洗液，再用正丁醇饱和的水 50ml 洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇 3ml 使溶解，
12、加硅胶 0.5g 拌匀，置水浴上蒸干，加于以三氯甲烷 -甲醇（9:1）制备的硅胶柱（内径 2cm，10g）上，以三氯甲烷 -甲醇（9:1）50ml 洗脱，弃去洗脱液，再以三氯甲烷-甲醇-水（60:20:3）100ml 洗脱，弃去洗脱液，继用三氯甲烷-甲醇-水（60:29:6）100ml 洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至 5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液 5l、10l，供试品溶液 1015l，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。本品按干燥品计算，含桔梗皂苷 D（C 57H92O28）不得少于 0.10%。四、依据：本标准操作规程的制定依据中国药典2010 年版一部。第 2 页 共 2 页
