1、定性免疫测定的室内质量控制卫生部临床检验中心 李金明免疫测定实验室的室内质控问题z 对室内质控概念的理解 ?z 如何进行室内质量控制 ?如何进行统计学质量控制 ?z 如何进行统计学质量控制z 如何做质控图 ?如何做质控图z 质控规则如何选 ?质控规则如何选z 质控物如何选择 ?室内质量控制 （ Internal Quality室内质量控制 （ Control,IQC)的概念z 由 实验室工作人员 ，采取一定的方法和步骤，连续评价本实验室工作的可靠性程度 ， 旨在 监测和，控制本实验室工作的精密度 ，提高本室常规工作中批内 、 批间样本检验的 一 致性 ， 以 确定测定结、 致性 ， 以果是否可
2、靠、可否发出报告的一项工作 。z 可概括为 :(1)执行者 ： 实验室技术人员 ； (2)目： ； 目的 ：监测实验室测定的重复性；(3) 功能 ：决定了当批测定的有效性 ， 报告可否发出 。 是对实验， 。室测定的 即时性评价 。室内质量控制（ IQC）的基本内容容z主要包括三个方面：（1）测定前的质量控制；（2）统计学质量控制；（ ） 质量控制的评价（ 3） 质量控制的评价 。测定前的质量控制z 实验室设施、仪器设备及管理z 理想的试剂和操作方法理想的试剂和操作方法z 人员培训实验室设施、仪器设备及管理z 实验室空间及工作流程的设计实验室环境条件的控制 温湿度控制设z 实验室环境条件的控制
3、 ： 温湿度控制设备、稳压或不间断电源z 仪器设备及管理：酶标仪、洗板机、全自动免疫分析仪 加样器等应建立技术自动免疫分析仪 、 加样器等应建立技术档案，并定期维护和校准实验室设计的一般原则z（1）总体设计应充分考虑检测功能、实验室安全和工作的方便程度。整个实验室可分为三个分开的主要区域，即清洁区、半污染区和污染区。清洁区作为日常办公用。半污染区介于清洁区和实验区域之间 供实验室工作人员在办公区域和实验区域之间进出验区域之间 ， 供实验室工作人员在办公区域和实验区域之间进出时更换工作服用，污染区即日常检测的工作区域。z （2）充分考虑各项实验功能的正常运转。充 考虑 作流程的合 作的方便z （
4、3） 充 分 考虑 工 作流程的合 理性和工 作的方便 性。z （4）充分考虑试剂冰箱、检测仪器设备、废弃物处理、洗手池等安放位置的合理性及工作的方便性。z （5）充分考虑国家和部门法规对实验室设置的要求。如实验室生物安全、环保的要求等。实验室环境条件的控制和监控z 实验室温度和湿度的记录及其意义z 温度和湿度计的放置试剂标本实验台（仪器设报告及记冰箱保存冰箱标本处理（生（备）及记录（生物安全柜、离心机）标实验台（仪器设备）本接收洗手池备）实验废弃物图1-2.血清学实验室具体设置示意图仪器设备的校准周期仪器设备的校准周期仪器设备 质控方法 频 度 失控标准 酶标仪及全自动酶免分析系预防性维护
5、及校准每年2次 不符合要求 统 及校准恒温箱或恒温设备 温度检测 每次实验 不符合要求 加样器及全自校准 每年2次 不符合要求 动加样设备 理想的试剂z试剂的质检测定下限 (D i li i )测定下限 etect on lim t批内变异 (10%)和批间变异 ( 15-25%)()“钩状”效应 (Hook effect)变异体的检测能力 (HB A )变异体的检测能力 s g对本室所用室内质控血清检测的一致性理想的操作方法z 按照试剂盒说明书操作即可吗 ?按照试剂盒说明书操作即可吗z 操作中影响测定结果的关键环节z 写出具有可操作性的 SOP人员培训z 培训所涉及的范围: 仪器设备使用、维
6、护和校准；试剂 方法原理 质量管理体系 相关法律法规 相关剂 、 方法原理 ； 质量管理体系 ； 、领域的新技术、新理念和新进展；实验操作技能等。如何培训 讲座 讨论 自学和参加培训班等z 如何培训 ： 讲座 、 讨论 、 。z 培训的评估： 书面考试、实验考核、讨论心得、论文、综述等综述等 。z 对培训者的评估： 培训者的背景、资历、在相关领域内的成就 所接受过的相关领域外部培训情况等内的成就 、 。统计质控方法统计质控方法z 定性免疫测定质控物浓度的选择z 室内质控物的质检 (确认 )室内质控物的质检 确认z 每块板质控物的数量质控规则z 质控规则z Levey-Jennings质控图方法
7、z “即刻法”质控方法z “ 假阳性 ” 的统计质控方法假阳性 的统计质控方法定性免疫测定质控物浓度的选择z 可选择 S/CO值减去精密度测定中得到的三倍批间 CV（ 通常的 ELISA测定批间变异（ CV%）在 15%左右 ）与该 S/CO值的乘积（意即三倍SD）仍大于 1的质控血清作监测重复性的室内质控用计算公式： S/CO（ 1-3CV%） =S/CO-3SD S/CO比值可在 1.54之间。z 同时选择 S/CO处于 1.01.5左右的质控血清以同时选择 处于 左右的质控血清以判断每次测定时试剂盒测定下限的有效性。室内质控物的质检z使用前的质检： 检测的 S/CO比值是否合适 与前 批
8、质控物的 S/CO比否合适 、 与前 一 批质控物的 比值的比较值的比较z使用中的确认： 质控物的稳定性、批与批质控物的 致性批与批质控物的 一 致性每块板质控物的数量 位置 及 位置z 23份弱阳性质控质控z 23份阴性质控随机放置于血z随机放置于血液标本中间质控规则的表达方式 定义质控规则的表达方式 及 定义z质控规则的表达方式质控规则的表达方式z质控规则的功能质控规则的功能z常用质控规则的符号及定义质控规则的表达方式质控规则的表达方式z 通常质控规则以符号 AL来表示，其中 A为质控测定中超出质量控制限的测定值的个数 ， L为控制限 ， 通常用均出质量控制限的测定值的个数 ， ，值或均值
9、 1 3SD来表示。当质控测定值超出控制限 时 即可将该批测定判为失z 当质控测定值超出控制限 L时 ，控。z 常用的 13S质控规则，其中 1为原式中的 A， 3s为原式中的 L， 表示均值 3s， 其确切的含义为 ： 在质控测定值的 ， 表示均值 ， 其确切的含义为 ：中，如果有一个测定值超出均值 3s范围，即可将该批测定判为失控测定判为失控 。质控规则的功能质控规则的功能z简单地说就是用于判断测定简单地说就是用于判断测定批的失控还是在控。常用质控规则的符号及定义常用质控规则的符号及定义符号 定 义z 12S一个质控测定值超出 2s控制限。z 13S一个质控测定值超出 3s控制限。z 22
10、S两个连续的质控测定值同时超出 +2s或 2s控制限。R 同 批测定中 两个不同浓度质控物的测定值之间的z4S同 一 批测定中 ， 两个不同浓度质控物的测定值之间的差值超出 4s控制限。z 41S四个连续的质控测定值同时超出 +1s或 1s控制限 。四个连续的质控测定值同时超出 或 控制限 。z 7T七个连续的质控测定值呈现一个向上或向下的趋势变化。十个续质 定值时 值 侧z 10X十个 连 续 的 质 控测 定值 同 时 处于均 值 （）的同一 侧 。Levey-Jennings质控图方法z 也称 Shewhart质控图，是由美国的Shewhart于 1924年首先提出 并用于工业于 年首先
11、提出 ， 并用于工业产品的质量控制。z 二十世纪五十年代初， Levey-Jennings将其引入临床检验的质量控制 。 经 Henry和其引入临床检验的质量控制 。 经 和Segalove的改良，即为目前常用的 Levey-Ji质控图Jennings质控图 。质控图质控图Levey-Jennings质控图基本的统计学含义z 稳定条件下，在 20个 IQC结果中不应有多于 1个结果超过 2SD（ 95 5%可信限 ） 限度 在个结果超过 （ . 可信限 ） 限度 ； 在1000个测定结果中超过 3SD（ 99.7%可信限）的结果不多于 3个。z 如以 3s为失控限 假失控的概率为 03%如以
12、为失控限 ， 假失控的概率为 0.3%。刻法 ” 质控方法“即 刻法 ” 质控方法z “即刻法”质控方法的实质是一种统计学方法 即 异常值种统计学方法 ， 即 Grubs异常值取舍法 ；取舍法 ；z只要有 3个以上的数据即可决定只要有 个以上的数据即可决定是否有异常值的存在。“假阳性”的统计学室内质控方法z基于日常检验的阳性率比值 (呈正态分布 )分布z直接概率计算方法直接概率计算方法基于日常检验的阳性率比值z半Levey-Jennings质控图法质控规则z 当阴性质控样本为阳性时 ,不管阳性率测定比值为何，均为失控，所有阳性标本须重新测定，并增加一倍阴性质控样本。z 如果阴性质控样本为阴性，某次测定阳性比值超出+2SD,则为失控 ,为 1+2S规则。本次结果阴性结果根据阳性质控样本的情况 ,决定是否可以发出 ,所有阳性样本结果不能发出，需查找出现阳性率增高的原因，并在增加一倍阴性质控样本的情况下重新检测。直接概率计算法z 按统计学规律，一个事件发生的概率小于5%被称为小概率事件，即发生的可能性很小。z 当一个小概率事件发生时，则可能有误差存在，有必要对其发生的原因进行分析 。有必要对其发生的原因进行分析 。z 对每天的日常病人结果中阳性率出现的概率进行计算 ， 如果这种结果出现的概率小于 5%时 ，行计算 ， 如果这种结果出现的概率小于 时 ，则可判为失控。
