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pPICZαA质粒图谱.doc

上传人:精品资料 文档编号:9231977 上传时间:2019-07-30 格式:DOC 页数:9 大小:101.24KB
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资源描述

1、pPICZaa 载体基本信息出品公司: Invitrogen载体名称:pPICZalpha A, pPICZ A, pPICZalphaA, pPICZA, pPICZaA, pPICZa-A质粒类型: 毕赤酵母蛋白表达载体表达水平: 高拷贝启动子: AOX1克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶载体大小: 3593 bp5 测序引物及序列: 5 AOX1:5-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-33 测序引物及序列: 3 AOX1:5-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3载体标签: C-Myc, C-His载体抗性: Zeocin 博来霉素筛选标记: HIS4备注: 插入基因

2、是必需包含起始密码子 ATG。产品目录号: V195-20稳定性: 稳定 Stable组成型: 组成型 Constitutive病毒/ 非病毒 : 非病毒pPICZaa 载体质粒图谱和多克隆位点信息pPICZaa 载体简介pPICZ A,B 和 C 是 3.6 kb 的毕赤酵母蛋白分泌表达载体。表达的重组蛋白是融合蛋白,含有一个 N-端多肽,编码酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)- 因子分泌信号。载体能够在毕赤酵母中利用甲醇诱导的高水 平的表达目的蛋白,并且可以用在任何毕赤酵母中,包括X33,GS115 菌株, SMD1168H,KM71H 。pPICZ A,B 和

3、C 系列载体包含以下元素:5端含有 AOX1 启动子的严格调控,利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因(Ellis 等,1985; Koutz 等人, 1989;tschopp 等人,1987A)。-因子分泌信号能够分泌性表达目的蛋白。Zeocin 抗性基因在大肠杆菌(Escherichia coli)和毕赤酵母都能用于筛选(Baron 等人,1992; Drocourt 等人,1990)。C-端含 Myc 和 His 标签,可以用于检测和纯化重组蛋白。pPICZ A, B, C 三种读码框使得可以将基因克隆入载体而不发生任何移码突变。pPICZaa 载体序列LOCUS pPICZA 3593 bp

4、 DNA circular SYN 2-SEP-2003SOURCE ORGANISM COMMENT This file is created by Vector NTIhttp:/ VNTAUTHORNAME||FEATURES Location/Qualifierssource 13593/invitrogen=“25“/vntifkey=“98“primer complement(14231443)/invitrogen=“1880000“/vntifkey=“27“/label=3AOX1primerprimer 855875/invitrogen=“1890000“/vntifke

5、y=“27“/label=5AOX1primerCDS 13201337/invitrogen=“1010000“/vntifkey=“4“/label=6xHisprimer 11441164/invitrogen=“1900000“/vntifkey=“27“/label=alpha-factorprimerterminator 13411682/invitrogen=“2550000“/vntifkey=“43“/label=AOX1transcriptionterminatorCDS 12751304/invitrogen=“1090000“/vntifkey=“4“/label=c-

6、mycepitopeterminator 25382855/invitrogen=“2560000“/vntifkey=“43“/label=CYC1transcriptionterminatorpromoter 20952162/invitrogen=“2340000“/vntifkey=“30“/label=EM7promotermisc_feature 12081274/invitrogen=“1460000“/vntifkey=“21“/label=MCSrep_origin complement(28663539)/invitrogen=“2540000“/vntifkey=“33“

7、/label=pUCoriginCDS 9411207/invitrogen=“1280000“/vntifkey=“4“/label=alpha-factorsignalpeptidepromoter 16832094/invitrogen=“2300000“/vntifkey=“29“/label=TEF1promoterCDS 21632537/invitrogen=“1370000“/vntifkey=“4“/label=Zeo(R)promoter 1940/invitrogen=“2160000“/vntifkey=“29“/label=AOX1promoterBASE COUNT

8、 892 a 886 c 801 g 1014 tORIGIN1 agatctaaca tccaaagacg aaaggttgaa tgaaaccttt ttgccatccg acatccacag61 gtccattctc acacataagt gccaaacgca acaggagggg atacactagc agcagaccgt121 tgcaaacgca ggacctccac tcctcttctc ctcaacaccc acttttgcca tcgaaaaacc181 agcccagtta ttgggcttga ttggagctcg ctcattccaa ttccttctat taggct

9、acta241 acaccatgac tttattagcc tgtctatcct ggcccccctg gcgaggttca tgtttgttta301 tttccgaatg caacaagctc cgcattacac ccgaacatca ctccagatga gggctttctg361 agtgtggggt caaatagttt catgttcccc aaatggccca aaactgacag tttaaacgct421 gtcttggaac ctaatatgac aaaagcgtga tctcatccaa gatgaactaa gtttggttcg481 ttgaaatgct aacgg

10、ccagt tggtcaaaaa gaaacttcca aaagtcggca taccgtttgt541 cttgtttggt attgattgac gaatgctcaa aaataatctc attaatgctt agcgcagtct601 ctctatcgct tctgaacccc ggtgcacctg tgccgaaacg caaatgggga aacacccgct661 ttttggatga ttatgcattg tctccacatt gtatgcttcc aagattctgg tgggaatact721 gctgatagcc taacgttcat gatcaaaatt taactgt

11、tct aacccctact tgacagcaat781 atataaacag aaggaagctg ccctgtctta aacctttttt tttatcatca ttattagctt841 actttcataa ttgcgactgg ttccaattga caagcttttg attttaacga cttttaacga901 caacttgaga agatcaaaaa acaactaatt attcgaaacg atgagatttc cttcaatttt961 tactgctgtt ttattcgcag catcctccgc attagctgct ccagtcaaca ctacaacag

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13、agaacaa aaactcatct cagaagagga tctgaatagc gccgtcgacc1321 atcatcatca tcatcattga gtttgtagcc ttagacatga ctgttcctca gttcaagttg1381 ggcacttacg agaagaccgg tcttgctaga ttctaatcaa gaggatgtca gaatgccatt1441 tgcctgagag atgcaggctt catttttgat acttttttat ttgtaaccta tatagtatag1501 gatttttttt gtcattttgt ttcttctcgt a

14、cgagcttgc tcctgatcag cctatctcgc1561 agctgatgaa tatcttgtgg taggggtttg ggaaaatcat tcgagtttga tgtttttctt1621 ggtatttccc actcctcttc agagtacaga agattaagtg agaccttcgt ttgtgcggat1681 cccccacaca ccatagcttc aaaatgtttc tactcctttt ttactcttcc agattttctc1741 ggactccgcg catcgccgta ccacttcaaa acacccaagc acagcatact

15、 aaattttccc1801 tctttcttcc tctagggtgt cgttaattac ccgtactaaa ggtttggaaa agaaaaaaga1861 gaccgcctcg tttctttttc ttcgtcgaaa aaggcaataa aaatttttat cacgtttctt1921 tttcttgaaa tttttttttt tagttttttt ctctttcagt gacctccatt gatatttaag1981 ttaataaacg gtcttcaatt tctcaagttt cagtttcatt tttcttgttc tattacaact2041 tttt

16、ttactt cttgttcatt agaaagaaag catagcaatc taatctaagg ggcggtgttg2101 acaattaatc atcggcatag tatatcggca tagtataata cgacaaggtg aggaactaaa2161 ccatggccaa gttgaccagt gccgttccgg tgctcaccgc gcgcgacgtc gccggagcgg2221 tcgagttctg gaccgaccgg ctcgggttct cccgggactt cgtggaggac gacttcgccg2281 gtgtggtccg ggacgacgtg ac

17、cctgttca tcagcgcggt ccaggaccag gtggtgccgg2341 acaacaccct ggcctgggtg tgggtgcgcg gcctggacga gctgtacgcc gagtggtcgg2401 aggtcgtgtc cacgaacttc cgggacgcct ccgggccggc catgaccgag atcggcgagc2461 agccgtgggg gcgggagttc gccctgcgcg acccggccgg caactgcgtg cacttcgtgg2521 ccgaggagca ggactgacac gtccgacggc ggcccacggg

18、tcccaggcct cggagatccg2581 tccccctttt cctttgtcga tatcatgtaa ttagttatgt cacgcttaca ttcacgccct2641 ccccccacat ccgctctaac cgaaaaggaa ggagttagac aacctgaagt ctaggtccct2701 atttattttt ttatagttat gttagtatta agaacgttat ttatatttca aatttttctt2761 ttttttctgt acagacgcgt gtacgcatgt aacattatac tgaaaacctt gcttgagaa

19、g2821 gttttgggac gctcgaaggc tttaatttgc aagctggaga ccaacatgtg agcaaaaggc2881 cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg cgtttttcca taggctccgc2941 ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga ggtggcgaaa cccgacagga3001 ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg tgcgctctcc tgttccgacc3061 ctgccgctta ccg

20、gatacct gtccgccttt ctcccttcgg gaagcgtggc gctttctcaa3121 tgctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc gctccaagct gggctgtgtg3181 cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg gtaactatcg tcttgagtcc3241 aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca ctggtaacag gattagcaga3301 gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc t

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