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翻白草治糖尿病.doc

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资源描述

1、翻白草对糖尿病防治作用的临床研究进展来源:INTERNET 作者:颜艳 2005-8-3 摘要: 糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一种慢性、多发性常见病,多伴有并发症,且发病率有逐年增高的趋势,它与癌症、心血管疾病同样被视为世界性三大疾病。 翻白草(Potentilla discolor Bge)又名鸡腿儿、天藕儿、湖鸡腿、鸡脚草等,蔷薇科植物翻白草的带根全草,全国各地均有分布,东北、华北等地区有以其同属植物委陵菜糖尿病(diabetes mellitus,DM)是慢性、发性常见病,多伴有并发症,且发病率有逐年增高的趋势,它与癌症、心血管疾病同样被视世界性三疾病翻白草(Po

2、tentilla discolor Bge)又名鸡腿儿、天藕儿、湖鸡腿、鸡脚草等,蔷薇科植物翻白草的带根全草,全国各地均有分布,东北、华北等地区有以其同属植物委陵菜的全草做翻白草使用的。根含鞣质及黄酮类,味甘、苦,性平,有清热解毒凉血消肿之功,治痢疾、疟疾、咳血、吐血等症1 。邵长平2等观察翻白草合剂治疗气阴两虚证 2 型糖尿病患者的疗效,翻白草合剂由翻白草、黄芪、山药、地骨皮、何首乌等药物组成。采用随机分组治疗,治疗组口服翻白草合剂和迪沙片,对照组口服迪沙片。治疗组 80 例,男51 例,女 29 例;年龄最小 39 岁,最大 68 岁,平均 55.4 岁; 糖尿病病史 15 年 34 例,

3、610 年 33 例,10 年以上 13 例,平均病程为 6.4 年。对照组 36 例,男 19 例,女 17 例;年龄最小 38 岁,最大 67 岁,平均 54.3 岁;糖尿病病史 15 年 15 例,610 年 17 例,10 年以上的 4 例,平均 6.3 年。两组病例均无严重肝、肾、心、脑疾患和糖尿病并发症,且性别、年龄、病情、病程,经统计学处理差异无显著性(P0.05) 。具有可比性。实验室检查: 空腹血糖和餐后 2h 血糖、尿糖定量,总胆固醇(TC ) 、甘油三酯(TG) ,血、尿、大便常规,肝、肾功能等。结果表明,治疗组治疗后各指标均较治疗显著降低,有统计学意义,P0.05。翻白

4、草合剂治疗 2 型糖尿病气阴两虚证疗效确切,未发现明显不良反应。马瑛、温少珍3用翻白草对有一定胰岛素分泌功能的 50 例 2 型糖尿病患者进行对照观察,对比其血糖变化。治疗组 50 例,其中男 26 例,女 24 例,年龄 4568(58.07.1)岁,病程 1.514(7.63.6)年,体重指(BMI)25 者 19 例,其中合并轻度高血压病 12 例,高脂血症 20 例。FBG(11.82 1.35)mmol/L。对照组 40 例,男 18 例,女 22 例,平均年龄4669(58.57.1)岁,病程 215(7.74.1)年,BMI25 者 12 例,其中合并轻度高血压 9 例,高脂血症

5、 5 例。FBG(11.581.30)mmol/L。对照组与治疗组的年龄构成、BMI、FBG 等差异均无显著性,两组间具有可比性。两组患者均适量运动,严格控制饮食,对照组口服二甲双胍治疗,治疗组在此基础上同时给予翻白草 30g/d,代茶饮。30 天为 1疗程,2 疗程后评定疗效。结果治疗组总体疗效明显优于对照组,P11.1 mmol/L 作为糖尿病大鼠。2.2 动物分组及给药方法 正常大鼠 60 只按随机数字表法分为正常对照组、糖尿病对照组、药物对照组、实验(大、中、小 3 个剂量)组。实验期间各组大鼠均给予普通饲料喂养自由饮水,实验组每日分别灌胃翻白草9,4.5,2.25 g/kg;药物对照

6、组每日灌胃美吡达 5 mg/kg;糖尿病对照组和正常对照组每日灌胃相应体积的蒸馏水,实验周期为 4 周。2.3 生化检测 实验前后实验动物禁食 12 h,分别取眼眶后静脉丛血,分离血清,分别测空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯。血糖测定采用葡萄糖氧化酶法,总胆固醇与甘油三酯测定各采用 CHOD-PAP 法和酶偶联比色法。2.4 免疫组织化学观察 实验 4 周后大鼠脱颈处死,迅速剖取胰尾,应用免疫组织化学 SABC 法显示胰岛 B 细胞。2.5 统计学处理 用 SPSS10.0 统计软件处理,进行配对 t 检验及方差分析。3 结果3.1 免疫组织化学观察结果 正常对照组胰岛多为圆形、椭圆形、多边形或不

7、规则形,大小不一。SABC 法染色后胰岛 B 细胞为棕褐色的免疫反应阳性,多位于胰岛中央,占据胰岛的绝大部分,排列紧密,细胞界限较清楚,多数呈圆形或椭圆形,免疫反应阳性物质分布于细胞质内,胰岛素分泌颗粒呈颗粒状,细胞质内分泌颗粒丰富,界限较清楚,着色深,未经染色的核呈空泡状,呈圆形或椭圆形,居中。B 细胞群中存在的少量空白区为胰岛其他细胞所在位置。胰腺外分泌部的腺泡细胞间偶见单个免疫反应阳性细胞。糖尿病对照组胰岛形状多不规则,边缘不整齐。胰岛内免疫反应阳性细胞数量明显减少,每个胰岛内仅见数个散在的免疫反应阳性细胞,细胞之间出现较大的不规则空白区域,细胞质内分泌颗粒明显减少甚至缺失,颗粒着色浅,

8、界限模糊,分布不均匀,空泡状的核界限不清甚至固缩。外分泌部腺泡细胞间很难见到单个免疫反应阳性细胞。实验大剂量组胰岛 B 细胞免疫组织化学改变与正常对照组相比,胰岛形状不规则,胰岛内免疫反应阳性细胞数量亦明显减少,界限不清,但部分细胞胞质内分泌颗粒与糖尿病对照组相比数量较多,着色深,界限较清楚,分布较均匀。少数细胞核界限清楚。实验中剂量组与药物对照组和糖尿病对照组相比胰岛内免疫反应阳性细胞数量相对较多,但细胞间仍有较大的空白区域,细胞轮廓较清楚,胞质内分泌颗粒较多,着色深,界限较清楚,分布较均匀。少数细胞核界限清楚。实验组小剂量组与糖尿病对照组相比免疫组织化学改变相近。实验组及药物对照组外分泌部

9、腺泡细胞间亦可见到单个免疫反应阳性细胞。3.2 生化指标检测结果 实验前后血糖、总胆固醇及甘油三酯的含量结果见表 13。表 1 实验前后血糖水平的比较(略)与实验前比较,*P 0.05,与糖尿病对照组比较,#P 0.05,与正常组比较,P0.05表 2 实验前后血清胆固醇含量的比较(略)与实验前比较,*P0.05,与糖尿病对照组比较,#P0.05;n=10表 3 实验前后血清甘油三酯含量的比较(略)与实验前比较,*P 0.05,与糖尿病对照组比较,#P0.054 讨论翻白草2始载于救荒本草,其味甘、微苦,性平,无毒,归肝、胃、大肠经,有清热润燥、凉血解毒、止血消肿、止痢之功效,多用于治疗痢疾、

10、疟疾、肿痛、各种出血。而近年来翻白草在糖尿病的治疗中取得了良好的临床效果。本实验生化检测结果表明:实验组(大、中剂量组)经翻白草治疗 4 周后,与实验前相比各组空腹血糖均显著降低(P0.05);与糖尿病对照组相比大、中、小剂量组空腹血糖亦显著降低(P0.05)。 在翻白草的 3 个剂量组与药物对照组(美吡达:与实验前相比 P0.05,与糖尿病对照组相比P0.05)的降糖效果比较中,翻白草大、中剂量组的降血糖疗效比药物对照组好,接近正常对照组的血糖水平。比较翻白草三个剂量组之间的降糖效果,小剂量组与正常对照组相比空腹血糖有显著性差异(P0.05),而大、中剂量组与正常对照组相比空腹血糖无差异(P

11、0.05),表明高剂量组降糖效果与中剂量组差不多,所以可用中剂量代替高剂量使用,可减少用药量。姜长玲等4在临床研究中证明翻白草能明显降低 II 型 DM 患者的 TG,TC,LDL-C,ApoB,也通过降低纤维蛋白原和血小板的粘附聚集而全面改善其血液流变学差异。同年韩永明等5的在体实验也证实翻白草组体重明显增加(给药前后比较P0.05,给药前后体重差值与造模对照组比较(P0.01),翻白草组与实验对照组比较,两者之间无显著性差异(P0.05)。本实验生化检测结果表明,实验组(大、中剂量组)经翻白草治疗 4 周后,与实验前相比血脂(总胆固醇、甘油三酯)含量均显著减少(P0.05),而小剂量组实验

12、前后血脂无显著差异(P0.05),表明翻白草在降低糖尿病动物血糖的同时可纠正其脂类代谢异常,翻白草对糖尿病动物降血脂疗效与所含黄酮类有关5。四氧嘧啶是一种特异性胰岛 B 细胞毒剂,可选择性破坏实验动物的胰岛 B细胞引起实验性糖尿病。众多实验性研究表明,有些中药复方或单味药有刺激实验动物胰岛 B 细胞分泌胰岛素及促使受损的胰岛 B 细胞修复和再生等功能,从而降低血糖。本实验观察了经翻白草治疗 4 周后糖尿病大鼠胰岛 B 细胞免疫组化的形态学改变。结果表明,翻白草治疗组及药物对照组胰岛 B 细胞免疫组化显示结果相似,没有明显区别,B 细胞数量减少,部分胞质内分泌颗粒明显减少甚至缺失,颗粒着色浅,但

13、大剂量组、中剂量组及药物对照组与糖尿病对照组相比,部分 B 细胞胞质内分泌颗粒相对较多,着色较深,其中以实验大、中剂量组这种阳性细胞较多,翻白草治疗组及药物对照组外分泌部腺泡细胞间见到单个免疫反应阳性细胞,提示翻白草不仅对糖尿病大鼠受损的胰岛 B 细胞形态结构具有一定的改善作用,还可以使胰岛再生,而且大、中剂量组这种作用相等。【参考文献】1 胡绍文,郭瑞林.实用糖尿病学,第 1 版M.北京:人民军医出版社,1998:18.2 刘金环,阮维国翻白草水煎剂中微量元素的研究J.河北大学学报(自然科学版),2003(3):337.3 艾 静,郭 键,张永春,等四氧嘧啶致大鼠高血糖模型的实验研究J.哈尔

14、滨医科大学学报,2001,35(2):94.4 姜长玲,胡晓晨,赵晓刚.翻白草对 2 型糖尿病脂代谢和血液流变学的影响J.中国中医药信息杂志,2002,9(8):41.5 韩永明,张业辉,熊迎春. 中药翻白草对糖尿病大鼠血糖的影响J.湖北中医学院学报,2002,4(1):23.翻白草不同方法提取物对小鼠降血糖作用日期:2008-06-09 来源: 作者:王琦,周玲仙,罗晓东字体:大 中 小 翻白草(Potentilla discolor Bunge)为蔷薇科委陵菜属多年生草本植物,根部或干燥全草均可入药。全国各地均有分布,为我国传统中药1。近年来,民间流行用翻白草 治疗 糖尿病并取得一定的疗效

15、。为了解翻白草降血糖作用机制,开发糖尿病新药或保健品,本 研究 对翻白草进行提取,按极性不同的 3个部分,利用四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠模型进行活性筛选,以确定具有较强降血糖活性的部分。 1 材料与 方法 转载于 ttp:/11 实验动物 昆明种小鼠(雄性)100 只(昆明动物所)(合格证编号:滇实验动物证第 2002106 号)。12 主要试剂及仪器 四氧嘧啶(美国 Sigma 公司);葡萄糖测定试剂盒(上海荣盛生物技术有限公司,批号 20030101):消渴丸(广州中一药业有限公司,批号:E01895);722 型光栅分光光度计(上海分析仪器总厂)。13 方法 131 样品提取并初步分离 利

16、用乙醇浸提,乙酸乙酯萃取,D101 大孔树脂柱层析,将翻白草分为 I部分,分别对应 D101 大孔树脂水洗脱部分、D101 大孔树脂甲醇洗脱部分、乙酸乙酯萃取物。132 实验动物糖尿病模型的建立2,3 实验动物体重(262)g,禁食 16h,准备给予四氧嘧啶造模。四氧嘧啶溶液临用前配制,浓度为 12mgml。给药方式为腹腔注射,剂量 120mg/(kgbw),一周后,于第 8d 断食 3h 后,眼眶内眦采血,离心取上层血清在 24h 内用葡萄糖氧化酶法测定血糖。取血糖值12mmolL 的糖尿病模型小鼠分组进行翻白草降血糖实验。133 实验动物分组及处理 取血糖值12mmolL 的糖尿病模型小鼠

17、 54 只,正常小鼠 10 只作为对照组,共计 64 只,分为 6 组,分为糖尿病模型组(11 只)、阳性对照组(10 只)和 3 个实验组(各 11 只)。正常对照组、糖尿病模型组给予蒸馏水,剂量为每天 450mg(kgbw);阳性对照组给予降血糖药物消渴丸,剂量为 375g(kgbw);3 个实验组 I分别给予 D101 大孔树脂水洗脱物、D101 大孔树脂甲醇洗脱物、乙酸乙酯萃取物,剂量均为每天 450mg/(kgbw)。给药方式为灌胃,每天 1 次,时间 30d。30d 后,测血糖值,条件和方法同前。30d 内每周称各组小鼠空腹体重,观察体重变化。134 统计 分析 采用 SPSS11

18、0 统计软件,进行方差分析及 t 检验。2 结果实验组、与糖尿病模型组比较,血糖值降低差异无统计学意义(P005),表明对糖尿病小鼠降血糖作用不明显。而消渴丸组与实验组与糖尿病模型组比较,血糖降低差异有统计学意义(P005),可认为翻白草各部分对糖尿病小鼠的体重没有 影响 。转载盟 http:/表 1 翻白草对糖尿病小鼠血糖水平的影响(略)注:与糖尿病模型组比较,a P005),可认为翻白草的乙酸乙酯部分对正常小鼠的体重、血糖均无影响。3 讨论翻白草的根主要含鞣质及黄酮类化合物1。黄酮类化合物具有多种生理活性,也具有降血糖的活性,其降血糖机制是多方面的4,5。提示其降血糖活性成分可能是其中的黄

19、酮类物质。本实验结果表明,翻白草乙酸乙酯萃取物具有较强的降血糖作用,并且对正常小鼠的体重、血糖均无影响。其降血糖活性成分可能是其中的黄酮类物质,其降血糖作用机制有待进一步研究。而其余 2 个部分未显示降血糖作用,原因可能是提取分离过程中一些成分发生损失,或在该剂量下未能显示降血糖活性。【 参考 文献 】1 江苏新医学院.中药大词典M.下册.上海: 科学 技术出版社,1986:2705.2 张均田. 现代 药理实验 方法 M.上册.北京医科大学 中国 协和医科大学联合出版社,1998:981-986.3 郑建仙.功能性食品M.3 卷.北京:中国轻 工业 出版社,1999:484-489.4 陈勇,张晴.五羟基黄酮的药理学研究近况J.中草药,1998,29(8):569-570.5 王玮,王琳.黄酮类化合物的研究进展J.沈阳医学院学报,2002,4(2):115-119.

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