1、ABO 血型正定型操作规程1、 原理根据红细胞表面有无 A 抗原和（或）B 抗原，将血型分为 A型、B 型、AB 型及 O 型 4 种。可利用红细胞凝集试验，通过正定型鉴定 ABO 血型。正定型用已知抗 A 和抗 B 分型血清来测定红细胞上有无相应的 A 抗原或（和）B 抗原。2、 试剂2.1 抗 A、抗 B 血型定型试剂，有批文准号。2.2 受检者 35%红细胞盐水悬液。3、 操作3.1 试管法3.1.1 取洁净小试管 2 支，分别标明抗 A、抗 B，用滴管分别滴加抗 A、抗 B 分型试剂各一滴于试管底部，再用滴管分别加入受检者 35%红细胞盐水悬液 1 滴混匀。3.1.2 立即以 1000
2、r/min 离心 1 分钟。3.1.3 将试管从离心机取出，轻轻摇动试管，使沉于管底的红细胞 浮起，先以肉眼观察有无凝集或溶血现象。如肉眼未见凝集，应将反应物倒于玻片上，以低倍镜观察。3.1.4 观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B 亚型、类 B 或 cisAB 的发现。3.1.5 凝集强度判断标准4+：红细胞凝集成一大块，血浆清晰透明。3+：红细胞凝集成数小块，血浆尚清晰。2+：红细胞凝块分散成数小块，周围可见到游离红细胞。1+：肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞：镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞。MF：即混合凝集外观，是指镜下可见少数红细胞凝集，而
3、绝大多数红细胞仍呈分散分布。：镜下未见凝集，红细胞均匀分布。3.2 玻片法3.2.1 取清洁玻片一张（或凹玻板） ，用记号笔划成方格，标明抗A、抗 B，分别滴加抗 A、抗 B 血清一滴于相应的方格内，再加受检者 5%红细胞悬液一滴混匀。3.2.2 将玻片（或凹玻板）不断轻轻转动，使血浆与细胞充分混匀，连续 15 分钟，肉眼观察有无凝集或溶血反应，再在低倍镜下观察结果。ABO 血型反定型操作规程1、 原理用已知的 A1、B 细胞测定被箭血清中有无相应的抗 A 或抗 B 抗体，结合正定型结果判断 ABO 血型。2、 试剂为成熟市售标准红细胞，主要组成组分为：A 1、B 型红细胞，葡萄糖、枸橼酸、核
4、苷酸、抗生素等。3、 样本要求被检血清或血浆。4、 操作（试管法）4.1 取被检者血清（血浆）各 1 滴分别加于 2 支标记好的小试管中；4.2 分别各加 A1、B 试剂红细胞；4.3 混匀后离心，1000rmp 离心 1 分钟或者 3400rmp 离心 15 秒；4.4 先观察是否溶血（溶血或是阳性结果，或是细菌污染） ，再轻轻摇晃，使红细胞再悬浮起来；4.5 观察是否有凝块，记录结果。如可疑可借助显微镜观察凝集情况。5、结果判断6、方法的局限性反定型试验必须与正定型一起进行，正反定型不一致必须做进一步研究。单独的反定型结果不能作为判断血型的依据。正定型 反定型 血型抗 A 试剂 抗 B 试
5、剂 A1细胞 B 细胞+ + A + + B + + O+ + ABRHD(IgM)血型定型操作规程1、 原理应用红细胞凝集试验检测红细胞抗原。RH（D）血型是由红细胞表面存在或缺失 D 抗原确定。RH 血型用临床上抗原性最强的 D 抗原作血型鉴定，凡是带有 D 抗原者称为 RH 阳性，不带D 抗原者称为 RH 阴性D 抗原与细胞株 BS226 细胞产生的单克隆抗体发生特异性反应。2、 试剂市售成熟 RHD(IgM)血型定型试剂。3、 样品要求应使用新鲜、非溶血标本，可以是未加抗凝剂的血液标本，或者是用 EDTA 或枸橼酸抗凝的血液标本。必要时应用等渗盐水加入经过洗涤两遍以上的红细胞悬液。严重
6、脂血、黄疸或微生物污染过的标本可能导致结果判断错误。4、 操作4.1 试管法4.1.1 用等渗盐水配制 35%的红细胞悬液；4.1.2 在相应标记好的试管中分别加 1 滴试剂和 1 滴红细胞悬液；4.1.3 1000rmp 离心 2 分钟或 3000rmp 离心 20 秒；4.1.4 轻轻震荡，悬浮沉积细胞，观察凝集结果；4.1.5 若反应为阴性、弱阳性或可疑，20 0C 孵育 15 分钟；4.1.6 1000rmp 离心 2 分钟或 3000rmp 离心 20 秒；4.1.7 轻轻震荡，悬浮沉积细胞，观察凝集结果；4.1.8 出现凝集为阳性，未出现凝集为阴性。4.2 纸卡法4.2.1 在一块
7、纸卡凹孔中滴 1 滴试剂；4.2.2 加 1 滴等体积全血，混匀；4.2.3 轻摇纸卡，观察凝集结果；4.2.4 出现凝集为阳性，未出现凝集为阴性。5、结果判断反应强度 凝集4+ 强反应，单一凝集块，无游离红细胞3+ 强反应，几个大的凝集块，无游离红细胞2+ 很多小的凝集块中混有大的凝集块，无游离红细胞1+ 在游离红细胞背景下有很多小的凝集块 肉眼可观察游离红细胞背景下的小凝集块，显微镜下可观察到很多小的凝集块 均匀分布的红细胞悬液，不能观察到凝集的红细胞如果凝集块轻轻摇动就分散开，则判读为阴性。推荐使用试管法。ABORhD 血型定型试剂卡标准操作程序1、 准备工作微柱凝胶试剂卡的准备：观察外
8、观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（1825）平衡，再用专用离心机离 心 5 分钟。2、 检测标本的准备：2、1 红细胞悬液的制备：取被检者压积红细胞 10 微升，加入1.21.5 毫升红细胞稀释液，外观应为均匀淡红色，无絮状物和血块。2、2 血清标本的制备：采集被检对象静脉血，放入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中，10 分钟后离心，取上清；或者静脉血采入无抗凝剂试管中，4放置 12 小时，或 37放置 2 小时后离心，2000r/min,10 分钟，取上清（该上清不得有絮状物或沉淀） 。3、 操作步骤3、1 将准备好的 ABO.RhD 血型定型试剂卡做好标记3、2 将待检者 0.
9、5%红细胞悬液分别加入第 1 至第 4 管中，每管50ul3、3 将待检者血清分别加入第 5 和第 6 管，每管 50ul3、4 将已知的 A 型和 B 型红细胞 0.5%浓度悬液或 ABO 血型反定型红细胞试剂，每管 50ul 分别加入第 5 和第 6 管3、5 即刻使用专用离心机离心，900rpm2 分钟，1500rpm3 分钟，取出肉眼判定结果4、 结果判定：4、1 阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。4、2 阴性结果：被检红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。5、 血型判定：6
10、、注意事项血型 抗 A 抗 B 抗 D 阴性对照 A 细胞 B 细胞A + + +B + + + O + + +D阳性AB + + + A + +B + + O + +D阴性 AB + + 6、1. 检测标本必须为抗凝血。6、2 红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。6、3. 血清标本：血清标本必须充分去纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍阴性红细胞沉淀，呈假阳性反应。6、4. 如在微柱凝胶管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也
11、不排除其他原因所致溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论。6、5. 若结果为或 1需进一步分析，可能为亚型或弱化抗原。6、6. 红细胞悬液的浓度控制在 0.50.8之间，否则可能出现漏检或混合凝集。6、7. 每日实验前，先取出微柱凝胶卡放置一段时间至室温，以防冷凝集。6、8. 试剂卡应放在 18-25储存，如若长期放在 4冰箱，建议每 1-2 个月取出，用专用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。A型、B型红细胞悬液的制备1、 原理离心力原理2、 试剂生理盐水3、 操作3.1 A型红细胞悬液和B型红细胞悬液的来源:从抗体亲和力强凝集效价较高的健康人采取。3.2 取五个健康
12、者同型新鲜红细胞混匀,离心取血球100ul放入另一洁净干燥试管内。3.3 加生理盐水3ml,混匀后离心弃去上清液。3.4 重复上一步骤2次。4、 加生理盐水1.2ml,并做好A和B型红细胞标识和制备日期。抗 A、B 型血清效价测定1、 原理根据红细胞表面有无 A 抗原和（或）B 抗原，将血型分为 A型、B 型、AB 型及 O 型 4 种。可利用红细胞凝集试验，通过正反定型准确鉴定 ABO 血型。正定型用标准抗 A 和抗 B 分型血清来测定红细胞上有无相应的 A 抗原或（和）B 抗原，根据稀释不同的滴度所反应出来的凝集来判断该血浆的抗 A 和抗 B 血浆效价。2、 试剂2.1 抗 A（B 型血）
13、 、抗 B（A 型血） 。都是有合格证件的商品。2.2 0.8%A、B 型试剂红细胞悬液，是有合格证件的商品。3、 操作3.1 取 10mm60mm 清洁干燥试管 16 支，排成 2 排，分别标明A、B，每排标明稀释倍数 2、4、8、16、32、64、128，最后一管为对照管。3.2 每管各加生理盐水 0.2ml。3.3 第一排第一管加抗 B 血清 0.2 ml，第二排第一管加抗 A 血清0.2 ml。3.4 分别用吸管将第一管内溶液吸放 3 次，使之混匀，吸 0.2 ml3.5 至第二管，因此连续稀释至第七管，混匀后弃去 0.2 ml。第八管不加血清，作为盐水对照。3.6 分别加入相应 2%
14、红细胞悬液 0.2 ml，即第一排加 B 型红细胞悬液，第二排加 A 型红细胞悬液。3.7 将试管架振摇使之混匀，置 1520室温 1 小时（或1000r/min 离心 1 分钟） ，用肉眼观察结果，呈弱凝集反应的最高稀释倍数的倒数即为该抗体的效价。对照管应无凝集现象。3.8 抗 A 效价应不低于 128，抗 B 效价应不低于 64。抗 D 血清效价测定1、 原理RH 血型用临床上抗原性最强的 D 抗原作血型鉴定，凡是带有 D 抗原者称为 RH 阳性，不带 D 抗原者称为 RH 阴性。根据稀释不同的滴度所反应出来的凝集来判断该血浆的抗 D血清效价。2、 试剂生理盐水3、 操作3.1 取 10m
15、m60mm 清洁干燥试管 8 管放在试管架上，排成 1 排，表明稀释倍数 2、4、8、16、32、64、128，最后一管为对照管。3.2 每管各加生理盐水 0.2 ml。3.3 第一管加抗 D 血清 0.2 ml。3.4 分别用吸管将第一管内溶液吸放 3 次，使其混匀，洗 0.2 ml至第二管，依次连续稀释至第七管，混匀后弃去 0.2 ml。第八管不加血清，作为生理盐水对照。3.5 加入 2%红细胞悬液 0.2 ml。3.6 将试管架振摇使之混匀，置 1520室温 1 小时（或1000r/min离心 1 分钟） ，用肉眼观察结果，呈弱凝集反应的最高稀释倍数的倒数即为该抗体的效价。对照管应无凝集
16、现象。3.7 抗 D 效价应不低于 64。盐水配血法操作规程1、 原理完全抗体分子链较长，在电解质溶液中，能克服红细胞表面电荷的排斥力，与相对应的抗原结合，使红细胞凝集。2、 试剂生理盐水3、 试管盐水配血法操作3.1 核对申请单上患者和献血员信息；3.2 取清洁试管 3 支，作“主、次、合”标记；3.3 按下表加反应物；反应物 主侧（滴）次侧（滴）合侧（滴）受血者血清 1 - 0.5献血员 3%5%红细胞 1 - 0.5献血者血清 - 1 0.5受血者 3%5%红细胞 - 1 0.53.4 混匀，于室温下以 1000r/min 离心 1 分钟，取出试管后观察上清液是否有溶血现象，然后轻摇试管
17、，观察有无凝集，必要时用显微镜观察。4、 玻片盐水配血法操作4.1 核对申请单上患者和献血员信息；4.2 取清洁试管 3 支，作“主、次、合”标记；4.3 加反应物同上表；4.4 置室温 30 分钟，并随时混匀，然后观察红细胞有无凝集及色背景下先观察上清液是否有溶血现象，然后轻摇试管，观察有无凝集，必要时用显微镜观察。5、 结果判断同型配血，主侧、次侧均应不凝集及溶血，如发生凝集或溶血均不可输血，并应追查原因。凝聚胺操作规程1、 原理红细胞表面带有大量负电荷，以避免其产生自发性凝集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成 Zeta
18、电位，Zeta 电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM） ，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以及、促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表带有的负电荷，使红细胞 Zeta 电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性凝聚。最后，加入悬浮液（Resuspending） ，Resuspending 具有中和凝聚（Polybrene）的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结 果为阴性，但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺
19、凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。2、 试剂凝聚胺介质试剂；低离子溶液；凝聚胺溶液；悬浮液；生理盐水。3、 操作3.1 取试管 2 支，标主次侧，主侧管加病人血浆 2 滴， ，2 供血者3%5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1 滴，次侧管加病人 3%5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1 滴，供者血浆 2 滴。3.1 各加 LIM0.7ml，混合均匀后，再加 Polybrene 溶液 2 滴，并混合均匀。3.2 用血库专用离心机 1000g 离心力，林新 0 秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留 0.1 ml 液体。3.3 轻轻摇动试管，目侧红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。3.4
20、 最后加入 Resuspending2 滴，轻轻摇动试管混合并同时观察结果。如果在 3060 秒内凝集散开，代表是由 Polybrene 引起的非特异性凝集，配合结果相合；如果凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。海尔 HXC-106 血库专用冰箱操作规程1 仪器原理和使用范围1.1 采用压缩机制冷原理。具钢板内外壳、数字外示温度、双门、可调用近期温度打印等设计特点。1.2 适用于血库贮存血液； 1.3 环境条件-防震、防潮、干燥阴凉、符合卫生学要求；2 技术参数：2.1 温度控制范围：26 摄氏度3 操作步骤3.1 开机自
21、动运行半小时后调试温度，使其控制在 26 摄氏度；3.2 打开冰箱出库或入库血液制品后尽快关闭冰箱内外门。4 注意事项4.1 严禁关闭血库冰箱电源，遇到停电要及时与设备科联系处理，保证血液在适宜的温度下保存；4.2 数字显示温度与冰箱内温度计的差值达到一度时，及时寻找原因处理；4.3 除作贮存血液外禁止存放其他物品；5 仪器维护5.1 日常维护-冰箱内保持清洁，经常注意温度变化；5.2 周维护-每周一用 75%乙醇檫拭冰箱内壁；标本试剂冰箱操作维护规程1、 仪器的原理和使用范围1.1 采用压缩机制冷原理。具钢板内外壳、可调温度等设计特点；1.2 用与贮存配血标本、血袋小样、回收血袋及生化免疫标
22、本；1.3 仪器工作档案：电源 220V；50HZ1.4 环境条件-防震、干燥阴凉、符合卫生学要求。2、 技术参数2.1 温度控制范围：26，温度波动范围:13、 操作步骤3.1 开机自动运行半小时后调试温度，使其最终控制在 28；3.2 打开冰箱后尽快关闭冰箱门。3.3 严禁关闭冰箱电源，遇到停电要及时与设备科联系处理，保证贮存温度;温度超过 28时要及时寻找原因处理；4、 仪器维护5.1 日常维护-冰箱内保持清洁，经常注意温度变化；5.2 周维护-每周一用 75%乙醇檫拭冰箱内壁，消毒效果的检测见每月的微生物监测结果。湘仪 TDZ4-WS 型低速台式离心机操作维护规程1 仪器原理和适用范围
23、1.1 离心机是利用离心机转子高速旋转产生强大的离心力，加快液体中颗粒的沉降速度，把样品中不同沉降系数和不同密度的物质进行分离、浓缩和提纯。1.2 适用于中小实验室作血浆、血清、悬浮液等分离沉淀工作。1.3 仪器工作条件电源 220V；50Hz；5A；40W 功率； 1.4 环境条件防尘、防震、干燥、通风。2 技术参数2.1 转速范围 04000 转/分，PWM 控制调速。3 操作步骤3.1 检查离心机是否放置平衡，转子体上螺帽是否旋紧，轻推转子体是否旋转灵敏；3.2 打开机盖，小心将待离心试管放入护管内，注意对称两边护管重量应基本一致； 3.3 关上门盖，注意门盖是否紧闭，接通电源开启电源开
24、关； 3.4 在停止状态下，根据面板显示,设置转速、时间；3.6 当面板上时间倒计时至“0”时，离心机自动停转，降到0r/mim 时。若需在运转状态下停止离心，可按 OFF 停止运转；3.7 等旋转停止后，打开门盖取出离心管；3.8 工作日结束时，应拔出电源插头，确保安全。4 注意事项4.1 为延长使用寿命，减少故障发生，必须注意对称两边的离心管护管内的等重要求；4.2 为确保离心机内气溶胶不造成实验室污染，应在停止旋转后方可打开门盖；4.3 当发生不正常的噪音或有振动时,应立即切断电源,排除故障；4.4 离心机四角橡胶机脚应在平整台面上均衡受力；4.5 在运转中不得移动仪器，不可打开门盖。5
25、 仪器维护5.1 日常维护保持机外清洁，注意对称平衡，观察噪音异常；5.2 月维护每月用消毒液清洗护管套及机内外壳；5.3 按需维护根据使用频率及时更换碳刷，勿使碳刷后金属丝磨擦整流子轴柱，造成硬性损坏；TD-3A 血型血清学离心机操作规程1、 适用范围1.1 红细胞实验：红细胞血型定型，抗体筛检、鉴定及交叉配血。1.2 血小板实验：血小板配型、血小板血型定型、血小板抗体筛检、鉴定。2、 结构特征2.1 铝合金转子及挂放微柱凝胶卡的卡架能保证离心时微柱凝胶卡孔的轴线与离心方向夹角为零。使离心后微柱凝胶卡内凝胶截面呈水平状态，达到理想结果。2.2 数显即时转速，倒计时离心时间，运行结束停止后盖锁
26、伴提示音自动打开。3、 仪器原理根据电动机旋转原理达到离心目的，采用微机控制、触摸面板、变频电机驱动、固定程式离心等设计特点。4、 技术参数4.1 供电电源：AC 22022V 50Hz1Hz4.2 额定功率：120W4.3 环境温度：10 0C-400C4.4 环境湿度：85%4.5 电机转速：1500r/min 4.6 最大离心力：183g4.7 计时时间：99 分4.8 整机噪音：75dB4.9 可配转子：微柱凝胶卡转子4.10 外型尺寸：410mm320mm210mm4.11 重量：9Kg（不含转子）5、 操作步骤：5.1 连接电源，液晶屏幕显示 “chang chun bo yan”
27、.数秒后，门锁自动打开，液晶屏显示“lid is open” 。5.2 将装有微柱凝胶卡的转子放在电机轴上，然后盖好盖子，盖锁关闭，液晶屏显示第一级程序“I 0900 02:00”.5.3 按运行键，电机旋转开始运行。当第一级程序运行完毕，接着运行第二级程序“2 1500 03”。工作结束后，液晶屏显示“lid is open”，盖锁自动打开，并伴提示音。5.4 如果盖锁没有关闭即开机运行，液晶屏会显示“close the lid!”,这时必须盖好盖子，关闭盖锁才能开始运行。5.5 如果在运行中需要终止，按“停止”键，当电机转速为零时，盖锁自动打开，并伴提示音，液晶屏显示“lid is ope
28、n”.5.6 未运行时，需要打开盖子，按“停止”键，盖锁即开。6、 注意事项6.1 安放离心机的台面应坚实平整，四只橡胶底脚都应与台面接触和均匀受力，以免产生震动。 6.2 电源必须有接地线。6.3 离心前检查离心机转子有无松动。微柱凝胶卡必须对称放入。6.4 离心机在工作时，不得移动，不得打开盖子。6.5 开机后，如发现液晶屏无显示，请查看电源和保险丝。6.6 有时程序显示不正确字符，这时关闭电源，几秒钟后再开机即可清除。6.7 如发生意外，盖锁未打开，用开锁螺丝刀从离心机右侧孔顶入将锁打开。6.8 离心结束盖好离心机盖子。当日工作结束后，锁紧盖锁后关闭电源开关。FYQ 免疫微柱孵育器操作规
29、程1、 适用范围370C 恒温孵育实验。2、 技术参数2.1 供电电源：AC 22022V 50Hz1Hz2.2 环境温度：10 0C-370C2.3 孵育温度：37 0C1.50C2.4 外型尺寸：370mm270mm183mm2.5 最大功率：60VA2.6 重量：5.3Kg3、 操作步骤3.1 打开电源开关，液晶屏显示“chang chun bo yan”.，3 秒钟后显示“heating XX.XX0C”,待温度升到 370C 时显示”15:00 37.000C”并伴有提示音提示已达到孵育温度，打开盖子放进免疫微柱凝胶卡，盖上盖子。3.2 按需要设定孵育时间，按“上”或“下”键增加或减
30、少 3 分钟孵育时间。3.3 时间设定后，按“运行”键开始进行倒计时，孵育时间到后，液晶屏显示“15：00 37.00 0C”同时伴有提示音。3.4 按“复位”键，恢复初始状态。4、 注意事项4.1 孵育前应观察液晶屏显示温度是否已达到 370C1.50C。4.2 不操作时盖上盖子，以保持孵育室内温度。4.3 避免短时间内频繁开动电源。4.4 避免与频繁启动的大功率用段设备同一条线路，以免引起干扰。4.5 放置在干燥、洁净的环境中使用，安放孵育器的台面应坚实平整，四只橡胶底脚都应与台面接触和均匀受力。4.6 如长期不用时，应拔下电源插头，并用防尘布将机体该好。不规则抗体筛检卡标准操作程序1、
31、准备工作1、1 微柱凝胶试剂卡的准备：观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（1825）平衡，再用专用离心机离心 5 分钟。1、2 检测标本的准备：1、3 红细胞悬液的制备：将筛检红细胞或谱细胞配成 0.5%0.8%浓度的悬液。1、4 血清标本的制备：采集被检对象静脉血，放入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中，10 分钟后离心，取上清；或者静脉血采入无抗凝剂试管中，4放置 12 小时，或 37放置 2 小时后离心，2000r/min,10 分钟，取上清（该上清不得有絮状物或沉淀） 。2、 操作步骤2、1 将准备好的不规则抗体筛检卡做好标记2.2 将配好的筛检细胞或谱细胞悬液加入标好
32、的微管中，各一滴（或 50l）2、3 分别立即加入被检者血清 1 滴（或 50l）2、4 加样后的试剂卡，置 37中孵育 15 分钟。2、5 使用专用离心机离心 5 分钟， （900rpm2 分钟，1500 rpm3 分钟） ，取出肉眼观察结果。3、 结果判定：根据所提供的筛检红细胞或谱细胞的反映格局来判定结果例：按（-） ；（4+） ；III（-）的实验结果及提供如下的筛检红细胞反映格局来分析3、1筛检细胞反映格局D C E c e Jka JKb M N S s Fya Fyb Dia K k Lea Leb P1 3、2 阴性结果用排除法；阳性结果用可能包含法以前五种抗原为例：（-） 可
33、排除 D、C、e；（4+） 判断可能含有 D、E、c；III（-） 可排除 D、C、c、e；综上，可认为：此样品血清中可能含有E4、 注意事项4、1 应用直接抗人球蛋白微柱凝胶免疫试验检测病人红细胞时，一定要用适量 EDTA 的试管采血液标本，该标本不能放入 4-10冰箱保存，以避免红细胞在病人体外致敏所致假阳性反应。4、2 红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。4、3 血清标本：血清标本必须充分去纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍阴性红细胞
34、沉淀，呈假阳性反应。4、4 如在微柱凝胶管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论其原因。4、5 每日试验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。4、6 筛检细胞或谱细胞悬液的浓度严格控制在 0.5%0.8%之间。4、7 试剂卡应放在 18-25储存，如若长期放在 4冰箱，建议每1-2 个月取出，用专用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。抗人球蛋白交叉配血卡操作程序1、 准备工作1、1 微柱凝胶试剂卡的准备：观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（1825）平衡，再用专用离心机离心 5 分钟。
35、1、2 检测标本的准备：1、2、1.红细胞悬液的制备：将受血者与献血者的红细胞和血浆分离，各取其压积红细胞 10 微升，分别加入含 1.21.5 毫升红细胞稀释液的两个试管中，外观应为均匀淡红色，无絮状物和血块。1、1、2.血清标本的制备：采集被检对象静脉血，放入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中，10 分钟后离心，取上清；或者静脉血采入无抗凝剂试管中，4放置 12 小时，或 37放置 2 小时后离心，2000r/min,10 分钟，取上清（该上清不得有絮状物或沉淀） 。2、 操作步骤2、1. 将准备好的抗人球交叉配血卡做好标记。2、2 将受血者血清 1 滴（或 50 l）与献血者红细胞 1 滴（或
36、50 l）加入主侧管中。2、3 将受血者红细胞 1 滴（或 50 l）与献血者血清 1 滴（或50 l）加入次侧管中。2、4. 加样后的试剂卡，置 37中孵育 15 分钟。2、5 .使用专用离心机离心 5 分钟，900rpm2 分钟，1500 rpm3 分钟，取出肉眼观察结果。3、 结果判定：3、1 阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管底部，表明受血者与献血者血型相合。3、2 阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中，表明受血者与献血者血型不相合。4、 注意事项4、1. 应用直接抗人球蛋白微柱凝胶免疫试验检测病人红细胞时，一定要用适量 EDTA 的试管采血液标本，该标本不能放入 4-10冰箱保存
37、，以避免红细胞在病人体外致敏所致假阳性反应。4、2 红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。4、3. 血清标本：血清标本必须充分去纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍阴性红细胞沉淀，呈假阳性反应。4、 4 如 在 微 柱 凝 胶 管 中 出 现 溶 血 现 象 ， 强 烈 提 示 为 红 细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论其原因。4、5. 每日试验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。
38、4、6. 红细胞悬液的浓度控制在 0.5%0.8%之间。4、7. 试剂卡应放在 18-25储存，如若长期放在 4冰箱，建议每1-2 个月取出，用专用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。血型不完全抗体检测卡交叉配血标准操作程序1、 准备工作1、1 微柱凝胶试剂卡的准备：观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（1825）平衡，再用专用离心机离心 5 分钟。1、2 检测标本的准备：将受血者与献血者的标本 3000rpm 离心 5分钟待用。1.3 将受血者与献血者的红细胞配制成 0.5-0.8%的悬液。1.4 将准备好的检测卡标记上受血者的姓名及配血日期。2、 操作步骤：2.1 受血者血浆与献血者红细胞悬液各 50ul 先后加入主侧管中；2.2 受血者红细胞悬液与献血者血浆各 50ul 先后加入次侧管中；2.3 370C 孵育 15 分钟；2.4 900rpm 离心 2 分钟，1500rpm 离心 3 分钟；2.5 肉眼观察结果。3、 结果判定：3.1 阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管尖底部，表明受血者与献血员血型相合。
