1、实验二 细胞膜的通透性观察,生命科学学院,细胞生物学实验,一、实验目的: 1、了解溶血现象及其发生机制 2、了解各类物质进入细胞的速度 3、了解并掌握细胞渗透实验的原理,二、实验原理:将红细胞放入各种溶液中,由于细胞膜具有选择透过性,有的溶质可以进入细胞,有的不能进入。进入红细胞的溶质可以提高红细胞的渗透压,促使水分进入细胞,导致细胞膨胀,进而破裂,细胞悬液变成红色透明的血红蛋白溶液,这就是溶血现象。由于溶质进入细胞的速度不同,因此,溶血时间也不同。 测量指标: 溶血时间,三、实验用品: 1、试剂: 蒸馏水; 2种低渗溶液:0.017mol/L 氯化钠和 0.032mol/L 葡萄糖; 5种等
2、渗溶液:0.17mol/L氯化钠、0.32mol/L 葡萄糖、0.17mol/L 氯化铵、 0.32mol/L 甘油、 0.32mol/L 乙醇。 2、材料: 鸡红细胞悬液(课前制备) 3、器材:50ml 烧杯/离心管、1ml移液枪、1ml枪头、试管、试管架、标签纸。,1.溶血现象的观察: 取试管 1支,加入10 ml 蒸馏水,再加入1 ml 制备好的鸡红细胞悬液轻摇使其混匀,注意观察溶液颜色的变化,由不透明的红色悬液变成红色透明的血红蛋白溶液。2.红细胞的渗透性观察 取试管一支,加入0.17 mol/L 氯化钠溶液10 ml,再加入1 ml 制备好的鸡红细胞悬液,轻轻摇动,混匀后静置于温室中
3、,观察试管中发生溶血的时间及其变化。3、显微镜下观察溶血与未溶血溶液中的红细胞形态。,四、实验方法与步骤:,注意事项 : 1. 溶血现象可用一张有字的纸来辅助识别,透过溶液能够清晰看到溶液后方纸上的字迹时,为完全溶血。 2. 因相对分子质量大小对膜通透性有影响,所以将溶血时间适当地延长至15min,15min时仍然不溶即判断为不溶血。 3. 实验过程中肉眼观察溶液颜色变化,记录溶血时间易受主观因素影响,造成偏差,因此应始终由一位同学来观察判断溶血情况,尽量减小这种主观因素导致的偏差。 4.测试时,不应强力摇晃,以免造成人为的红细胞破裂。,五、作业:,1、根据观察到的现象完成下面表格。,2、如何理解细胞膜是选择性半透膜?,