1、方格星虫延缓衰老作用研究沈先荣 ,蒋定文 ,贾福星 ,陈美华(海军医学研究所 海洋生物研究中心 ,上海 200433)摘 要 :目的 :研究方格星虫提取物的延缓衰老作用。 方法 :SD 大鼠口服给药 30d 后 ,采用硫代巴比妥酸显色法 ( TBA 法 )测定受试大鼠血清丙二醛 (MDA)含量 ,采用羟胺法测定血清 SOD 活性。采用果蝇生存试验测定方格星虫提取物对 Oregon K野生型黑腹果蝇生存时间的影响。 结果 :方格星虫提取物经口给予 SD 大鼠不同剂量的方格星虫提取物 30d 后 ,大鼠血清 MDA 含量显著降低 ,血清 SOD 活性显著增强。方格星虫提取物显著延长雌雄果蝇的平均寿
2、命 ,显著延长雄果蝇的最高寿命。 结论 :方格星虫提取物具有明显的延缓衰老作用。关键词 :方格星虫 ;延缓衰老 ;丙二醛 ;超氧化物歧化酶 ;果蝇中图分类号 :R931. 74 R977. 9 文献标识码 :A 文章编号 :100223461 (2004) 0120030203Study on anti2senescence effect of Sipunculus nudus preparationSHEN Xian2rong , J IAN G Ding2wen , J IA Fu2xing , et al .( M arine B iology Research Center , N a
3、val Medical Research Instit ute , S hanghai 200433 , Chi2na)Abstract :Objective To examine the anti2senescence effect of S i puncul us nudus preparation inrats and drosphilaes. Methods S i puncul us nudus preparation was extracted from S i puncul usnudus with 10 mmol L - 1 PB , (p H 7. 2) , containi
4、ng 1mol L - 1 NaCl. Further purification wasachieved by ultra2filtration and precipitation with alcohol. The malondialdehyde (MDA) concen2tration and SOD activity in rat serum were detected after 30 days S i puncul us nudus preparationnutrition. The effect of S i puncul us nudus preparation on droso
5、phila span was detected with ordi2nary method. Results While the MDA concentration of SD rat serum was decreased , the SOD ac2tivity was increased significantly after 30 days S i puncul us nudus preparation nutrition. In thedrosophila span assay , the average span of life both male and female was in
6、creased markedly whilethe concentration of S i puncul us nudus preparation was 0. 156 % , and the longest span was in2creased significantly in male drosophilaes. Conclusion S i puncul us nudus preparation has signifi2cant anti2ageing effect in rats and drosophilaes.Key words :S i puncul us nudus ; a
7、nti2senescence ; MDA ; SOD ; Drosophila方格星虫具有丰富的营养物质。我国多种本草中记载了其食用和药用价值 ,东南沿海民间称其为“海洋冬虫夏草” ,将其作为一种高级补品。闽南人称之为“动物人参”。现代医药研究表明方格星虫含有多种活性物质 ,能够调节机体多种功能 ,并含有丰富的蛋白质、微量元素等 ,具有显著的延缓衰老、抗氧化、抗疲劳、耐缺氧、耐高温等功效 ,对心血管系统具有明显的保护作用 1 。本文从方格星虫制备得到提取物 ,并对其延缓衰老作用进行了研究。1 材料与方法1. 1 材料SD 大鼠 ,20 月龄 ,雄性 ,由复旦大学实验动物部提供。 Oregon
8、K 野生型黑腹果蝇( Drosophila melanogaster) ,由上海预防医学研究院提供。 MDA 测定试剂盒 (批号 :03 中国海洋药物杂志 2004 年第 1 期 (总第 97 期 )20020307 ) 、 SOD 测 定 试 剂 盒 ( 批 号 :20020307) ,由南京建成生物工程研究所提供。方格星虫提取物 ,本实验室采用盐抽提、高速离心、超滤、乙醇沉淀、冷冻干燥等步骤制备得到 ,其主要活性物质含量分别为 :蛋白质 560mg g - 1 、牛磺酸 30mg g - 1 、微量元素Zn 0. 30mg g - 1 、精氨酸 70mg g - 1 。其余为分析纯。1.
9、2 方法1. 2. 1 血清超氧化物歧化酶 ( SOD) 和丙二醛 (MDA) 的测定 SD 雄性大白鼠分为低、中、高三剂量组 ,给药剂量分别为 :0. 04gkg - 1 、 0. 09g kg - 1 、 0. 26g kg - 1 ,另设老龄动物对照组和青年动物对照组 (给予蒸馏水 ) ,每组 10 只动物。连续口服给药 30d。第 31天 ,摘眼球取血 ,离心取血清。按试剂盒说明书测定大鼠血清 MDA 和 SOD 的含量。结果用 Spss软件进行统计分析。1. 2. 2 果蝇生存试验 8h 新羽化果蝇成虫为研究对象 ,雌雄各半。将提取物混入玉米粉中 ,成为 0. 006 %、 0. 0
10、17 %、 0. 052 %和0. 156 %4 个剂量组和对照组 (单纯用玉米粉 ) ,每组样本数为 200 只果蝇。在气温 25 1 条件下培养 ,每四天更换新鲜配制的培养基一次 ,每两天观察记录果蝇生存数和死亡数 ,直到全部果蝇死亡为止。计算出半数死亡时间、平均寿命 ,并由寿命最长的 20 只果蝇计算平均最高寿命 3 。2 结果2. 1 方格星虫提取物对实验动物体重的影响 方格星虫提取物对 SD 大鼠体重的影响如表 1 所示。各剂量组与老龄对照组相比 ,均无显著性差异。表 1 方格星虫提取物对 SD 大鼠体重的影响 ( x s)组 别 动物数 初始体重 (g) 中期体重 (g) 终期体重
11、 (g)老龄对照 10 485 14 512 12 541 16低剂量 (0. 04g kg d - 1) 10 480 18 511 18 538 15中剂量 (0. 09g kg d - 1) 10 482 16 510 18 541 18高剂量 (0. 26g kg d - 1) 10 480 16 513 16 546 20青年对照 10 78 4 140 11 187 11表 2 方格星虫提取物对果蝇生存的影响 ( x s)浓度( %)平均体重 ( g) 半数死亡时间 (天 ) 平均寿命 (天 ) 平均最高寿命 (天 )雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌对照组 611 632 55 69
12、 55 9 68 9 72 4 80 20. 006 609 633 55 71 55 12 68 10 73 3 80 20. 017 613 628 55 71 56 11 68 10 74 4 80 20. 052 612 629 57 72 57 11 70 8 75 2 81 20. 156 609 635 58 72 59 11 3 71 7 3 76 4 3 82 2注 : 3 P 0. 05 , vs 对照组2. 2 方格星虫提取物对大鼠氧自由基的影响 与老龄对照组比较 ,各给药组随着给药剂量的增加 , SD 大鼠血清丙二醛 ( MDA)含量逐渐下降 ,高剂量组下降非常明显 (
13、 p 0. 01) ,见如图 1。方格星虫提取物对 SD 大鼠血清超氧化物歧化酶 (SOD)活力的影响见图 2 ,与老龄对照组比较 ,各给药组随着给药剂量的增加 SOD 活性逐渐上升 ,高剂量组上升非常显著 ( p 0. 01) 。2. 3 方格星虫提取物能够明显延长果蝇生存时间 结果见表 2。高剂量能够显著延长雌雄果蝇的平均寿命和雄果蝇平均最高寿命 ,说明方格星虫提取物具有延年益寿之功效。3 讨论方格星虫又称沙虫、沙肠子、泥蒜、土蒜 ,属13中国海洋药物杂志 2004 年第 1 期 (总第 97 期 )注 : 3 3 P 0. 01 vs 老龄对照组图 1 方格星虫提取物对 SD大鼠 MDA
14、含量的影响注 : 3 3 P 0. 01 vs 老龄对照组图 2 方格星虫提取物对 SD大鼠血清 SOD活性的影响于星虫科 ,形状大致如蚯蚓 ,体色红中带乳白 ,体长 100 200 毫米 ,纵筋层囊和环棘层囊交叉 ,基盘如目状。生活在潮间带泥沙底质的海域。我国沿海居民视星虫为海味珍品 ,常食用。星虫的保健功能在我国古代医药专著多有记载 ,星虫自古以来被视为“海药” ,唐末五代时的著名本草学家李荀广游岭南 ,知晓南国乡土风物 ,熟悉南国药用动植物 ,所著海药本草记载了大量外来药 ,其中就记载了“海蚕沙” ,云其“生南海山石间。其蚕形 ,大如拇指 ,沙甚白 ,如玉粉状 ,每有节。”海蚕沙“味咸
15、,大温 ,无毒。主虚劳冷气 ,褚风不遂。久服令人光泽 ,补虚羸 ,轻身延年不老” 4 。著名本草学家李时珍 ,在其所著本草纲目之中同样也记载有“海蚕”的药用功效 5 。中医认为星虫性味甘、咸、寒 ,有清肺补虚、滋阴降火功效 ,临床实践证实骨蒸潮热、阴虚盗汗、肺虚咳喘、胸闷痰多等疾病 ,食用星虫有疗效。对肺痨咳嗽、神经衰弱、小儿脾虚等疾患 ,若用星虫与姜片煲炖亦有很好的治疗效果。或以淮杞园肉煲星虫汤 ,不仅营养丰富 ,味道鲜美 ,而且具有滋阴养颜之效。我国民间把方格星虫作为治疗虚火上炎及滋阴补肾之食疗药物。一般用于目赤、面部潮红 ,夏日盛暑因烈日暴晒而身体发热、便秘的患者 ,用之可缓解症状。人因
16、疲劳过度 ,四肢乏力 ,多服之可精神焕发 ,精力迅速恢复。此外 ,在闽、台、粤、琼等沿海地区 ,渔民家常用星虫煮稀饭喂养幼儿 ,具有健脾滋补食疗作用。现代医学研究表明方格星虫具有多种生物效应。窦昌贵等发现可口革囊星虫 ( P.esculenta)的水解提取液具有收缩血管、加快心率、增强心博出量和冠脉血流量的作用 ,对失血性低血压有显著升压作用 ,亦有良好的镇静止痛效果。黄哲元等发现可口革囊星虫和拟革囊星虫 ( P. si milis) 的水提取液对小鼠具有明显的抗疲劳 ,耐缺氧、耐高温的作用 ,并发现它们含有 6 7 种人体必需氨基酸 ,尤其以 Lys , Leu , Val 含量较高 ,其微
17、量元素中尤其含锌量很高 ,可达 68 g g - 11 。俞振良等实验发现泥蒜 海虾合剂具有明显的催乳作用 6 。综上所述 ,方格星虫富含多种活性成分 ,具有抗疲劳、延缓衰老、增强免疫 7 、调节血压、耐缺氧、耐高温、催乳 ,以及滋阴降火、清肺化痰等功效 ,是一种具有多种机体调节功能的药食佳品 ,有可能开发成为调节人体多种机能的保健食品或药品。参考文献 : 1 黄哲元 . 星虫 Phascolosoma 制成品 - 土蒜冻的药学研究 J .中国海洋药物 ,1990 ,9 (3) :52.2 李春红 ,李泱 ,李新芳 ,等 . 南沙参多糖延缓衰老作用的实验研究 J .中国药理学通报 ,2002
18、,18 (4) :425.3 邵华强 ,卢连华 . 灵芝延缓衰老作用的实验研究 J .山东中医药大学学报 ,2002 ,26 (5) :385.4 李 著 . 海药本草 (辑校本 ) M .北京 :人民卫生出版社 ,1997 :845 李时珍 . 本草纲目 (第三册 ) . 北京 :中国书店影印 .1988 :86. 6 余振良 ,倪秀生 ,卞如廉 . 泥蒜 - 海虾合剂对小鼠乳汁分泌的影响 J .中国海洋药物 ,1992 ,11 (4) :4. 7 黄玉良 ,黄群 ,黄哲元等 . 复方星虫口服液对小鼠免疫功能的影响 J .福建中医学院学报 ,1998 ,8 (2) :32.(收稿日期 :2003204224)23 中国海洋药物杂志 2004 年第 1 期 (总第 97 期 )
