1、70 论著 中国医学前沿杂志（电子版） 2016年第 8卷第 12期 【摘要】 目的 探讨PAX1基因甲基化定量检测在宫颈癌癌前病变诊断中的应用价值。 方法 选取 2013 年 1月至 2015年 10月就诊于上海交通大学附属第六人民医院的 121例高危亚型人乳头状瘤病毒 （human papilloma virus，HPV）感染患者为研究对象。根据病理学结果将其分为正常宫颈组（28 例） 、低级别 病变组 宫颈上皮内瘤变 （cervical intraepi-thelial neoplasia， CIN） ， 32例 、 高级别病变组 （CIN， 34 例）及癌变组 浸润性宫颈癌（invas
2、ive cervical cancers，ICC） ，27 例 。收集各组患者的宫颈组 织标本及宫颈刮片，采用反转录聚合酶链反应和焦磷酸测序技术定量分析PAX1 基因 9 个位点的甲基 化水平，并通过接受者操作特征曲线（ROC 曲线）计算PAX1 甲基化与各级别宫颈病变的关联性。 结 果 癌变组、高级别病变组、低级别病变组、正常宫颈组PAX1 基因 9 个位点的甲基化平均水平分别 为 4.66%、3.55%、2.10%、1.90%，组间比较差异均具有显著性（P 0.05） 。各组患者宫颈刮片和宫 颈组织PAX1 甲基化水平比较差异均具有显著性（P 0.01） ，其中，癌变组PAX1 甲基化发生
3、率及水 平均显著高于其他三组（P 0.05） 。通过PAX1 基因甲基化水平鉴别诊断宫颈癌和 CIN，结果显示其 ROC 曲线下面积为 0.88（P 0.001） ，具有较高的诊断能力。 结 论 定量检测宫颈组织中PAX1 基因 的甲基化水平能够有效诊断高级别宫颈癌前病变，且其表达与疾病分期有关。 【关键词】 宫颈癌癌前病变；焦磷酸测序； PAX1；甲基化 Clinical diagnosis value of PAX1 methylation for detecting patients with cervical intraepithelial neoplasia ZHU Yun-heng
4、 1,2 , XU Jun 2 , LI Hua-ping 1(1. Department of Obstetrics and Gynecology, the 6 thPeoples Hospital A liated to Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200233, China; 2. Department of Obstetrics and Gynecology, the Minhang Hospital Aliated to Fudan University, Shanghai 201100, China) Corresponding
5、author: LI Hua-ping, E-mail: 【Abstract】 Objective To explore the application value of methylation quantitative detection of PAX1 gene in the diagnosis of cervical precancerous lesions. Method From January 2013 to October 2015, 121 patients with high risk human papilloma virus (HPV) infection in the
6、 6 thPeoples Hospital A liated to Shanghai Jiao Tong University were selected as the study objects. According to the pathological results, they were divided into normal cervical group (28 cases), low grade lesion group cervical intraepi-thelial neoplasia (CIN) , 32 cases, high grade lesion group (CI
7、N , 34 cases), cervical cancer group invasive cervical cancers (ICC), 27 cases. Collected cervical tissue and cervical smear samples in each group, used reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and pyrosequencing technique quantitatively to analyze PAX1 gene methylation at 9 sites an
8、d calculated the relevance of PAX1 gene methylation and all levels of the cervix associated lesions by ROC curve. Result Cervical 9 methylation sites PAX1 average gene was 4.66% in cervical cancer group, 3.55% in high grade lesion group, 2.10% in low grade lesion group, and 1.90% in normal cervical
9、group. There were signi cant di erences among four groups (P 0.05). Further, methylation level of PAX1 gene was associated with higher in cervical cancer group than other groups (P 0.05). The area under the ROC curve detection PAX1 gene methylation level identi cation of cervical cancer were 0.88, a
10、nd associated PAX1 基因甲基化定量检测在宫颈癌 癌前病变诊断中的应用价值 朱 昀 恒 1,2 ， 徐 军 2 ， 李 华 萍 1 （1上海交通大学附属第六人民医院 妇产科，上海 200233； 2复旦大学 附属闵行医院 妇产科，上海 201100） 基金项目：上海市浦东新区卫生系统优秀青年医学人才培养计划（PWRq2013-16） 通讯作者：李华萍 E-mail： DOI ： 10.12037/YXQY.2016.12-16论著 71 中国医学前沿杂志（电子版） 2016年第 8卷第 12期 with statistically signi cant (P 0.001).
11、Conclusion Quanti cation of the levels PAX1 gene methylation of cervical tissue can e ectively diagnose the high-level cervical lesions before cervical cancer, and it related to the expression of disease staging. 【Key words】 Cervical precancerous lesions; Pyrosequencing; PAX1; Methylation 研究资料表明，宫颈癌
12、的发病率和死亡率正逐 年上升，已分别居女性恶性肿瘤发病率和死亡率 的第 3 位和第 4 位 1 。研究显示，我国宫颈癌每年 的新发病例数由 2010 年的 2.85 万 13.75 万上升 为 2015 年的 4.58 万 18.85 万 2 。人乳头状瘤病 毒（human papilloma virus，HPV）的持续性与反 复性感染是宫颈癌最常见的病因之一 3 。 研究表明， PAX1 基因的异常甲基化表达升高，可在多个不同 阶段及层次上影响宫颈癌及癌前病变的病理进程， 与宫颈癌的发生及进展密切相关 4,5 。本研究基于 反转录聚合酶链反应（reverse transcription po
13、lyme- rase chain reaction，RT-PCR）技术及焦磷酸测序技 术，定量分析正常宫颈、低级别病变宫颈、高级别 病变宫颈以及患癌宫颈的细胞及组织刮片中PAX1 基因的甲基化水平，定量检测目的基因的甲基化水 平，以明确其在区分各级宫颈病变中的临床应用价 值，现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一 般 资 料 选取 2013 年 1 月至 2015 年 10 月 就诊于上海交通大学附属第六人民医院的 121例高危 型 HPV感染患者为研究对象。排除妇科良 /恶性肿瘤 病史、妊娠、免疫及造血系统疾病相关病史患者。所 有研究对象均签署知情同意书。121例患者依据病理 分级不同分为
14、正常宫颈组（28例） 、低级别病变组 宫 颈上皮内瘤变 （cervical intraepi-thelial neoplasia， CIN） ， 32 例 、高级别病变组（CIN ，34 例）及癌 变组 浸润性宫颈癌（invasive cervical cancers，ICC） ， 27例 。正常宫颈组患者平均年龄为 （35.267.14） 岁， HPV DNA 定量为（367.35105.72）mg/ml；低级 别病变组患者平均年龄为（38.457.45）岁，HPV DNA 定 量 为（492.74142.91）mg/ml；高 级 别 病变组患者平均年龄为（38.787.26）岁，HPV D
15、NA 定量为（613.65186.21）mg/ml；癌变组患 者平均年龄为（37.282.15）岁，HPV DNA 定量 为（376.74114.24）mg/ml。四组患者一般资料 比较差异均无显著性，具有可比性（P 0.05） 。 1.2 方法 1.2.1 宫颈标本采集与保存 患者取截石位，常规 消毒铺巾，取少量宫颈病变部位的细胞制成宫颈刮 片，阴道镜下钳取少量宫颈组织进行病理活检，并 行 HPV检查， 4保存待用。研究时行宫颈组织活检， 并收集宫颈刮片进行PAX1 基因的甲基化检测。上述 各组检测结果最终以病理学检查结果作为参照。 1.2.2 宫颈 DNA 提取、化学修饰与扩增 参照德 国
16、 Qiagen 公司生产的试剂盒说明书分别提取 DNA 与亚硫酸氢盐 DNA 后处理，然后进行PAX1 基因 转录。PAX1 基因外侧上游引物： 5-AAGTTGATTT AGGGTTTGGGGT-3；外侧下游引物： 5-ACCCA GCTCATCCACACTCCC-3。PAX1 基因上游引物： 5-GTGGAGACTGTGTCGGGAGGG-3，下游引物： 5-AAATACCCRAGACTAAACGC-3。采用生物素 标记下游引物 5末端。 1.2.3 焦磷酸 DNA 测序 参照焦磷酸测序仪 （PyroMark Q96 ID 焦磷酸测序仪，美国）中甲基 化分析相关要求，首先制备单链 DNA
17、模板，然后 进行焦磷酸测序。目的基因所用引物： 5-GGAGGT AGGTTTTGGAG-3，可测得 PAX1 基因有 9 个胞 嘧啶 - 磷酸 - 鸟嘌呤岛（cytosine-phosph oric acid- guanine， CpGisland） 。获得PAX1 基因测序结果后， 以单个基因所有检测位点的甲基化率的平均值表示 每组样本的基因甲基化水平。经焦磷酸测序技术， 对相关目的基因的 9个不同位点进行甲基化定量测 试分析。以试剂盒提供的通用 DNA 作为内参。不 同位点检测标本中，某单一位点的甲基化水平与内 参中该位点的甲基化水平的比值，用以表示该位点 的甲基化发生率。 1.3 统
18、计 学 方 法 所有统计学数据均由 SPSS 17.0 软件处理。计量资料以xs表示， 比较采用t检验； 计数资料以 % 表示，比较采用 2 检验；绘制不同 组别的接受者操作特征曲线（ROC 曲线） ，通常以72 论著 中国医学前沿杂志（电子版） 2016年第 8卷第 12期 ROC 曲线下面积进行比较。相关性研究使用散点 图形式。检验水准为 0.05，P 0.05 表示差 异有显著性。 2 结果 2.1 宫 颈 组 织PAX1 基 因 甲 基 化 的 定 量 分 析 正常 宫颈组、低级别病变组、高级别病变组、癌变组患 者病变组织中PAX1 基因相关位点甲基化水平分别 为 1.90%、2.10
19、%、3.55%、4.66%，各组组间比较 差异均具有显著性（P 0.05） 。 2.2 四 组 患 者 病 变 组 织 中 PAX1 基 因 甲 基 化 水 平 的 定 量 分 析 四组患者病变组织中 PAX1 基因甲 基化发生率和 HPV 阳性率比较差异均具有显著性 （P 0.05） （表 1） 。各组患者宫颈刮片和宫颈组 织PAX1 基因甲基化水平组间两两比较差异均具有 显著性（P 0.05） （表 2） ，且癌变组患者宫颈刮 片和宫颈组织PAX1 基因甲基化水平显著高于其他 三组（P 0.05） 。宫颈刮片与癌变组织 PAX1 基 因甲基化之间的相关性分析见图 1，r 0.80 表示 宫
20、颈刮片与癌变组织PAX1 甲基化水平具有相关性 （P 0.05） 。 2.3 PAX1 基 因 甲 基 化 水 平 诊 断 宫 颈 癌 和 CIN 的 相 关 性 分 析 图 2 为PAX1 基因甲基化水平诊断宫颈 癌和 CIN的 ROC 曲线。 表 1 四 组 患 者 病 变 组 织 中 HPV 阳 性 率 与PAX1 基 因 甲 基 化发生率比较 例（%） 组别 例数（例） HPV 阳性率 PAX1 基因甲基化发生率 正常宫颈组 28 10（35.71） 0（0.00） 低级别病变组 32 26（81.25） 3（9.38） 高级别病变组 34 31（91.18） 15（44.12） 癌变
21、组 27 25（92.59） 27（100.00） 2 25.96 73.47 P 0.05 0.01 注： HPV： 人乳头状瘤病毒 表 2 宫颈刮片和宫颈组织PAX1 基因甲基化水平比较 （x s ，%） 组别 例数（例） 宫颈刮片 宫颈组织 正常宫颈组 28 6.430.31 0 低级别病变组 32 9.270.56 9.400.63 高级别病变组 34 34.263.50 29.353.19 癌变组 27 54.184.46 * 61.145.02 * 注： 与其他三组比较， * P 0.05 图 2 PAX1 基因甲基化水平诊断宫颈癌和 CIN 的 ROC 曲线 注： A： 通 过P
22、AX1 基 因 甲 基 化 水 平 鉴 别 诊 断 癌 变 与 正 常 宫 颈 和 低 级 别 病 变 的 ROC 曲 线 下 面 积 为 0.88（95%CI ： 0.81 0.93， P 0.001）； B： 通 过PAX1 基 因 甲 基 化 水 平 鉴 别 诊 断 癌 变 与 高 级 别病变的 ROC 曲线下面积为 0.51 （95%CI： 0.32 0.90， P 0.01） ； CIN： 宫 颈 上 皮 内 瘤 变； AUC： 曲 线 下 面 积； ROC 曲 线： 接 受 者 操作特征曲线 图 1 宫颈刮片和癌变组织中PAX1 基因甲基化的相关性分析 3 讨论 临床上，从宫颈癌前
23、病变发展至宫颈癌大多需 要数年甚至几十年的时间。宫颈癌早期症状多不明 显，待症状明显、恶性程度加剧时往往已属疾病的 中晚期。因此，研究宫颈癌的发病机制，寻找有助 于临床诊断和治疗的有效分子标志物对提高宫颈 癌患者的生存率具有重要意义 6 。既往研究结果显 示，宫颈癌变过程包括诸多基因及表观与调控基因 的改变 4 ，其中最重要的是以 DNA 甲基化为代表 的表观遗传学改变，该过程主要表现为肿瘤抑制 基因的启动子区域发生异常，导致目的基因及调 控基因的转录失活，进而促使肿瘤的发生及发展； 65% 95% 的宫颈癌组织及细胞中可检测到 DNA论著 73 中国医学前沿杂志（电子版） 2016年第 8卷
24、第 12期 果提示：通过PAX1 基因甲基化发生率及其定量水 平的测定，可以在一定程度上对宫颈癌高危人群进 行筛选，并为后期定期随访观察提供依据。此外， 本研究通过对PAX1 基因甲基化水平鉴别诊断不同 癌前病变人群与宫颈癌患者，结果发现其 ROC 曲 线下面积为 0.88，具有较高的诊断鉴别能力。当其 在最佳阈值下，分析PAX1 基因甲基化水平检测癌 前病变与宫颈癌的灵敏度明显优于传统的宫颈脱落 细胞形态学检测。本研究结果能够解决临床上基于 PAX1 基因甲基化的部分患者的诊疗问题，为临床 治疗提供参考依据。 综上所述，定量检测宫颈组织细胞中的PAX1 基因甲基化水平，用以诊断宫颈癌前病变具
25、有临床 应用价值。 参考文献 1 Chang CC, Huang RL, Wang HC, et al. High methylation rate of LMX1A, NKX6-1, PAX1, PTPRR, SOX1, and ZNF582 genes in cervical adenocarcinomaJ. Int J Gynecol Cancer, 2014, 24(2):201-209. 2 Kan YY , Liou YL, Wang HJ, et al. PAX1 methylation as a pote- ntial biomarker for cervical cancer
26、 screeningJ. Int J Gynecol Cancer, 2014, 24(5):928-934. 3 曾新，韩一栩，吴丽香HPV 在宫颈炎、宫颈癌前病变、 宫颈癌中的检测意义分析 J中国实验诊断学，2014，18 （1）： 127-128 4 Yang HJ. Aberrant DNA methylation in cervical carcinogenesis (review)J. Chin J Cancer, 2013, 32(1):42-48. 5 徐军，徐灵，王立峰，等子宫颈脱落细胞中PAX1 基因 甲基化定量检测在子宫颈癌早期诊断中的应用 J中华妇 产科杂志，2014，
27、49（9）： 699-702 6 Sheng J, Zhang WY. Identi cation of biomarkers for cervical cancer in peripheral blood lymphocytes using oligonucleotide microarraysJ. Chin Med J (Engl), 2010, 123(8):1000-1005. 7 Adejuyigbe FF, Balogun MR, Sekoni AO, et al. Cervical Cancer and Human Papilloma Virus Knowledge and Ac
28、ceptance of Vaccination among Medical Students in Southwest NigeriaJ. Afr J Reprod Health, 2015, 19(1):140-148. 8 Cobos C, Figueroa JA, Mirandola L, et al. The role of human papilloma virus (HPV) infection in non-anogenital cancer and the promise of immunotherapy: a reviewJ. Int Rev Immunol, 2014, 3
29、3(5):383-401. 9 Lscher-Firzlaff JM, Westendorf JM, Zwicker J, et al. Interaction of the fork head domain transcription factor MPP2 with the human papilloma virus 16 E7 protein: enhancement of transformation and transactivationJ. Oncogene, 1999, 18(41):5620-5630. 10 Cheng HY , Gao Y , Lou G. DNA meth
30、ylation of the RIZ1 tumor 甲基化。因此， 在宫颈脱落细胞及宫颈组织活检中， 将基因甲基化作为一项检测指标有助于实现宫颈癌 的早期诊断。 随着诊断技术的发展以及细胞学检查等技术的 推广及普及，HPV病毒微量提取 7,8 与杂交法 9 的 广泛应用，已使多种类型的宫颈癌前病变及早期浸 润性宫颈癌得到诊治。统计分析表明，感染 HPV 者并不一定会发生癌前病变或宫颈癌，这提示在宫 颈癌的发生及发展过程中，可能存在其他协同因子 的共同促进效应。基于基因和蛋白水平的特异性检 测方法应运而生。多项研究证实，癌基因的异常表 达在多方面影响肿瘤的发生及发展（如细胞增殖与分 裂的调控）；
31、抑癌基因的异常甲基化（调控失调）亦 可抑制抑癌基因的表达与下游基因的调控 10 。已有 研究显示PAX1 基因甲基化水平在宫颈癌组织中异常 增高，并与启动子的甲基化相关，且PAX1 基因甲基 化可在宫颈癌患者的脱落细胞中被检测到 11-13 。还有 研究显示，PAX1 基因甲基化阳性率与宫颈癌的病理 分级和淋巴转移等关系密切，因此PAX1 基因有望成 为宫颈癌早期诊断的分子标志物 14-19 。目前多数研究 仅关注PAX1 基因甲基化状态的定性检测，还难以进 行精确地量化判断与评价。 既往研究发现，PAX1 基因甲基化水平对宫颈癌 的诊断有一定的帮助。Kim 等 12 研究发现，PAX1 基
32、因甲基化检测可明显提高宫颈脱落细胞及活检组织 检测的准确性，并且可替代 50% 的阴道镜检查和 宫颈组织活检。Nikolaidis 等 20 指出PAX1 基因甲 基化水平可作为宫颈癌早期诊断的一种辅助手段， 其区分 CIN2 与正常组织的灵敏度与特异度分别为 0.66 和 0.92；此外，PAX1 基因甲基化的水平区分 CIN3 与正常组织的灵敏度与特异度分别为 0.77 和 0.92，与其相对应的 ROC 曲线下面积分别为 0.923 和 0.931，具有较高的诊断价值。 但既往研究未对患病类型进行区别诊断。本研 究使用更为敏感而特异性强的定量分析方法，结果 显示，癌变组PAX1 基因甲基
33、化发生率显著高于其 他三组；宫颈刮片和宫颈组织中PAX1 基因甲基化 水平在各组之间差异均具有显著性，且癌变组患者 PAX1 基因甲基化水平显著高于其他三组。上述结74 论著 中国医学前沿杂志（电子版） 2016年第 8卷第 12期 suppressor gene plays an important role in the tumorigenesis of cervical cancerJ. Eur J Med Res, 2010, 15(1):20-24. 11 Huang J, Liou YL, Kang YN, et al. Real-time colorimetric detecti
34、on of DNA methylation of the PAX1 gene in cervical scrapings for cervical cancer screening with thiol-labeled PCR primers and gold nanoparticlesJ. Int J Nanomedicine, 2016, 11:5335-5347. 12 Kim MK, Lee IH, Lee KH, et al. DNA methylation in human papillomavirus-infected cervical cells is elevated in
35、high-grade squamous intraepithelial lesions and cancerJ. J Gynecol Oncol, 2016, 27(2):e14. 13 Xu J, Xu L, Yang B, et al. Assessing methylation status of PAX1 in cervical scrapings, as a novel diagnostic and predictive biomarker, was closely related to screen cervical cancerJ. Int J Clin Exp Pathol,
36、2015, 8(2):1674-1681. 14 Lai HC, Lin YW, Huang RL, et al. Quantitative DNA methylation analysis detects cervical intraepithelial neoplasms type 3 and worseJ. Cancer, 2010, 116(18):4266-4274. 15 Kan YY, Liou YL, Wang HJ, et al. PAX1 methylation as a potential biomarker for cervical cancer screeningJ.
37、 Int J Gynecol Cancer, 2014, 24(5):928-934. 16 Huang TH, Lai HC, Liu HW, et al. Quantitative analysis of methylation status of the PAX1 gene for detection of cervical cancerJ. Int J Gynecol Cancer, 2010, 20(4):513-519. 17 徐周敏，秦士新，裴峰，等PAX1 基因甲基化特异性定 量 PCR 检测在宫颈癌筛查中的意义 J临床肿瘤学杂志， 2013，18（1）： 10-14 18 林
38、晓，徐军，徐灵，等定量检测PAX1 甲基化对于高级 别宫颈癌前病变的诊断价值 J中国临床医学，2015，22 （3）： 381-383 19 徐军，徐灵，王立峰，等子宫颈脱落细胞中PAX1 基因 甲基化定量检测在子宫颈癌早期诊断中的应用 J中华妇 产科杂志，2014，49（9）： 699-701 20 Nikolaidis C, Nena E, Panagopoulou M, et al. PAX1 methy- lation as an auxiliary biomarker for cervical cancer screening: a meta-analysisJ. Cancer Ep
39、idemiol, 2015, 39(5):682-686. 收稿日期： 2016-06-17 信息窗 人民卫生出版社系列期刊管理委员会第 6 次工作会议在京召开 为 系 统 总 结 2015 年 人 民 卫 生 出 版 社 系 列 期 刊 的 工 作， 做 好“ 十 三 五 ” 期 刊 发 展 规 划 的 顶 层 设 计， 准 确 把 握 新 时 期 期 刊 工 作 面 临 的 新 形 势、 新 任 务、 新 机 遇 与 新 挑 战，2016 年 4 月 9 日， 人 民 卫 生 出 版 社 系 列 期 刊 管 理 委 员 会 第 6 次 工 作 会 议 在 京 召 开。 国 家 卫 生 和
40、计 划 生 育 委 员 会 宣 传 司 巡 视 员 王 华 宁， 国 家 新 闻 出 版 广 电 总 局 综 合 业 务 司 副 司 长 丁 以 绣， 北 京 市 新 闻 出 版 广 电 局 数 字 出 版 处 处 长 王 会 友， 人 民 卫 生 出 版 社 总 编 辑 杜 贤 编 审， 北 京 大 学 图 书 馆 文 献 计 量 学 研 究 室 研 究 员 蔡 蓉 华， 中 国 科 学 技 术 信 息 研 究 所 研 究 员 张 玉 华， 中 国 科 学 院 文 献 情 报 中 心 研 究 员 刘 筱 敏， 系 列 电 子 期 刊 和 待 批 电 子 期 刊 的 主 编、 主 编 代 表、
41、 编 辑 部 成 员，以及人卫社期刊中心全体人员 50 余人参加了会议。 杜 贤 总 编 辑 代 表 人 民 卫 生 出 版 社 致 辞 并 讲 话， 全 面 介 绍 了 人 卫 社 的 发 展 现 状 以 及 人 卫 社 实 施 强 社 强 刊 战略的具体举措， 对期刊的工作提出了八个坚持和八个加强： 坚持高举旗帜， 引领学术导向； 坚持不断创新， 进 行 融 合 发 展 ； 坚 持 办 刊 质 量， 打 造 学 术 精 品 ； 坚 持 办 刊 标 准， 提 高 学 术 水 平 ； 坚 持 发 展 方 向， 建 设 学 术 联 盟 ； 坚 持 以 期 刊 为 载 体， 实 现 立 体 化 经
42、 营 ； 坚 持 供 给 侧 改 革， 补 齐 短 板 ； 坚 持 社 会 效 益 首 要， 社 会 效 益 与 经 济 效 益 有 机 统 一。 同 时， 要 加 强 顶 层 设 计 ； 加 强 学 科 体 系 建 设 ； 加 强 管 理 ； 加 强 质 量 建 设， 全 方 位 提 升办刊质量 ； 加强品牌建设 ； 加强资源整合 ； 加强创新融合 ； 加强构建强大的立体化学术综合营销平台。 人 卫 社 系 列 期 刊 15 个 编 辑 部 负 责 人 分 别 对 各 期 刊 2015 年 工 作 进 行 了 总 结， 汇 报 了 2016 年 工 作 规 划， 交 流 了 办 刊 的 经
43、验， 特 别 是 新 媒 体 在 提 升 期 刊 影 响 力 的 应 用、 扩 大 稿 源 的 途 径、 期 刊 与 会 议 的 互 动 等 热 点 问 题 引 起 了 参 会 人 员 的 积 极 关 注 和 响 应， 并 寻 找 了 各 刊 发 展 的 短 板 和 不 足。 通 过 此 次 会 议， 人 卫 系 列 期 刊 各 编 辑 部 均 明 确 了 工 作 目 标 和 方 向， 一 致 表 示 将 按 照 此 次 会 议 的 工 作 部 署， 用 实 际 行 动 加 强 质 量 建 设， 以 期 刊 为 载 体， 实 行 立 体 化 的 运 营 和 立 体 化 的 管 理， 融 合 各 方 资 源 推 动 期 刊 发 展， 全 方 位 贯 彻 执 行 人 卫 社 强 社强刊战略。
