2002 Piscataway CRO OptimumGene TM CloneEZ ONE-HOUR Western TM THE TMEpitope Tag 36 36 39 40 41 41 41 45 47 47 47 47 48. 19 19 20 21 22 . . . . 23 23 24 27 29 29 29 30 32 33 35 . . 2 2 2 2 3 3 5 5 7 7 8 13 13 13 14 17 . . PCR Taq 5 l +5 l DNA Loading buffer 2030 min 1TAE + 0.1 l/ml 45 l ddH 2 O 25 30 l ddH 2 O 酶切载体及目的基因 EcoRI EcoRI 5 3 5 3 G G AA AA TT TT C C 连接 细胞增殖 载体制备 PCR 目的基因获取 商品化载体 转化重组质粒 - 1 - - 2 - 600 l l l l l l l l 2030 l ddH 2 O E. coli E. coli 10100 210 g/ml 100200 g/ml - 3 - - 4 - l 2+ l l l g l l l l l g l l l r l
