1、 二氨基联苯胺（DAB ）显色液 订购电话： 0531-82861981 传 真：0531-82861981 网 址 ： http:/ Email： 增敏二氨基联苯胺（ DAB）显色液 说明： 二氨基联苯胺（3， 3 -diaminobenzidine，DAB）是过氧化物酶（Peroxidase ）的生色底物，在过氧化氢的存在下失去电子而呈现出颜色变化和积累，形成棕褐色不溶性产物。用于检测过氧化物酶的活性，灵敏度高，特异性好。其适用于蛋白质杂交和免疫化学，以及原位杂交染色等。产品即到即用，性能稳定，操作便捷，敏感度高，显色清晰，重复性好。 包装： Reagent A 100 毫升 Reage
2、nt B 3 毫升 ( 滴瓶包装，50ul/ 滴) 产品说明书 1 份 保存： -20。A 和 B 液均采用稳定技术，短期使用不需要冷冻保存。 实验步骤 一、 免疫印迹染色 1 准备好含有待测蛋白的固相膜：包括电泳、转印、封阻、一抗（或生物素）处理、辣根过氧化酶（HRP）标记的二抗（或链霉亲和素）处理、清洗等步骤 2 加入 1 毫升 Reagent A 和 1 滴（约 50ul） Reagent B，铺满整个固相膜表面（可按比例增减）。 3 置于平式摇荡仪上，在室温下孵育 2 至 5 分钟，避免光照，直至棕褐色沉淀出现。 4 用镊子夹起固相膜，放进无离子水里清洗 。 5 空气中晾干。 6 拍照
3、记录 。 二、 免疫化学染色 1 准备好含有待测蛋白的组织切片：包括固着、封阻、一抗（或生物素）处理、辣根过氧化酶（ HRP）标记的二抗（或链霉亲和素）处理、清洗等步骤 2 加入 1 毫升 Reagent A 和 1 滴 （约 50ul）Reagent B 到 1.5 毫升离心管，充分混匀为显 色工作液. 3 室温下，小心加上上述显色工作液铺满整个切片样品表面 。 4室温下孵育 5 至 10 分钟，或直至样本出现棕褐色 5小心移去切片上显色工作液 6室温下，小心将切片置入 50 毫升 PBS 缓冲液中浸泡 5 秒 7小心移去切片上的 PBS 缓冲液 8放上盖玻片或封片 9（选择步骤）进行甲基绿复染 10即刻在一般光学显微镜下观察：阳性呈现棕褐色 注意事项 1 限定 Reagent A 和 Reagent B 比例为0.5-3ml:1 滴（垂直加为 50ul） ，小心Reagent A 比例不要过低，否则可能造成不显色。 2 显色液具有毒性或刺激性，操作时，须戴手套。 3 显色时间严格控制，非常小心；需根据情况调整，不能过长，以免造成过度显色 4 如果封闭欠佳，易造成背景颜色过深 5 固相膜显色后数小时将会褪色，不能永久存在。 6 该显色液只能用于辣根过氧化酶（HRP ）标记的杂交和沉淀反应。 7 染色后可用甲基绿或苏木素复染，增强对照。
