1、1、斐林试剂配制:1)甲液质量浓度为 0.1g/ml,取 10gNaOH 溶于蒸馏水,稀释至 100ml2)乙液质量浓度为 0.05g/ml,取 5gCuSO4 溶于蒸馏水,稀释至 100ml临用时将甲、乙液等量混合作用:鉴定还原性糖:C6H12O6 、果糖、麦芽糖、乳糖等。还原性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。2、班氏尿糖定性试剂配制:称取 17.4 克无水硫酸铜(CuSO4)溶解于 100 毫升热蒸馏水中,冷却后,稀释到150 毫升。称取柠檬酸钠 173 克及无水碳酸钠(Na2CO3 )100 克,加蒸馏水 600
2、毫升,加热使之溶解,冷却后,稀释到 850 毫升。把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中,搅匀后即为班氏尿糖定性试剂。用细口瓶贮存备用(为了防止氢氧化铜沉淀的生成,故加入柠檬酸钠。柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂,它能与铜离子形成可溶性络盐)。使用方法同斐林试剂,所不同的是班氏试剂可长期使用。3、双缩脲试剂配制:A 液:质量浓度为 0.1g/ml,取 10gNaOH 溶于蒸馏水,稀释至 100mlB 液:质量浓度为 0.01g/ml,取 1gCuSO4 溶于蒸馏水,稀释至 100ml使用时,先加 A 液,后加 B 液作用:鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应。也可用于鉴
3、定多肽。4、苏丹配制:取 0.1g 苏丹,溶解在 20ml95%酒精中作用:鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹染成橘黄色(或被苏丹染成红色)。5、质量分数为 15%的盐酸和体积分数为 95%的酒精溶液的混合液(1:1)。作用:用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来。能杀死细胞固定。6、质量浓度为 0.01g/mL 的或 0.02g/mL 龙胆紫溶液(或醋酸洋红溶液)配制:是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为 2%的醋酸溶液中配制而成作用:使细胞核内的染色体着色,便于观察。7、质量浓度为 0.3g/ml 的蔗糖溶液作用:观察成熟植物细胞质分离时用。经此处理细胞仍具活性。8、质量浓度为 0.1mg/ml
4、 的亚甲基蓝溶液配制:将亚甲基蓝溶于蒸馏水中配制而成作用:(1)用于观察根对矿质元素离子的交换吸附观察;(2)用于检测水中细菌情况,根据亚甲基蓝褪色情况,判断水质被细菌污染情况。是活体染色剂。9、丙酮是有机溶剂,在叶绿体中色素提取时,用于溶解叶绿体中的色素。可用酒精替代,不过提取色素时将绿叶放入酒精中隔水加热10、层析液配制:由 20 份石油醚(在 60900C 下分馏出来的)、2 份丙酮和 1 份苯混合而成。是一种脂溶性很强的有机溶剂,叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同:溶解度高的随层析液在滤纸上扩散很快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。代用品:93 号汽油、四氯化碳11、SiO2 、
5、CaCO3加入少许 SiO2 是为了研磨得充分;加入少许 CaCO3 是为了防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。12、碘液配制:取 2gKI ,溶解在 5ml 蒸馏水中,再加 1gI,待溶解后用蒸馏水稀释至 300ml。溶液在光亮处容易变成紫色,必须保存在暗色玻璃瓶里。作用:用来测定淀粉,淀粉遇碘后,形成紫色的复合物。13、二苯胺配制:称取 1.5g 二苯胺,溶于 100mL 冰醋酸中,再加 1.5mL 浓硫酸,用棕色瓶保存。临用前,在 10mL 的上述溶液中再加入 0.1mL 体积分数为 0.2%的乙醛溶液。作用:DNA 遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色。14、NaOH:用于吸收 CO2(验证光
6、合作用需要 CO2)或改变溶液的 pH,15、Ca(OH)2 :鉴定 CO2(验证呼吸作用产生 CO2)。16、NaHCO3:提供 CO2 等。 我再补充一个:台盼蓝(Trypan Blue,也称 Direct blue 14):一种死细胞染色用色素化学名:3,3-3,3-Dimethyl(1,1-biphenyl)-4,4-diylbis(azo)bis(5-amino-4-hydroxy-2,7-naphthalenedisulfonic acid), tetrasodium salt3,3-3,3-二甲基 -(1,1-二苯基)-4,4-二基双(偶氮)-双(5-氨基-4-羟基-2,7-萘二
7、磺酸),四钠盐分子式:C34H24N6Na4O14S4分子量:960.81CAS Number: 72-57-1外观:黑褐色结晶粉末摩尔吸光度:69,000(在 606nm 附近)染色原理:细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的 DNA 结合,使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以鉴别死细胞与活细胞。严格来说,台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性, 通常认为细胞膜丧失完整性,即可认为细胞已经死亡。这被称为染料排除测试(dye exclusion),Erythrosin B(红色)、negrosine、eosin Y、AO 和 EB 也用于此目的。通过显微镜很容易就能识别出死亡
8、的被台盼蓝染色的细胞,并可使用细胞计数器进行计数。溶于水,可以配制成 10mg/ml 的水溶液,水溶液呈深蓝色。台盼蓝主要用来鉴定原代培养细胞时,细胞分离后的存活情况,用 0.4%台盼蓝直接染色 5-10 分钟,在显微镜下观察即可。应用于细胞凋亡:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。尽管在凋亡的早期到中期检测是很困难的,此方法对反映细胞膜的完整性,区别坏死细胞有一定的帮助。储存条件:常温保存注意事项:1. 台盼蓝对人体有毒2. 台盼蓝染细胞时,时间不宜过长。否则,部分活细胞也会着色,会干扰计数。3. 台盼蓝染色法对于悬浮细胞来说,还比较方便,对贴壁细胞来说,较为繁琐。因为要消化,有时,96 孔板不一定能消化干净。而且,该法是测定细胞浓度的方法,与细胞悬液的体积有关,加入的胰蛋白酶或 1640 要计入终体积。可以说,该法相对准确,可能有一些人为因素的干扰。