1、附录四 常用抗凝剂的配制及用法2009-06-02 17:32 在医学实验中常需动物的全身抗凝,采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要求是:用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。一、肝素(1)肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂,肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力,阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用,从而使血液不发生凝固。(2)配制和用量纯的肝素10mg 能抗凝65125 ml 血液(按 lmg 等于125U,1020U 能抗1 ml 血液计)。但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等,因而其抗凝效果也不相同。一般可
2、配成1肝素生理盐溶液,用时取01毫升于试管内,100烘干,每管能抗凝510ml 血液。也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁,直接抽血至注射器内而使血液不凝。在动物实验作全身抗凝时,一般剂量为:大白鼠2530mg/200300g 体质量,兔10mgkg 体质量,狗510mgkg 体质量。肝素可改变蛋白质等电点,因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时,不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U,相当于100mg。二、草酸盐合剂(1)原理草酸胺能使血细胞略为膨大,而草酸钾能使血细胞微缩小,因此草酸铵与草酸钾按3:2比例配置,可使血细胞体积保持不变;加福尔马林则能防止微生物在血中
3、繁殖。此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。(2)配制方法及用量草酸铵12g、草酸钾08g、福尔马林10ml、蒸馏水加至100ml 每毫升血加草酸盐合剂01ml(即相当草酸铵12mg,草酸钾08mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。如取05ml 于试管,烘干后每管可使5ml 血不凝固。(3)注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子,而达到抗凝目的。用时注意加的量应适中,不能过多,以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。不适用于血液内钙或钾的测定,也不能用于血液非蛋白氮测定。三、枸櫞酸钠常配成35%水溶液。也可直接加粉剂,每毫升血加35mg,即可达到抗凝目的。枸櫞酸钠可使钙
4、失去活性,防止凝血。但其抗凝作用较差,碱性较强,不宜作化学检验之用。仅可用于红细胞沉降速度测定。急性血压测定实验所用枸櫞酸钠为56溶液。四、草酸钾 (一)原理和注意事项 草酸钾为最常用的抗凝剂。其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合,形成不溶解的草酸钙,使血液不凝固。常用于非蛋白氮测定,但不适用于测定钾和钙。草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性,故应注意。(二)配制及使用方法取草酸钾10g,加蒸馏水少许使溶解,再加蒸馏水至100ml。配制成10水溶液,如每管加0.1ml 则可使510ml 血不凝。一般如作微量检验,用血量较少,可配制成2溶液,如每管加01ml 可使12ml 血液不凝。五、乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)EDTA 对血液中钙离子有很大的亲和力,能与钙离子络合而使血液抗凝。每0.8mg 可抗凝1ml 血液。除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外,适用于多种抗凝。