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ABO血型鉴定.ppt

上传人:kpmy5893 文档编号:8325800 上传时间:2019-06-20 格式:PPT 页数:24 大小:395KB
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资源描述

1、,红细胞悬液制备,抗凝或不抗凝的血标本洗涤压积红细胞配制红细胞悬液2-3% 的红细胞悬液 试管法血型鉴定、效价滴 定5% 的红细胞悬液 玻片法血型鉴定、间接抗人球蛋白试验10% 的红细胞悬液 抗体亲和力测定,血清标本,抗凝或不抗凝血标本37水浴箱竹签使血块与试管壁分离离心将血清吸至干净试管待用,ABO血型鉴定,原理:根据ABO血型的分型原则及其独特的性质,利用凝集试验技术通过正定型(红细胞定型)和反定型(血清定型)两组试验可准确鉴定ABO血型。 试剂: 抗A、抗B 试剂血清 A型、B型和O型试剂红细胞悬液 2-3 %受检者红细胞悬液和血清或全血,ABO血型鉴定,方法: 玻片法 不适于血清抗体鉴

2、定 试管法 正定型、反定型 结果解释 凝集为阳性即被检红细胞膜上有与该试剂血清抗体相对应的抗原;或被检血清中有与该试剂红细胞抗原相对应的抗体。不凝集为阴性,加试剂抗体血清,加被检红细胞悬液,离心,相对应的抗原抗体反应,观察结果,ABO血型判断 血 正定型 反定型型 抗-A 抗-B AC BC OCA + + B + + O + + AB + + ,思考题,ABO血型的分类原则是什么? A BO 血型的分类原则是根据红细胞膜上所存在 的抗原,血清中所存在的抗体来进行分类的。通常使 用抗-A 和抗B 两种血清及 A 型、B 型和 O 型三种试 剂红细胞来鉴别。如受检者红细胞被抗血清凝集,说 明红细

3、胞膜上存在相应的抗原;如不发生凝集说明不 存在相应抗原;如受检者血清与试剂红细胞发生凝集 ,说明血清中存在相应的抗体;如不发生凝集,说明 不存在相应抗体。,为什么ABO血型鉴定应采用“正反定型”两种方法?因为 ABO 血型鉴定,主要依据受检者红细胞与 抗A 、抗B 试剂血清反应结果确定,此法称正定型法; 也可通过受检者的血清与A型、B型和O型试剂红细 胞反应结果确定,此法称反定型法,同时采用正反定 型法,并互相核对其结果是否一致是一个可靠的血型 鉴定法。,为什么在反定型中使用O型红细胞?因为有些受血者或供血者血清中存在因免 疫、妇女妊娠或不当输血而引起的抗A或抗B以 外的抗体,这些抗体不是自然

4、所期望存在的。 血清反定型时,使用O型红细胞可在 ABO 血型 鉴定试验过程中检测出受检血清中是否有“不规 则”抗体的存在。,为什么红细胞悬液过浓或过淡均可出现假阴性反应结 果?因为抗原、抗体在适当的比例下,反应最强。若红细胞悬液过浓,则抗原过剩,抗体不足,每个红细胞均只能吸收少量抗体,不足以形成凝集。若红细胞 悬液过淡,则红细胞间距离较大,不易集聚在一起, 不形成凝集。在实际血型鉴定时,玻片法用 5% 红细 胞悬液敏感性较强,并应在鉴定过程中不断摇动玻片 以促使其相互接触。试管法用 2% 浓度的红细胞悬液 敏感性较好,容易观察凝集。,为什么玻片法血型鉴定要严格规定观察结果的时间?凝集反应出现

5、的快慢与强弱是由抗原抗体的性 质决定的,如果抗原的抗原性强,抗体效价高,凝集 反应的第一,第二阶段可以在数秒内完成;如抗原 的抗原性弱,抗体效价也低,则凝集反应不明显, 反应需要一段时间才能完成。因为血清在空中暴露时间过长,发生浓缩,从 而使红细胞聚集,造成假阳性结果;如果不等反应 完成便判定反应结果,可使阳性结果误报成阴性结 果,造成假阴性。所以玻片法血型鉴定要严格规定 观察结果的时间,凝胶试验使用的试剂和器材,凝胶技术,凝胶法鉴定ABO血型,优点:,敏感:在凝胶试验中常能发现其它试验不易发现的问题。 结果可保存:凝胶试验的结果可在冰箱中保存数日,并且较容易被拍成照片。 操作技术要求较低:凝胶试验的操作主要是简单的加样和判读,孵育、离心过程都有专门的设备。其中能被人为改变的因素较少。 无需洗涤的抗球蛋白试验:,缺点,不能做反定型凝胶试验方法成本较高,需要特殊设备。 高度敏感有时也会造成不便。,MN血型鉴定,试剂抗M、抗N试剂血清 M型、N型、MN型红细胞 受检者红细胞悬液方法玻片法 试管法,结果判读MN血型结果判定抗M 抗N 血型 被检红细胞 1 + M 被检红细胞 2 + N 被检红细胞 3 + + MN M+N+红细胞 + M- N+红细胞 M+N+红细胞 + M+N- 红细胞 ,

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