大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC).doc

1、 编号：CRM003中文名称：大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)英文名称：Chromogenic Coliform氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;混合显色底物分别与大肠菌群和大肠杆菌所对应的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上大肠菌群产生品(紫)红色的菌落，大肠杆菌产生蓝绿色的菌落。环凯培养基图鉴：配方(每升)：蛋白胨 10g酵母膏粉 3g氯化钠 5g十二烷基硫酸钠 0.1g琼脂 12g混合显色底物 2.7g最终 pH 7.00.2使用方法：1、称取本品 32.8g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解(不

2、能持续高温加热，建议不要重复煮溶)，分装三角瓶，无需高压灭菌。2、以无菌手续取样品 25g或 25mL，加入含 225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内，充分振摇或用均质器均质 1min成 1：10 稀释液，然后以1：10 继续稀释，选择三个适宜的连续稀释度，每个稀释度接种两个平皿。3、采用倾注法：将培养基水浴冷却至约 50，准备直径 90mm已灭菌平皿，每个培养皿接种 1ml样品，然后倾注约 15ml上述溶解的培养基，混匀使其凝固，倒置，37培养 24小时。4、 采用表面接种法：冷却至约 50，摇匀将培养基倾注于已灭菌平皿中。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光，4)。样品用划线接种法或滤膜法，37培养 24小时。5、观察结果。质量控制：本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后于 361培养 18h24h 生长情况如下表。菌 名 菌 号 生长状况 培养特征大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 菌落蓝绿色弗氏柠檬酸杆菌 ATCC43864 良好 菌落品(紫)红色鼠伤寒沙门氏菌 ATCC14028 良好 菌落无色粪肠球菌 ATCC29212 受抑制 -贮 存：贮存于 10-30、避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。规 格：可配置 1L的培养基干粉。