1、紫外光谱分析法测定酪氨酸的含量一、 实验目的1、掌握紫外可见分光光度计的工作原理和操作方法；2、用紫外可见分光光度计进行定性及定量分析。二、 实验原理紫外可见分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。三、 应用范围紫外可见分光光度分析在有机化学、无机化学、生物、医药、材料、冶金、地质等领域有广泛的应用。
2、可以鉴定分子结构比较复杂的有机物质，测定微量物质的含量，研究物质的分子结构和反应的历程，立体结构的确定等。工业方面的专门用途包括水分析、食品和饮料分析、DNA 和 RNA 分析、生命科学、分子生物相关的方法以及反射能力测量等。在药品研究中，可以定量分析留体、维生素、抗菌素、生物碱、黄酮类等。可进行时间扫描。四、 仪器和试剂仪器：U-3010 紫外可见分光光度计；比色管（10ml ；25ml） ；容量瓶（250ml；50ml） ；移液管（10ml；5ml） ；滴管；烧杯（500ml；50ml） ；玻璃棒；试管架试剂：（1）10 -3 mol/L 酪氨酸储备液：准确称取 45.30mgL-酪氨酸,
3、加 50 ml 二次水溶解，用二次水定容至 250ml。（2）二次水五、 实验步骤1.系列标准溶液的配制 取 5 只 10 ml 比色管，用 10-3 mol/L 酪氨酸储备液配制浓度分别为 10-4，210 -4，310 -4，410 -4，610 -4mol/L 标准溶液。2.绘制标准曲线 用紫外可见分光光度计扫描待测酪氨酸溶液，找出酪氨酸的最大吸收峰。将波长固定在最大吸收峰处，测定系列标准溶液的吸光度。3.未知溶液的测定 在标准系列溶液同样条件下，测量未知溶液的吸光度。六、 数据处理以吸光度为纵坐标，以酪氨酸溶液的浓度为横坐标作标准曲线。根据未知溶液的吸光度可在标准曲线上确定未知液中酪氨酸的浓度。附一：U-3010 紫外可见分光光度计一仪器光路示意图二操作方法1）系统开机准备1. 接通电源，启动微机2. 打开光谱仪主机电源3. 预热 15 分钟2）操作步骤1. 运行 UV Solution 软件2. 设定检测方法和测量参数3. 输入样品名称、注释及操作者姓名4. 将空白样品分别放入参比池和样品池，校准用户基线5. 将样品放入样品池,开始测量6. 打开数据处理页面，进行数据处理7. 保存数据8. 检测下一个样品3）系统关机清理1. 退出 UV Solution 软件2. 关闭光谱仪主机电源3. 关闭计算机4. 抽下电源插座，切断电源5. 作好仪器使用记录，清理实验台
