1、圄匿生塑剑晶堂苤盍垫!生!旦箍堑鲞笠堡期!型旦i!垂!坐:垒!耻坠!Q!:!:堑:盟!:垒75乙醇的消毒效果及稳定性研究王红廖馨涓 严东珍许砍刘菊【摘要】 目的观察成都生物制品研究所有限责任公司使用的75乙醇的消毒效果和稳定性。方法以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌作为试验菌,采用悬液定量杀菌试验对75乙醇的杀菌效果和有效期进行研究。结果75乙醇对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌悬液分别作用1和5 rain的平均杀灭对数值均500,达到规定的消毒要求。室温存放7 d的75乙醇对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌悬液分别作用1和5 min的平均杀灭对数值均500,达到规定的消毒要求。结
2、论75乙醇对细菌和真菌具有杀灭作用,室温存放7 d后消毒作用没有减弱。【关键词】 乙醇;消毒;悬液定量杀灭试验Study on disinfection effect and validity period of 75ethanol WANG舶增+,LIAO Xin-juan,YANDongzhen,XU Xin,LIU Ju +West China School of Publw Health,Sichtmn University,Chengdu610041,ChinaCorresponding author:LIU Ju,Email:liuju_1969163con【Abstract】 O
3、bjective To observe disinfection effect and validity period of 75ethanol used byChengdu Institute of Biological Products Co,LtdMethods With Staphylococcus aureus,Escherichia coli andCandida dbwam as test microorganisms,suspension quantitative germicidal test Was used to study germicidalefficacy and
4、validity period of 75ethan01Results The average killing logarithm values of Staphylococcusalzgeus,Escherichia coli and Candida albicans exposed to 75ethanol for 1 and 5 min were all500Disinfection of 75ethanol was qualifiedThe average killing logarithm ValHes of Staphylococcus aureus,Escherichia col
5、i and Candida albicans exposed to 75ethanol stored at room temperature for 7 d for 1 and5 min were all500Disinfection of 75ethanol was qualifiedConclusions 75ethanol has a goodgermicidal efficacy for bacteria and fungiDisinfection effect of 75ethanol stored at room temperature for 7 dhas not reduced
6、【Key words】Ethanol;Disfection;Suspension quantitative germicidal test75乙醇是一种广泛使用的常规消毒剂,主要用于皮肤消毒以及实验台、生物安全柜操作台和小型医疗器械的灭菌处理。乙醇分子具有很强的渗透力,能渗入细菌和真菌内部而杀灭细菌和真菌。乙醇浓度过高或过低均会影响消毒效果:7075乙醇的杀菌效力最强,因为75乙醇的渗透压与细菌接近,因而75乙醇可在细菌表面蛋白未变性前不断渗入细菌内部而使细菌蛋白脱水、变性、凝固,从而最终杀灭细菌;如果乙醇浓度过高,则会DOI:103760cmajissn16734211201304004作者
7、单位:610041成都,四川大学华西公共卫生学院(王红、许欣);610023成都生物制品研究所有限责任公司质量检定室(王红、廖馨滑、严东珍),质量运营部(刘菊)通信作者:刘菊,Email:liuju一1969163corn论著因细菌表面蛋白迅速凝固而影响乙醇继续向菌体内部渗入,从而影响消毒效果;如果乙醇浓度过低,乙醇虽可进入细菌内部,但不能使细菌蛋白凝固而影响消毒效果,甚至只能起到抑菌作用引。日常工作和生活中,75乙醇打开包装后,随着暴露时间延长会不断挥发,从而使其浓度下降而减弱消毒效果。本研究旨在观察75乙醇的消毒效果和稳定性,为75乙醇的正确使用以及有效期确定提供理论依据。1材料与方法11
8、 材料试验用75乙醇由成都生物制品研究所有限责任公司提供。试验用菌种:金黄色葡萄球菌ATCC6538、大肠杆菌8099、白色念珠菌万方数据垦区生塑型虽堂苤查!Q!生!旦筮堑鲞筮堡期!坐旦i!臣!坐:垒!醒塾垫!:Y堂:!:堕!:垒ATCCl0231,由中国军事医学科学院微生物流行病研究所提供。中和剂(30吐温)、稀释液(09无菌氯化钠溶液)、有机干扰物(灭活小牛血清)、培养基(营养琼脂培养基、玫瑰红钠培养基)”j,均由成都生物制品研究所有限责任公司提供。12 方法41121试验菌悬液的制备取冻干菌种,启封并传25代后,刮取新鲜菌苔置于装有稀释剂的试管中,摇匀;用稀释液调整菌液浓度至标准比浊管浓
9、度,将其作为原液(100),再用稀释液进行10倍稀释至11075107cfuml和11085108cfuml,分别作为中和剂鉴定试验和悬液定量杀灭试验用菌悬液。122 中和剂鉴定试验 以金黄色葡萄球菌为试验菌,分6组进行中和剂鉴定试验:第1组,75乙醇+菌悬液;第2组,(75乙醇+菌悬液)+中和剂;第3组,中和剂+菌悬液;第4组,(75乙醇+中和剂)+菌悬液;第5组,稀释液+菌悬液;第6组,稀释液+中和剂+培养基,作为阴性对照。判定标准为:37培养后,第1组应无细菌生长或有少量细菌生长;第2组的菌落数应比第1组多,但比第3、4、5组少;第3、4、5组的菌落数应相似,细菌浓度应在l10 7510
10、 7cfuml之间,且各组间的菌落数差异不超过15;第6组应无细菌生长。1。23 悬液定量杀灭试验分别将O5 lIll有机干扰物加入装有05 IIll菌悬液(金黄色葡萄球菌ATCC6538、大肠埃希氏菌8099、白色念珠菌ATCCl0231)的试管中,混匀,于20条件下水浴5 min,加入40 ml 75乙醇,混匀并标记;分别作用l和5 min后,向05 ml菌悬液与乙醇的混合液中加入45 ml中和剂,混匀;中和10 min后,取其中1 ml溶液进行倾注培养。同时以稀释液代替乙醇,进行平行试验(方法同上)作为阳性对照。分别取稀释液、中和剂和有机干扰物各1 ml进行倾注培养作为阴性对照。试验重复
11、进行3次,计算各组活菌浓度(cfum1),并换算成对数值(N),然后按下式计算杀灭对数值:杀灭对数值=阳性对照组平均活菌浓度的对数值一实验组活菌浓度的对数值。判定标准:对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌,各次的杀灭对数值均I500,判为消毒合格;对白色念珠菌,各次的杀灭对数值均1400,判为消毒合格。124 稳定性试验将原装75乙醇于室温存放7 d,每天平均开启10 min。取存放前后的75乙醇按123项步骤进行悬液定量杀灭试验,比较存放前后的75乙醇的杀灭效果。2 结果21 中和剂鉴定试验结果表1显示,第1组仅有少量细菌生长,表明75乙醇能有效杀灭试验菌;第2组的菌落数比第1组多,但比第3、4、5组
12、少,表明中和剂(30吐温)可有效中和75乙醇对试验菌的残留作用,且中和剂及中和产物对试验菌生长和培养均无明显影响;第3、4、5组的菌落数相似,且各组的菌落数差异500,达到规定的消毒合格要求,且作用5 min的杀灭效果强于作用1 min。表2 75乙醇的杀灭效果23 稳定性试验结果表3显示,室温存放7 d的75乙醇对金黄色万方数据国匠生塑趔旦堂苤查垫!生!旦筮堑鲞筮兰翅!坐坚i!碰!坐:垒!艘坠垫!:!:堑:堂:堡葡萄球菌悬液分别作用1和5 min,均可100杀灭金黄色葡萄球菌,平均杀灭对数值均为860,达到规定的消毒合格要求;室温存放7 d的75乙醇对大肠杆菌悬液和白色念珠菌悬液分别作用1和
13、5 min的平均杀灭对数值均500,达到规定的消毒合格要求,且作用5 min的杀灭效果强于作用1 rain。室温存放0和7 d的75乙醇的消毒效果没有差别(表4)。表3室温存放7 d的75乙醇的杀灭效果表4室温存放0和7 d的75乙醇的杀灭效果比较3 讨论本研究以金黄色葡萄球菌ATCC6538、大肠杆菌8099、白色念珠菌ATCCl0231为试验菌,采用悬液定量杀灭试验对成都生物制品研究所有限责任公司使用的75乙醇进行杀菌效果和稳定性检测,为正确使用75乙醇提供理论依据。研究显示,75乙醇于室温下对金黄色葡萄球菌ATCC6538、大肠杆菌8099、白色念珠菌ATCCl0231作用1和5min后
14、,对细菌和真菌的杀灭效果可以达到规定的消毒要求,表明75乙醇可以作为日常实验室物品表面的消毒剂。同时,比较存放前后的75乙醇的杀灭效果表明,75乙醇在每天平均开启10 min的情况下,室温存放0和7 d的杀灭效果没有差异,因此,室温存放7 d的75乙醇仍具有消毒作用。参考文献1周正任,李凡医学微生物学M6版北京:人民卫生出版社,2003:1011082颜光美,余新炳实验室生物安全M北京:高等教育出版社,2008:39463国家药典委员会中华人民共和国药典2010年版三部M北京:中国医药科技出版社,2010:附录89-924卫生部卫生法制与监督司消毒技术规范2000年版s北京:中华人民共和国卫生
15、部,2002:1545(收稿日期:20130318)T细胞“分布图“有助开发更多有效疫苗简讯美国哥伦比亚大学医学中心的研究人员发布了人体免疫系统的第一张T细胞“分布图”。该分布图不仅便于研究者研究T细胞在不同器官的功能和分布,还能提供多种疾病疫苗和免疫治疗剂开发的信息。目前对人T细胞的了解大都来自外周血中的T细胞,但组织中的T细胞分布和功能尚未深入研究。研究人员从24名器官捐献者中取得接触病原体的淋巴和黏膜组织的样本进行分析。捐献者年龄为1560岁,为HIV阴性且无其他慢性病、免疫性疾病或癌症。研究者发现T细胞是高度划分的,检测的每种组织都有其特异的初始、效应和记忆T细胞。尤其是产生IL2的效应记忆CD4+T细胞在黏膜组织中大量存在,并作为中央记忆亚群聚集于淋巴组织。但T细胞在淋巴组织中保持初始亚群状态,在黏膜部位保持产生IFN一1的效应记忆CD8+T细胞状态。值得注意的是,记忆T细胞可在所有类型组织中表达T细胞活化标志CD69,但在循环亚群中并非如此。该研究结果对理解各组织对不同炎症和自身免疫病的应答方式有重要意义,并有助于这些疾病疫苗的开发。(张蔷整理徐冰校)万方数据