1、课前预习提问:1、基因工程概念2、DNA重组技术的基本工具?各个工具的作用?3、什么是黏末端?什么是平末端?4、DNA连接酶分哪两类?有什么区别?5、运载体需具备的条件?,知识回顾 1、基因工程需要的工具有限制酶、DNA连接酶和运载体;需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶。 2、限制性核酸内切酶又称限制酶,其主要从原核生物中分作用:特异性切割DNA作用特点:识别特定的核苷酸序列,并在特定的部位进行切割。作用部位:两个核苷酸之间的磷酸二酯键结果:形成黏性末端和平末端。 3、DNA连接酶作用:连接DNA片段之间磷酸二酯键。根据酶的来源不同,可分为Ecoli DNA连接酶和T4 DNA连接酶 4、运载
2、体:将体外重组DNA导入受体细胞 。 5、常用质粒作为运载体,具有以下特点:(1)能自我复制(2)具有一个或多个限制酶切割位点,便于外源基因插入(3)具有标记基因,可以鉴定目的基因是否进入受体细胞。,专题一 基因工程,1.1 DNA重组技术的 基本工具,学习目标 1、简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用 2、总结基因工程运载体需要具备的条件 3、认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新,预习反馈 1、问题 (1)三种工具及作用表述不确切(如分子运输车:质粒;限制酶:切割DNA分子,获取目的基因) (2)质粒的特点总结不全面 2、表扬,合作探究,EcoRI (在G和A之间切割),Sm
3、al (在G和C之间切割),黏性末端,平末端,同一种限制酶切割后形成的两个末端是什么关系?,反向重复序列,练习 以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段: CTGCA (2) AC (3) GC (4)G G TG CG CTTAA(5) G (6) GC (7) GT (8)AATTC ACGTC CG CA G请用DNA连接酶将它们连接起来: _和_能连接; _和_能连接; _和_能连接; _和_能连接。,2和7;3和6;4和8;1和5,GAATTCCGTAGAATTCGGATT,CTTCATGAATTCCCTAA,GAAGTACTTAAGGGATT,CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA ,含目的基因的DNA片段,运载体DNA片段,重组DNA分子片段,EcoRI,EcoRI,模拟制作,一、基因工程的概念. 二、DNA重组技术的基本工具 1.限制性核酸内切酶-“分子手术刀”2.DNA连接酶-“分子缝合针”3.运载体“分子运输车”,本课小结:,分类 作用,来源 作用 特点 结果,种类 作用 特点 条件,