1、中国 3000 万经理人首选培训网站区人工牛黄检验操作规程一、范围：本标准规定了人工牛黄的检测方法和操作要求；适用于本公司人工牛黄的质量检测。二、引用标准：中国药典 2000 年版一部附录，卫生部标准 WS3-132（Z-122）-98。三、质量标准：指标名称 法定标准性状 本品应为黄色疏松的粉末鉴别 （1） 、 （2） 、 （3） 、 （4）应呈正反应水分 5.0%检查 猪去氧胆酸 应符合规定胆 酸 13.0%胆红素 0.63%四、试剂：1、冰醋酸（AR）2、糠醛（AR）3、硫酸（AR）4、氯仿（AR）五、仪器和用具1、紫外分光光度计2、恒温干燥箱六、对照品1、胆酸对照品2、猪去氧胆酸对照品
2、3、贝斯来对照品中国 3000 万经理人首选培训网站区4、胆红素对照品七、操作步骤1、性状 本品为黄色疏松的粉末；味苦；微甘。2、鉴别 2.1 取本品适量，分为二份，置点滴板上，一份加硫酸，数分钟后显污绿色；另一份加硝酸，显红色。2.2 取本品约 100mg 量瓶中，加甲醇，超志处理使充分提取后用甲醇稀释至刻度，静置使澄清，取上清液作为供试品溶液。另取胆酸、猪去氧胆酸对照品，分别加甲醇制成每1ml 含 1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（2000 版中国药典一部附录 VIB）试验，吸收上述供试品溶液 4ul，对照品溶液 2ul，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-乙醇-
3、水（4:2:1:1）为展开剂展开，取出，于 105烘约 5 分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的斑点。23 取本品加甲醇制成 1ml24 取本品充 100mg3、检查3.1 水分 不得过 5.0%（2000 版中国药典一部附录 IXH-法页） 。3.2 猪去氧胆酸：对照品溶液的配制 精密称取猪去氧胆酸对照品适量，用甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液。供试品的溶液配制 精密称取供试品 100mg，用适量甲醇转移至 10ml 量瓶中，并稀释至刻度，密塞、振摇，使样品中猪去氧胆酸溶解，放置，制成每 1ml 含 10mg 的溶液，取上清液作为供试品溶液。检查法 照薄层色谱法（2
4、000 年版中国药典一部附录 VIB）试验，精密量取供试品溶液4ul 及对照品溶液 2ul，交叉点于同一硅胶 G 薄层板上，以异辛烷-正丁醚-冰醋酸（8:5:5）为展开剂，展开，取出晾干，喷以 10%磷钼酸的乙醇溶液，于 105烘约 5 分钟，猪去氧胆酸斑点的颜色应深于对照品色谱。4、含量测定：4.1 胆酸标准溶液的制备 取在 105干燥至恒重的胆酸对照品 12.5mg，精密称定，置 25ml 量中国 3000 万经理人首选培训网站区瓶中，加 60%冰醋酸溶液使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得（每 1ml 含胆酸 0.5mg） 。标准曲线的绘制 精密量取标准溶液 0.2、0.4、0.6、0.8
5、与 1.0ml，分别置于带塞试管中，均用 60%冰醋酸溶液稀释成 1.0ml，加新配制的糠醛水溶液（1100）各 1.0ml，在冰浴中放置 5 分钟，加硫酸溶液（以硫酸 50ml 蒸馏水 65ml 混合制成）13ml，混匀，在70水浴中加热 10 分钟，迅速移至冰浴中，放置 2 分钟，以相应的试剂为空白，照分光光度法（2000 年版中国药典一部附录 V） ，在 605nm 的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。测定法 取本品约 1.0g，精密称定，加 60%冰醋酸溶液数 ml，充分研磨，移入 50ml 量瓶中，残渣再加 60%冰醋溶液，研磨后，全部移入量瓶中，再用
6、60%冰醋溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密吸取续滤液各 1ml，分别置于甲、乙两个带塞试管中，于甲管中加新配制的糠醛水溶液 lml，乙管中加水 1ml 作空白，按标准曲线的绘制项下的方法自：“在冰浴放置 5 分钟”起，依法测定吸收度。标准曲线计算含量，即得。计算公式：MV100%含量% = Ms（1-水份）式中：M：从标准曲线中查得每 1ml 从试品含胆酸的 mg 数；V：供试品总体积数；Ms：供试品量（mg）4.2 胆红素对照品溶液的制备 取胆红素对照品约 10.0g，精密称定，置 100ml 棕色量瓶中，加氯仿 80ml 使溶解，超声处理，使充分溶解，加氯仿稀释至刻度，作为对照
7、储备液（0.1mol/L） 。精密吸取标准储备液 10.0ml，置 50ml 棕色量瓶中，加氯仿稀释至刻度，即为标准溶液（20ug/ml） 。中国 3000 万经理人首选培训网站区标准曲线的绘制 精密吸取胆红素对照液 4.0、5.0、6.0、7.0 与 8.0ml 分别置于 25ml棕色量瓶中，用氯仿稀释至刻度，即得每 ml 含 3.2、4.0、4.8、5.6、6.4ug 胆红素的标准液，在 453nm 处测定吸收度。以吸收度为纵座标，浓度为横座标，绘制标准曲线。测定法 取本品约 0.08g，精密称定，置 100ml 棕色量瓶中，加氯仿 80ml，超声处理使充分溶解，取出，加氯仿稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液在 453nm 测定吸收度，按标准曲线计算含量，即得本品中胆红素（C 33H36N4O6）的百分含量。中国 3000 万经理人首选培训网站区本品含胆红素（C 33H36N4O6）不得少于 0.63%。计算公式：MV100%含量% = Ms式中：M：从标准曲线中查得每 1ml 供试品含胆红素的 mg 数；V：供试品总体积数；Ms：供试品量（mg）4.3 注意事项：在制备胆酸、胆红素标准曲线时，取样应准确，应注意控制反应的温度、时间，并充分混匀。中国 3000 万经理人首选培训网站区
