1、Millicell ERS-2 User Guide系统测试在进行测量前，进行下列系统功能测试：仪表功能检测（电阻及电压测量需要）1 将仪表与充电器断开2 将 STX04测试电极（具有较短电线的电极）与仪表连接起来：将电极电缆末端的插头插入仪表上的INPUT接口。3 开关打到ON，模式打到Ohms ().4 仪 表 应显示 1000，如果不是，用 3/32”扁平头 螺丝刀调节R Adj，一直到显示1000为止。5 将模式调到 Millivolts，仪表应显示为0 。注意：如果仪表不能显示正确的数值，请参考疑难解答部分。电压测量前平衡电极：用Millicell ERS-2系统进 行电阻测量不需要
2、平衡电极。进行电压测量时，STX01电极需要进行平衡来消除补偿。平衡时，准备和测量时相同的电极液，或用 PBS缓冲液，0.15MNaCl或0.1M KCl。1 将Millicell ERS-2 仪表与充电器断开2 将 STX01电极与仪表连接起来：将电极电缆末端的插头插入仪表上的INPUT接口。3 开关打到OFF，模式打到Ohms ()，将 电极浸入电极液。当电压电极对连接到关着的仪器时，他们是内部短路，这使探头达到平衡。下表列出了推荐的平衡时间：如果电极 浸入溶液时间 从未被测试 24h 干燥储存 24h 在溶液中储存 2h 4 进 行 电极功能 检测（如下）电极功能检测（仅电压测量需要）1
3、 如果电极第一次使用，或者干燥储存后使用，按上述平衡电极程序进行。2 将 仪 表与充 电器断开，模式调到Millivolts。3 将 电 极尖端浸入与 实验培养液相似的电极液中（或者0.1-0.15MNaCl/KCl）。4 打开开关到ON 。5 如果仪表显 示为0 ，表示电极可以进行电压测量了，如果不是显示0，见疑难解答。测量细胞电阻和电压层流罩中准备如下：充好电的Millicell ERS-2系统；STX04测试电极；STX01或者STX03 电极 (Millicell 6, 12和24孔板测试), STX00电极(Millicell 96 孔板 测试 ), 如果要测 量电压则之前要进行电极
4、平衡；没有培养细胞的Millicell培养板；培养了细胞的Millicell培养板；70%的乙醇；3/32”平头螺丝刀电极灭菌：电极是没有灭过菌的，推荐用酒精灭菌，但是也可以用环氧乙烷、紫外 线或者杀菌剂灭菌。不能使用高温或者火焰灭菌， 电极无法承受高温。酒精灭菌流程如下：1 将电极插入70%乙醇浸泡15min做灭菌，取出电极风干15秒；注意：不能将电极浸入乙醇超过30min，这会削弱电 极的保护层，减短其使用寿命。2 用与实验培养液相似的电极液（或者0.1-0.15MNaCl/KCl）冲洗电极。3 若是进行电 阻测量，此时电极已可以使用4 若是进行电压测 量，电极应该被放在紫外灯照射。但是在
5、强的可见光和紫外光下会造成电极表面形成黑色氧化膜，正常情况下这层膜并不影响电极使用，但是防止电极暴露于强光可以防止氧化膜形成。电阻测量：注意：虽然仪表量程到13,000，但是10,000及以下才具有精确度。1 将细胞置于室温下2 如前所述，测试Millicell ERS-2系统3 确保仪表与充 电器断开4 将模式打到Ohms，开关打到ON5 将 电 极短的尖端浸入培养板内部，长的尖端浸入外部。短的尖端不要碰到膜上生长的细胞，长的尖端不要碰到外侧的底部。 为了实验结果的稳定和可重复性，确保电极平稳，并与培养板成90 。6 记录电阻空白电阻测量：1 把电极置入空白的杯中（如没有培养 细胞的培养板）
6、2 按照上述步骤5 测量空白杯中的 电阻电阻计算：1 组织电阻：用含细胞的培养板测出的电阻减去空白电阻，就是真实的组织电阻2 单 位面 积电 阻：电阻与组织面积成反比。膜越大，电阻越低。注意：24mm或更大直径的板的电阻值不应该换算成单位面积电阻，因为STX电极不能在一个相对大的膜面积内产生均一的电流密度。单位面积电阻用真实组织电阻乘以有效表面积即可，单位是cm 2。有效膜面积在下表中列出。单位面积电阻=电阻（）*有效膜面积（CM 2）单位面积=1 CM2单位面积电阻与膜面积无关，12mm及以下培养板获得的数据可以用来互相比较。Millicell Cell Culture Insert and
7、 Plate Effective Membrane Areaproduct Well Diameter (mm) Membrane Area (cm2)6-well standing insert 30 4.2 24-well standing insert 12 0.6 6-well hanging insert 24 4.5 12-well hanging insert 12 1.1 24-well hanging insert 6.5 0.3 24-well plate 10 0.7 96-well plate 4 0.11 电压测量：1 将细胞置于室温下2 如前所述，测试Millice
8、ll ERS-2系统，并确保电极平衡过3 确保仪表与充 电器断开4 将模式打到Millivolts ，开关打到ON5 将 电 极短的尖端浸入培养板内部，长的尖端浸入外部。短的尖端不要碰到膜上生长的细胞，长的尖端不要碰到外侧的底部。 为了实验结果的稳定和可重复性，确保电极平稳，并与培养板成90 。6 记录电压注意：如果在几次测量之间，为了避免样品交叉需要冲洗电极，用培养液冲洗，而不用蒸馏水电压模式下，如果仪表读数是正的，代表细胞组织的基地部比顶部要正；相反，如果读数是负的，代表基底部比顶部要负。系统的维护与存放仪表：不用的时候，仪表应该与充电器连接， 电池会处于持续充电状态，可以随 时使用。仪表
9、约可使用8小时，当电量很弱时会自动关机以避免对仪器造成的损害警告：为了避免腐蚀，不要将生理盐水或者培养液溅到或泼到仪表上；为了防止LCD屏幕变暗，请不要将仪表长时间暴露在日光下电池更换：Millicell ERS-2配备了一个 6V 220 mAh可充电NiMH 电池，可重复充电约500次。电池可在任何放电状态充电，可持 续充电而不造成损害。警告：为了避免对电池造成损害，请只使用配备的充电器充电根据使用情况，电池寿命约为1 到2年，NiMH 电池不使用时也是持续放电的。为了防止电池自放电，至少每两个月给电池充一次电。电池更换流程：1 用#1飞利浦螺丝刀，把Millicell ERS-2盒子的四
10、个螺丝卸下，将仪器盖子与下部分开2 电 池 组用金属盖着，在下部。将两个螺 丝下下，打开金属盖3 将 电 池组取出4 注意电池组连 接器的位置和电线颜色，这样新的电池组置入厚能保持正确的极性。将小塑料连接器从电路板直接拉出来。警告：如果把电池连接器极性弄反了，会导致人或机器的损害5 把新的电池 组放入电池的金属盖里，安置好6 重新把电池 组电线接到电路板里：把电池组的连接口排成一行，这样突出的那边面对电路板上的扣环。推连接口。7 重新组装仪 器的盖子和基部。8 对 新 电池至少充 电24小时9 处 理旧 电池电极：短时间存放（少于两周）：用于电阻测量，干燥存放即可。用于电压存放，将 电极尖端浸
11、入电极液中。将电极电缆插头与仪表连接，系 统内部就短路了， 电极的平衡得以维持。长时间存放（多于两周）：用Milli-Q或者等质量水冲洗，并存放在干燥黑暗处没用Milli-Q水冲洗掉盐以及蛋白质前，不可让电极干燥。电极清洗：1 用浸有70%乙醇的棉花轻轻擦拭电极尖端2 如果步骤1并不起效，将电极尖端放在未稀释的家用漂白剂里3min 。不要让漂白剂接触到尖端以上部位。然后立刻用水冲洗3 砂 纸 打磨（ 仅当电压测量时）：用提供的600-grade深蓝色砂纸或擦墨水橡皮轻轻 擦拭电压电极（位于电极尖端附近表面内部的两个银色芯片），不要擦拭尖端外侧的银色芯片。警告：重复擦拭会最后抹去Ag/AgCl 层打磨也不管用时，电极应该被更换了
